PayMap

Here are three AI tools recommended for supporting your learning: ChatGPT (chatgpt.com) Perplexity (perplexity.ai) Claude (claude.ai) These tools can greatly enhance your learning experience, but be mindful to protect your personal privacy when using them. 推荐使用这三款AI工具来辅助学习。但需要注意保护个人隐私信息。

1.关注 AI、区块链、数字币。比如，去数字币平台开户，准备好热钱包、冷钱包。 2.学习下门罗币和 worldcoin——未来数字货币两个非常典型的方向代表（但并不是建议去购买）。 3.要不断学习，适应时代和局势的变化，特别是数字货币、区块链和人工智能领域。必须做好充分准备，熟练掌握和应用这些技术，这样才能在关键时刻迅速做出反应。 4.推荐HBO纪录片 《货币电： 比特币之谜》 1.⁠ ⁠Focus on AI, blockchain, and digital currencies. For example, consider opening an account on a digital currency platform and prepare both hot and cold wallets. 2.⁠ ⁠Learn about Monero and Worldcoin—two very typical directions representing the future of digital currency (this is not a recommendation to buy). 3.⁠ ⁠Continue learning and adapting to changes in the times and the situation, especially in the fields of digital currency, blockchain, and artificial intelligence. You must be well-prepared, proficient in, and able to apply these technologies to react quickly at critical moments. 4.⁠ ⁠We recommend the HBO documentary Banking on Bitcoin. 1. 深入学习 AI、区块链和数字货币 建立基础知识：先从基础知识入手，了解 AI、区块链和数字货币的原理。在线平台如 Coursera、edX 或 Udacity 提供许多关于这些领域的免费或付费课程，可以帮助您掌握基础。 关注行业动态：订阅一些知名的科技网站和新闻平台，如 CoinDesk、AI Weekly 和 Blockchain News，以了解行业动态和最新趋势。 参与在线社区：加入 Reddit、GitHub 和 Telegram 上的相关社区，与行业专家和爱好者交流，以获取更多实用信息和见解。 2. 准备好数字货币工具 开立数字货币账户：选择知名且安全的平台（如 Kraken、Coinbase 等）开立账户，并进行身份验证，确保账户安全。 热钱包和冷钱包的使用：了解热钱包和冷钱包的区别，热钱包适合日常交易，而冷钱包则适合长期安全储存。考虑购买硬件冷钱包（如 Ledger 或 Trezor）以确保您的数字资产安全。 3. 了解门罗币 (Monero) 和 Worldcoin 门罗币 (Monero)：门罗币是一种专注于隐私和去中心化的加密货币，了解其匿名特性和隐私保护的技术实现，有助于理解区块链中的隐私解决方案。 Worldcoin：作为未来数字货币的发展方向之一，Worldcoin 结合了区块链和生物识别技术，以实现广泛的货币分发。研究其分发方式和生物识别技术对加密货币未来的潜在影响，能提供新的视角。 理性分析与投资：学习它们的技术优势和局限性，但不必急于投资。关注这些项目更多是为扩展视野，并非建议立即进行经济投资。 4. 提升学习与适应能力 持续学习：科技变化迅速，尤其是区块链和 AI 领域。定期学习新知识，并适应技术趋势。可设定每月或每季度的学习目标，如掌握一种新的区块链协议或深入理解某种 AI 技术。 参与实践项目：尝试小规模的实践项目，如创建简单的智能合约或开发自己的 AI 模型，通过动手实践更好地掌握知识。 与行业人士交流：参加相关行业会议、研讨会或加入线上线下的兴趣小组，与其他专家和爱好者交流，不断获取新信息。 5. 观赏推荐纪录片以扩展视野 《货币电：比特币之谜》：这部 HBO 纪录片介绍了比特币的起源、发展和面临的挑战，是了解数字货币历史和现状的好方式。通过观看这类纪录片，您可以更好地理解数字货币如何影响金融系统，以及区块链背后的理念。 1. Deep Dive into AI, Blockchain, and Digital Currencies Build a Foundation: Start with the basics by learning about the principles of AI, blockchain, and digital currencies. Online platforms like Coursera, edX, or Udacity offer free or paid courses on these topics to help you gain a solid understanding. Stay Updated with Industry Trends: Subscribe to reputable tech websites and news sources like CoinDesk, AI Weekly, and Blockchain News to stay informed about the latest trends and industry developments. Engage with Online Communities: Join communities on Reddit, GitHub, and Telegram to interact with experts and enthusiasts, gaining insights and practical information. 2. Prepare Digital Currency Tools Open a Digital Currency Account: Choose a well-known and secure platform (such as Kraken, Coinbase, etc.) to open an account, complete identity verification, and ensure account security. Use Hot and Cold Wallets: Understand the difference between hot and cold wallets. Hot wallets are for everyday transactions, while cold wallets are for long-term secure storage. Consider purchasing a hardware cold wallet (like Ledger or Trezor) for safe digital asset storage. 3. Learn About Monero and Worldcoin Monero (XMR): Monero is a privacy-focused and decentralized cryptocurrency. Learning about its anonymity features and privacy protection technologies can help you understand privacy solutions in blockchain. Worldcoin: As one of the potential directions for the future of digital currency, Worldcoin combines blockchain with biometric technology for widespread currency distribution. Studying its distribution method and the implications of biometric technology on cryptocurrency can offer new perspectives. Rational Analysis and Investment: Focus on understanding their technical strengths and limitations without rushing into investments. Exploring these projects is more about broadening your horizons rather than immediate financial investment. 4. Enhance Learning and Adaptation Skills Continuous Learning: Technology evolves rapidly, especially in blockchain and AI fields. Set regular learning goals, such as mastering a new blockchain protocol or understanding an AI technique, to stay in tune with technological trends. Participate in Practical Projects: Engage in small-scale projects like creating simple smart contracts or developing an AI model to gain hands-on experience and deepen your understanding. Engage with Industry Experts: Attend industry conferences, workshops, or join online and offline interest groups to continuously gather new insights from other professionals and enthusiasts. 5. Watch Recommended Documentaries for Broader Perspective Banking on Bitcoin: This HBO documentary covers the origins, development, and challenges of Bitcoin, making it a great way to learn about the history and current state of digital currency. Watching documentaries like this can help you understand how digital currencies impact financial systems and the philosophy behind blockchain.

本文短链接：https://gettr.ink/pTxCMp MDC Handbook: Metropolitan Detention Center Brooklyn, New York Admission and Orientation Manual for Pre-Trial, and Holdover Inmates MDC手册：纽约布鲁克林大都会拘留中心预审和过渡囚犯的入狱和入狱指南 （修订于11/09） 总体介绍 当您被送到这个设施时，您将获得一个联邦注册号，这将在您在联邦监管下期间作为您的身份识别号。这个号码通常被称为您的“号码”或“注册号”。您有责任向家人和朋友提供您的号码，以便在您在我们的照顾下收到他们的信件。所有邮件在进入我们的设施时必须标有您的注册号，发出时也是如此。这是一个无烟机构。 囚犯信息 您已经接受了一名小组成员的社会筛查。您已经收到一张图片卡、牢房分配和床铺分配。您已被分配到计算机，并且除非获得小组成员的许可，否则不能移动到其他床位。您初次抵达时将被安置在G41号牢房（医疗入所筛查单位）。在G41中的囚犯将不得获访。一旦您经过医学检查并转移到永久单位，您需要负责请求并建立立即家庭成员的探望名单。 规则和条例 所有住房单位都张贴了英语和西班牙语的规则和条例，阅读和遵守这些规则是您的责任。本小册子列出了您在我们设施中拘留期间可以联系的部门。还有一节是关于您的权利和责任。 卫生 一个房间的两名囚犯有责任始终保持高标准的卫生水平。所有房间都将进行每日卫生检查。未能达到令人满意的卫生评分可能会导致纪律处分。这些说明是帮助囚犯每天保持其个人房间区域卫生的指南。每天早上7:30，您的床铺需要整理，生活区域需要整洁。来自主食和普通食物托盘的食物在任何时候都不允许进入您的牢房或生活区域。普通食物餐应在提供时刻食用。 公共区域 每名囚犯都有责任维护和保持单位的所有公共区域的卫生状况，例如：室外娱乐区、淋浴间、单位浴室和电视观看区。每名囚犯都应该把这些区域保持得像他们希望找到的那样。 领事访问 当确定一名囚犯是外国公民时，狱长可能允许该国领事代表访问谈论合法业务事项。先前关系已建立的要求不适用于领事访客。（步骤2.2.2） 囚犯向工作人员提出请求和行政救济投诉 如果您无法通过与工作人员的非正式联系解决投诉，或者通过“囚犯向工作人员提出请求”（BP-148），通常称为“请教”；并且您希望为行政救济提出正式投诉，您可以从负责记录和跟踪每项投诉的单元顾问那里获取“用于解决非正式的囚犯请求”表格。您通常会在3到5个工作日内收到回复。如果您对回复不满意，您可以获取“行政救济请求”（BP-229）。小组成员将尝试非正式解决办法，然后再将其转至狱长办公室。您必须在投诉发生基础之日起的二十（20）个日历日内提交您的投诉。每次提交只允许一项投诉。您通常会在接到投诉之日起的二十（20）个日历日内收到狱长的回复，并采取措施，并提供书面回复。 如果您不满意狱长的回复，您可以在二十（20）天内通过BP-230表格向东北地区主任提出上诉。BP-230表格可从您的单元顾问处获取。您通常会在收到上诉的三十（30）个日历日内收到来自区域主任的书面回复。如果您对此回复不满意，您可以在收到区域主任回复之日起的三十（30）天内向联邦监狱署总顾问和审查办公室助理总监提出最终上诉。这应该在BP-DIR-231表格上进行，并附有BP-229和BP-230的副本。您通常会在四十（40）个日历日内收到书面回复。 邮件 寄出信件 每个住房单位中都设有两个邮件箱，一个用于寄出一般信件，另一个用于“特别邮件”（请参阅有关“特别邮件”的部分）。您需要将一般邮件放入适当的邮箱中，并保持未封口状态。工作日，每天不晚于上午8:00，将从邮箱收集寄出信件，周末和法定节假日除外。请记住您对邮寄信件的内容负责。包含威胁、勒索等内容的信件可能导致违反联邦法律而受到起诉。所有寄出信件必须在信封正面的左上角显示完整的退信地址（见下面示例）。退信地址必须包括您的承诺名称。您的承诺名称是警察在您入所时根据拘留令上注明的使用的名字。 寄件 寄件信箱 每个住房单元有两个信箱，一个用于寄出一般信件，另一个用于“特殊邮件”（详见有关“特殊邮件”的部分）。您需要将一般邮件放在适当的信箱内，而不要封好。每天（周末和联邦假日除外）最迟在上午8:00前从信箱中收集寄件邮件。请注意，您对您寄出的信件内容负全责。含有威胁、勒索等内容的信件可能会导致违反联邦法律而被起诉。所有寄件邮件必须在信封正面的左上角显示完整的退信地址（请见下方示例）。退信地址必须包含你的承诺名。您的承诺名是被逮捕官员在您入住该设施时根据拘留令上注明的使用的名字。请告知您的通信者不要使用绰号或化名寄信。如果您的姓有连字符，请确保您的收寄信件显示双姓。信封的退信地址部分以及所有收寄信件和刊物应填写如下信息： 您的承诺名和注册号 大都会拘留中心 P.O. Box 329002 布鲁克林，纽约11232 信纸、信封、笔和铅笔由大都会拘留中心提供，不得从外部来源获得。您可以从商店购买额外物品。您必须贴上正确的邮资。单元工作人员通过邮件部门将帮助您确定正确的邮资。各种面额的邮票可通过机构商店供应。邮票或盖有邮票的物品不能通过邮件收到。您不能购买或持有超过60张一等邮票。根据要求提供国际、认证、挂号、保险和回执的邮寄服务。如果您没有足够的资金购买邮票，请联系您的矫正顾问。 监狱中贫困囚犯的邮资邮票： 对于既没有资金也没有足够邮资，并且希望寄送法律邮件（包括法院和律师）或行政救济表格的囚犯，将为其提供相应的邮资邮票。为防止滥用此规定，监狱长可能对法律和行政救济邮件的寄送施加限制。（参见方案说明5265.11，信件） 囚犯之间通讯： 在获得批准的情况下，您被允许与另一名囚犯通讯。请与您的个案经理联系以获得适当的批准。若要这样做，您必须是直系家庭成员或共同被告（有正在进行的诉讼）。所有经批准的囚犯间通讯往来均会被打开和检查。 特殊邮件： “特殊邮件”是指发送给或来自律师、联邦和州政府选举官员、州惩教机构、联邦或州假释/缓刑机构以及新闻媒体代表等个人或机构的通讯。您有责任告知您的法律顾问或有法定邮件特权的机构有关接收“特殊邮件”的要求。接收的“特殊邮件”必须符合以下标准才能被处理为“特殊邮件”： -寄件人地址必须注明某位具有律师资格的个人律师的名字。如果是从律师事务所或办公室转寄过来的，必须说明具体个人律师的名字和职称。 -信封外部必须含有标注“特殊邮件-只能在囚犯面前开启”。 -您有责任在信封外清楚标注“特殊邮件”或“法律邮件”的字样，以便能够作为此类邮件进行处理。 囚犯每日星期一至星期五可由邮房工作人员从住房单位领取寄出的特殊/法律邮件。囚犯必须亲自将自己寄出的信件、特殊/法律邮件直接交到单元值班官员手中，放入法律信箱中。如果寄件人地址不准确，那么寄出的特殊邮件将不予处理，而会立即退还给囚犯。接收邮件的单元值班官员必须立即确认发送邮件的囚犯是否与信封中的寄件人地址一致。试图以其他囚犯的名义发送特殊/法律邮件的囚犯将受到纪律处分。囚犯可以在递交给单元值班官员处理之前，自行密封特殊/法律寄出的邮件，除非其中存在违禁品，否则信件不会被打开。 邮房工作人员将按照政策要求，从单元值班官员处定时收取特殊/法律邮件，邮件将被加盖邮戳，并进行处理。每位单元值班官员收集特殊邮件需维护一本出库特殊邮件的日志簿，工作人员需在其中记录邮件接收时间、囚犯姓名和登记编号、寄件地址、接收工作人员签名、邮政室工作人员签名，以及邮件领取时间和日期。如果信封外部正确标明了“特殊邮件”的字样，邮件将被盖上日期/时间戳，并在信封的背面加盖“特殊邮件”处理说明，以方便法院或您的法律顾问查阅。 来自联邦法官办公室或美国国会成员的邮件将获得特殊邮件处理，即使在信封上没有标注“特殊邮件”。符合特殊邮件处理要求的收件邮件将不会在邮房内开启，但会被记录并加盖日期/时间戳。单位工作人员会将其送至您手中，并在交付给您之前检查是否有违禁品。 隔夜或快递邮件： 联邦囚犯不能使用寄出隔夜邮件的特权。来自隔夜邮递的来信将被视为普通通讯处理。符合“特殊邮件”处理要求的来信会被与普通来信一样处理。 包裹流程： 除了正常邮件或经批准的出版物之外，您必须持有包裹接收许可证才能收到任何物品。可以从单位工作人员处获得“接收包裹许可证”表格。任何没有包裹接收许可的包裹在邮局或递送到机构时将不被接受，并会被退回给寄件人。 来信处置： 每日除周末和联邦节假日外，所有邮件都会在美国邮局每日取件。来信会在收到后的24小时内投递给囚犯群体；经批准的包裹则在48小时内处理。邮件投递在下午4:00的机构清点后在住房单位进行。 所有收到的囚犯一般通讯邮件均会被打开和检查。未经批准的物品（违禁品）会被移除并在寄回给寄件人的同时附有解释拒收的理由表格。您会在邮件投递后收到一份拒收通知的副本。 接收包裹的授权 表格可从单位工作人员处获取。任何未经包裹许可的包裹，在邮局或递送至该机构的包裹都将不被接受，并将退回给发件人。 进站邮件 所有邮件每天在美国邮局中取回，除周末和联邦假日。进站邮件将在收到后的二十四（24）小时内交付给囚犯群体；授权包裹将在四十八（48）小时内交付。周一至周五，4:00 p.m. 机构点名后，在住宿单位举行邮件分发。 所有进站的囚犯普通信件都会被打开并检查。未经授权的物品（违禁品）将被移除并连同解释拒绝的理由一起退回给发件人。您将在邮件分发时收到任何拒绝通知的副本。 常常被退回给发件人的“讨厌”违禁品示例包括： 邮票或盖邮戳的信封 未签名的贺卡 音乐贺卡 空白文具 未按出版商转发的报纸 报纸的完整版块 一个包裹中的过多书籍或杂志 双面拍立得相片 裸露的个人照片 塑料新奇物品 接收出版物 报纸、硬/软封面的书籍和杂志必须直接来自出版商、书店或读者俱乐部。您在手中或通过邮件收到的书籍数量不得超过五（5）本，杂志数量不得超过十（10）本。任何包含多个出版物的信封或包裹必须在外部清晰标注内容的性质。未经授权的包裹内含有未经授权的物品将被拒收，整个内容将被退回给寄件人。除非监狱收到包裹授权，否则所有其他包裹将被退回给寄件人。 联邦监狱中的囚犯不得接收包含色情内容的出版物。邮局收到的商业出版物，如果具有裸露或色情行为描述，将不予分发。有关色情商业出版物限制的更多信息，请参阅机构补充规定 5800.10E“邮件管理”。 您不得通过邮件收到裸露或半裸主体的个人照片，或者照片中描绘性暗示的行为。 隔夜快递邮件 联邦囚犯没有发出隔夜邮件的特权。收到的隔夜邮件将按照一般信件处理。符合“特殊邮件”处理要求的隔夜邮件将与非隔夜的“特殊邮件”一样处理。 包裹程序 您必须持有包裹许可证才能接收除常规邮件或经授权的出版物之外的物品。您可以向单位工作人员获取“接收包裹授权”表格。任何在邮局或送到此机构的包裹，如果没有包裹许可证，将不被接受并将退回给寄件人。 出庭服装 布鲁克林都市中心（MDC Brooklyn）将为您提供作为出庭服装穿着的具体服装。您可以向家人、朋友或律师等外部来源获取民用法庭服装，需事先经单位工作人员批准。未经事先批准的民用法庭服装将不被接受，您也不能在联邦法院期间更换服装。经授权的民用法庭服装将进行清点并存放在研究与发展（R&D）处。 囚犯电话 在MDC Brooklyn的每个住房单元都设置了囚犯电话。囚犯可以在白天和晚上使用这些电话。如果电话设备损坏或操作被滥用，机构可能会取消您的电话使用特权。联邦监狱管理局保留对这些电话进行监控和录音的权利。您使用机构电话即表示同意进行此监控。囚犯电话通话限制为每次十五（15）分钟，每月总计300分钟。 法律通话 如果囚犯希望进行未经监控的律师-客户通话，而不使用ITS系统，他/她必须向其小组团队成员提出代收律师电话的请求。囚犯需要说明为何通话不能在ITS时间段内进行。小组团队将审核该请求，如获批准，最终批准由单位经理给出，由单位经理指定的工作人员将在未经监控的电话上拨打代收律师通话。通话的进行取决于工作人员的可用性。 在律师拒绝接受代收电话的情况下，将在需要时进行按时计费的律师-客户通话。囚犯仍须提交一个按时通话请求，提供通话不能在ITS时间段内进行的解释。在囚犯填写BP-199《囚犯取款基金请求》表格，并核实囚犯有足够金额支付通话费用后，将进行按时通话。通话的进行也取决于工作人员的可用性。 电话访问代码（PAC） 您将被分配一个九（9）位电话访问代码（PAC）。PAC是您的保密代码。所有电话活动都必须使用PAC进行处理。如果您认为自己的PAC已被泄露，请立即联系您的单位顾问。禁止向其他囚犯分发该PAC。一旦您将资金转移到ITS账户，将无法将其退回到您的食堂账户。 当使用囚犯电话系统时，以下活动是禁止的，否则将受到纪律处分： 进行三方电话； 拨打转接到其他电话号码的电话，无论该电话号码是否在您批准的电话列表上； 在电话上讨论或从事任何业务相关活动。禁止用电话进行赌博，拨打赌博热线或讨论赌博赔率。主动交易股票、商品或任何有价值的物品，或指示他人这样做； 使用电话传递或转达另一囚犯的信息给第三方； 暗示任何威胁或通过电话用暗号与他人交谈； 使用其他囚犯的PAC号码； 参与电话会议。 电话限制 在电话限制期间尝试使用电话。 在与另一位囚犯通话后将电话递给其他囚犯或接受其电话。 使用电话联系志愿者、合同工人、工作人员或任何在中途之家或监督释放中的前囚犯。 未经工作人员授权，安排将任何有价值的物品寄给其他囚犯或囚犯家人。 最后，不能在电话上从事任何其他活动或行为，工作人员认为这是规避我们的政策和规定的努力。 资金收入 囚犯必须通知家人，所有寄给囚犯的资金都应邮寄到以下地址的锁箱处： 联邦监狱局 插入囚犯登记编号 插入囚犯姓名 邮政信箱474701号 爱荷华州得梅因市50947-0001 资金必须以汇票或政府支票形式收到。不接受个人支票。这些文件必须标明囚犯的姓名和登记编号。囚犯也可以通过西联汇款将资金存入他们的食堂账户。应遵循以下流程： 必须使用西联汇款快速收款表格。 金额：填写 收款对象：囚犯登记编号和姓氏 城市代码：FBOP 州：DC 发件人姓名：填写 发件人电话区号和号码：填写 发件人地址：填写 发件人城市、州和邮政编码：填写 客户签名：须由发件人签署。 资金将在发送后最迟2-4小时内可供囚犯使用。发件人需支付9.99美元手续费。 衣物和床上用品发放/交换及洗涤 囚犯抵达机构时，将从接待和分发处获得初始的衣物套装。通常在囚犯住在G41时，将会从洗衣部门获得其余的衣物。 床单和床上用品 抵达MDC布鲁克林时，每位囚犯将由接待和分发官员发放以下物品。这些物品将被视为所有入狱囚犯使用的标准配发物品。 一条毛毯 一个枕套 两块洗脸布 两条床单 两条毛巾 这些物品不得用作地板垫，并且不得更改。违反这些规定可能导致事件报告。 探访时间 周一至周五和节假日的探访时间为下午12:00至晚上7:45。周六和周日探访时间为上午8:00至下午3:00。探访开始和结束时可允许短暂拥抱和亲吻。超过此范围的身体接触将不被允许，并且将是终止探访的理由。 探访信息 所有访客必须列在您的批准访客名单上。如果您的直系家庭成员姓名与您的姓名不匹配，您必须提供文件（出生证明、结婚证书）以核实关系。在提供与孩子关系的出生证明和BP-629访客信息表后，您的孩子的母亲和父亲将被允许作为直系家庭探访。这些表格必须直接寄给您的单元矫正辅导员。在访问名单上没有潜在访客的情况下，将导致探访被拒绝。每个单元的探访时间和安排均张贴在单元布告栏上。 到达大都会拘留中心的路线 皇后高速公路（BQE），在39th街出口，继续到第四大道，左转。沿第四街向北，左转到第三大道。右转到第三街。向北右转到第二大道，继续向北到32nd街。左转到32nd大道，然后右转到32nd街。再左转到第二大道。 当地交通 纽约市公交车B37在第29街和第三大道停靠。 纽约市地铁N或R列车到25街；向南步行四个街区，右转到29街，再向前走一个街区到第100号29街。 外州前来参观方向： 来自新泽西南部和费城： 从新泽西州立公路南行到出口13号Goethals桥/维拉扎诺桥（I-278）经维拉扎诺桥后下92街出口。在92街左转，然后右转4街，右转第2大道，左转第3大道。 许可的着装要求： 参观者应穿着既不挑逗也不诱人，以免对机构的正常运行造成干扰。不允许穿着具有性暗示或暴露的服装。除婴儿外，不允许赤脚。不允许穿着类似于监狱服装的衣物，例如卡其或绿色军事类型的服装。以下服装被禁止： 短裤（12岁以下的儿童除外） 无袖上衣（婴儿和12岁以下的儿童除外） 运动裤、运动衫、太阳裙、内衣、包裙、露脐装、低胸上衣或低胸裙子。 吊带衫、泳衣或露背上衣 帽子、帽子、发带或头巾 弹性裤、紧身裤或带有明显破洞的服装 大衣、冬季夹克或防风外套 任何类似于监狱或工作服的服装 具有性暗示、暴露或半透明的服装 无论是囚犯还是访客都必须穿着得体。 需要身份证明： 所有访客必须提供适当的身份证明（驾驶执照、护照等），方可进入。身份证上的姓名必须与访客名单上的姓名完全匹配，否则可能被拒绝参观。身份证可能会被扫描以核实真实性。持有篡改或伪造身份证明的访问者将被拒绝进入机构。进入机构的访客可能会接受搜查。任何拒绝搜查或拒绝签署《18号法典》（英文或西班牙文）声明的人将被拒绝进入机构。访客的所有携带物品将被搜查。访客必须在工作人员面前签署此表格。访客必须在所有物品被搜查时在场。访客可能会接受手持金属探测器和毒品检测设备检查。探监处官员将不为访客或囚犯存储任何物品。 第1001节，《18号法典》规定，“做出虚假声明的处罚是不得超过25万美元的罚款或不得超过五年的监禁，或二者兼有。”此外，第1791节，《18号法典》规定，任何人将在未经监狱或惩教机构典狱长知情同意的情况下，将物品引入或试图引入监狱或惩教机构场地内，或把物品带离，或试图寄送物品，将处以长达20年的监禁。 儿童特殊规定： 囚犯有责任确保其访客的行为得体。囚犯及其访客对其子女的行为负责。未进行得体访问的将会被终止。 特殊访问： 特殊访问或“延长访问”可能会在指定的探监日获得批准，必须经队长和单元经理预先批准。特殊访问不得用于规避对访客进行背景调查的要求。 未经授权物品： 婴儿车、载体、尿布袋、食物、荧光笔、报纸、杂志、相机、手机或任何其他电子/录音通信设备。前台不允许食物和饮料。探监室内设有自动售货机。访客不得通过探监带任何东西给囚犯。 授权物品： 一个小透明包、面额不超过5.00美元且总额不超过25.00美元的钱。探监期间所需数量的药物。两（2）片尿布、湿巾、一个（1）套婴儿衣服、两（2）小罐密封透明婴儿食品（不得使用玻璃容器）和一个（1）条毯子。 食品服务部门： 食品服务部门每周七天、每天三餐为机构准备食物，通过利用一组囚犯工作人员来提供。除了主餐外，根据卫生服务部门认为必要提供的医疗所需餐，如糖尿病托盘。 前厅不允许携带食物和饮料。探望室内有自动售货机可用。探访者不能通过探访途径为囚犯携带任何物品。 被授权携带物品包括： 一个小号透明手提包，面额不超过5美元且总额不超过25美元的钱。探访期间所需的药物数量。两片尿布，湿巾，一套婴儿衣物，两个小份封装好的婴儿食品（不得使用玻璃容器），一条毯子。 食物服务部门： 食物服务部门每天为全院提供三餐，七天在使用囚犯工作组。除了主食外，根据卫生服务部门的要求提供医疗所需餐，如糖尿病餐。为满足所有囚犯的宗教饮食限制，提供常规餐（要加入常规饮食计划，请向牧师提交请求）。 为要求素食饮食的囚犯提供无肉餐（要加入无肉饮食计划，请向食品服务管理员提交请求）。周一到周五，早餐6:00提供，午餐11:00提供，晚餐在下午4:00点清点后提供。周末餐饭时间安排为早餐6:45提供，早午餐11:30提供，晚餐在清点后提供。 DNA检测 公共法案106-546要求联邦监狱局（BOP）从被判犯有符合条件的联邦罪名的囚犯那里获取DNA样本。如果您被判有罪，您可能会被您所在单位的团队通知需要提供样本。该团队将提供有关符合条件的当前或过去罪行、采集过程、不遵从的后果以及有关该法律实施的任何疑虑的信息。 拒绝医疗治疗 所有患者有权拒绝任何作为知情同意的一部分所提供或推荐的医疗治疗。如果您拒绝推荐的医疗检查或治疗，这将被记录下来。您将被要求签署一份拒绝治疗表格，表格将解释这种拒绝可能造成的后果和并发症。如果您拒绝签署此表格，工作人员将签署此表格以证明您拒绝签字。您有权接受有关您拒绝可能导致的不良后果的咨询。 牙科服务 预审和留置的囚犯只会接受紧急牙科治疗。如果您有牙科紧急情况，请在单位的病号呼叫列表上报名。 囚犯医疗费用分担计划 根据2000年《联邦囚犯医疗费用分担法》（P.L. 106-294, 18 U.S.C. § 4048）的规定，联邦监狱局通知囚犯医疗费用分担计划，该计划自2005年10月3日起生效。 如果您在请求医疗服务时接受与您请求的医疗服务相关的健康护理，您必须支付每次医疗访问的2.00美元费用，费用将从您的囚犯商店账户中收取。这些请求的预约包括病号呼叫和在下班后请求看医疗提供者。 如果您通过听证会程程序被认定为对另一囚犯造成伤害并导致该囚犯需要医疗访问，您必须支付每次医疗访问的2.00美元费用，费用将从您的囚犯商店账户中收取。 如果您被认为是贫困囚犯，将不从您的囚犯商店账户中扣除费用。 非处方药品计划 建立了一个计划，使囚犯可以更容易获得非处方药品，将这些药品放在商店出售，并改进医疗资源的分配，以便满足囚犯的医疗需求。囚犯将在监狱商店获得非处方药品。囚犯可以使用个人资源购买用于化妆、一般卫生问题或轻微医疗症状的非处方药品。 在医疗部门初诊/病号呼叫期间，医护人员将根据与化妆、卫生问题或轻微医疗症状有关的投诉，将囚犯转诊到商店。 病号呼叫程序 囚犯必须填写医疗问题的病号呼叫表格，并将其放入单位的病号呼叫箱中。每周一至周五早上，医师助理（PA）将收集病号呼叫表格。医疗人员审核病号呼叫表格后，将安排囚犯预约看病。 紧急病号呼叫 如果您在正常病号呼叫时间之后或在周末和节假日需要医疗或牙科服务，您必须让单位官员或工作细节主管联系卫生服务。如果医生认为有必要并且时间允许，会满足您的要求。 药物处方 需要处方药物时，需要在中午服用药物容器后提交申请（11:30-12:30小时）。药品补充处方将在晚间服药线时发放。由于医疗预约而需要的处方药物将被配药并分发给您。在申请药物处方补充时，您必须提交带有标签的药物容器以供药剂师使用。 限制药物服用时间 每天药物将在以下时间在单位送到： 早上5:00 - 6:45 上午9:00 - 11:00 晚上7:00 - 10:30 在“服药线”时，囚犯必须出示他们的监狱身份证才能领取药品。 卫生保健权利和责任 在联邦监狱局的监管下，您有权以认可您基本人权的方式接受卫生保健服务。同时，您也接受合作与您的卫生保健计划，并尊重您的卫生保健提供者的基本人权。 疼痛治疗中患者的权利和责任 作为患者，您可以期待： 权利 相信您疼痛的描述。 关于疼痛和疼痛缓解措施的信息。 致力于疼痛预防和管理的关心员工。 对疼痛描述的迅速回应的健康专业人士。 我们期待您： 责任 询问您的医生或护士有关疼痛管理的预期。 与您的医生和中级提供者讨论疼痛缓解选择。 与您的医生和中级提供者一起制定疼痛管理计划。 在疼痛刚开始时要求缓解疼痛。 帮助您的医生和中级提供者评估您的疼痛情况。 告诉您的医生或中级提供者如果您的疼痛没有得到缓解。 告诉您的医生或中级提供者您对服用止痛药物的任何担忧。 权利： 您有权根据您所在机构的相关程序访问医疗保健服务。健康服务包括医疗求诊、牙科求诊以及所有支持服务。如果您所在机构实行罪犯共付制度，由于个人资金不足而无法支付您的医疗保健费用时，不能因此拒绝提供健康服务。 您有权了解您的医疗保健提供者的姓名和专业资质，并且应受到尊重、体贴和尊严对待。 您有权向机构工作人员的任何成员提出关于您健康保健的任何顾虑，包括医生、卫生服务管理人员、您所在单元团队成员、副监狱长和监狱长。 您有权向联邦监狱局提供预先指示或生前遗嘱，这些文件将在您被送往医院住院治疗时为联邦监狱局提供指示。 您有权获得有关诊断、治疗和预后的信息。这包括被告知与预期结果显著不同的健康保健结果的权利。 您有权获取健康记录的可发布部分的复印件。 您有权受到私密检查。 您有权参与健康促进和疾病预防计划，包括关于传染病教育的计划。 您有权向健康保健提供者报告疼痛问题，及时并符合医学标准地评估和管理您的疼痛，获得有关疼痛及疼痛管理方式的信息，以及有关疼痛治疗的限制和副作用的信息。 您有权按照处方医疗提供者的建议，及时接受处方药物和治疗。 您有权获得健康营养食品。您有权获得关于健康饮食的指导。 您有权要求进行例行体格检查，根据联邦监狱局政策规定（如果您年龄在50岁以下，每两年一次；50岁以上，每年一次，并在您释放前一年内进行）。 您有权获得根据联邦监狱局政策定义的牙科护理，包括预防服务、急救服务和常规护理。 您有权获得一个安全、清洁和健康的环境，包括无烟居住区。 您有权按照联邦监狱局政策拒绝医疗治疗。拒绝接受某些传染病诊断检测可能导致对您采取行政措施。您有权接受关于拒绝医疗治疗可能带来的负面影响的辅导。 责任： 您有责任遵守您所在机构的健康保健政策，并遵循医疗保健提供者为您制定的推荐治疗方案。您有责任为您自己发起的任何健康保健接触支付确定的费用，不包括紧急护理。您还将支付为任意故意伤害或伤害其他任何罪犯提供护理的费用。 您有责任将这些提供者视为专业人员并遵循他们的指示以维护和改善您的整体健康。 您有责任以被接受的格式提出您的顾虑，比如向工作人员提交罪犯请求表格、打主线电话或遵循被接受的罪犯申诉程序。 您有责任向联邦监狱局提供准确信息以完成此协议。 您有责任保密这些信息。 您有责任熟悉当前政策并遵守这些政策以获取这些记录。 您有责任在检查过程中如有需要，应遵守安全程序。 您有责任维护您的健康，不要参与可能导致传播或感染传染病的活动，以免危害自己或他人。 您有责任与您的健康保健提供者诚实沟通您的疼痛和对疼痛的顾虑。您也有责任遵守处方的治疗计划和医疗限制。您有责任及时告知您的提供者您状况的积极和消极变化，以确保及时跟进。 您有责任对您的健康保健提供者诚实，遵守处方治疗并遵从处方指示。您也有责任不向任何其他人提供您的药物或其他处方物品。 您有责任健康饮食，不滥用或浪费食物或饮料。 您有责任通知医护人员您希望接受体格检查。 您有责任保持口腔卫生和健康。 您有责任保持个人和公共区域的清洁和安全，考虑他人的健康。您有责任遵守吸烟规定。 您有责任告知卫生服务部门任何因您拒绝治疗而引起的不良反应。您还应接受签署拒绝治疗表格的责任。 心理服务 MDC布鲁克林分院的心理学部为那些有精神疾病史并在监禁环境中难以适应的囚犯提供心理健康服务。工作人员被分配到各个楼层，以加快对囚犯的心理健康问题处理。在非紧急情况下，囚犯需要向心理学部提交“囚犯请求与工作人员见面”的表格。对于精神病患者的药物通常会在入监时继续使用。如果有需要精神药物，囚犯将被列入看精神科医生的名单。 自杀预防 在监狱或监狱中经历抑郁和绝望并不罕见，特别是对于那些新近被监禁、正在服刑、遇到家庭问题或与其他囚犯相处困难、接收到坏消息的人。有时，囚犯会考虑自杀，原因是他们遭受的所有损失和所承受的压力。员工经过培训，会监测囚犯是否存在自杀的迹象，并将所有担忧转交给心理学部。然而，员工并非总能意识到囚犯所看到的。如果你个人经历了上述任何问题，或者你或其他囚犯显示出抑郁的迹象，请立即告知一名员工。抑郁表现为悲伤、频繁哭泣、不再喜欢平常的活动、退缩（远离他人、拒绝接听电话或拜访）、自我贬低、自责、或者绝望（送东西、声称“活着已无意义”）。你的言论可能挽救一条生命。 性虐待/侵犯预防和干预 什么是性虐待行为？ 根据2003年的《监狱强奸消除法案》，性虐待行为被定义为： 强奸：违背一个人的意愿强制进行的性交、口交、用物体进行性侵犯或性抚摸；不违背一个人意愿进行，但由于青少年或暂时或永久的精神或身体能力缺陷而无法获得同意的性交、口交、用物体进行性侵犯或性抚摸；或通过利用恐惧或恐吓的威胁进行的性交、口交、用物体进行性侵犯或性抚摸。 性交：阴茎与阴道或阴茎与肛门之间的接触，包括任何形式的渗透，无论多么微小。 口交：口与阴茎、口与阴道或口与肛门之间的接触。 用物体进行性侵犯：使用任何手、指、物体或其他器械去贯穿另一个人身体的生殖器或肛门开口，无论多么微细（注：这不包括在搜集证据或进行合法医疗治疗中从事这项活动的看管人员或医疗人员，也不包括卫生保健提供者为了维护监狱内部安全进行身体腔体检查）。 性抚摸：触碰他人的私密部位（包括生殖器、肛门、腹股沟、胸部、大腿内侧或臀部），以获得性满足为目的。 性行为不端（仅限员工）：使用淫秽的性语言、手势或以性满足为目的的视觉监视。 注意：即使两名或多名囚犯之间的性行为或接触没有引起异议，这种行为是被禁止的，且可能属于非法行为。即使双方没有提出异议，囚犯与员工之间的性行为或接触始终是被禁止和非法的。 你有权远离性虐待行为 在你被监禁期间，没有人有权力强迫你参与性行为。无论你的年龄、体型、种族、民族或性取向如何，你都不必容忍性虐待行为或被迫参与不愿意的性行为。 预防性虐待行为中你的角色 以下是一些可以保护自己和他人免受性虐待行为的方法： 随时保持自信的姿态。不要让你的情绪（恐惧/焦虑）显露给他人。 不要接受他人的礼物或好意。大多数礼物或好意都是有附加条件的。 不要接受另一名囚犯成为你的保护者的提议。 找到一位你感到舒适可以讨论恐惧和担忧的员工。 保持警惕！不要使用违禁物质，如毒品或酒精；这些会削弱你保持警惕和做出正确判断的能力。 如果其他人要求你做你不想做的事情，要直接且坚定。不要向其他囚犯传达关于你对性活动意愿的混乱信息。 保持在监狱内良好照明的区域。 如果你感到害怕或觉得受到威胁 如果你感到害怕或觉得受到威胁或者受到压力要参与性行为，你应该与工作人员讨论你的担忧。因为这可能是一个难以讨论的话题，一些员工，比如心理学家，经过专门培训，可以帮助你处理这方面的问题。 如果你感到立即受到威胁，请接近任何工作人员并寻求帮助。确保你的安全是他/她的工作的一部分。 如果你遭受性侵犯 如果你成为性虐待的受害者，你应该立即向工作人员报告，他们会为你提供保护，指导你接受医学检查和临床评估。为了获得帮助，你无需指认囚犯或工作人员施暴者，但具体信息可能会让工作人员更容易知道如何最好地应对。即使你可能想在遭受袭击后清洗，但在淋浴、洗涤、饮食、更换衣服或使用厕所之前，看医护人员非常重要。医护人员会检查你是否有你可能没有察觉到的伤害。他们还可以检查你是否感染性疾病，如果需要的话，检查你是否怀孕，并收集任何性侵犯的物证。只有将对囚犯进行性虐待或性侵犯的个人举报，他们才能受到处分和/或起诉。 举报性虐待行为事件 如果你遭受性侵犯，告知一个工作人员是非常重要的。如果你目击了性虐待行为，告知工作人员同样重要。你可以告诉你的病例经理、牧师、心理学家、SIS、狱长或任何你信任的其他工作人员。联邦监狱局（BOP）的工作人员被指示保密举报信息，并仅在涉及囚犯受害者的福祉以及执法或调查目的的情况下，根据需要向相关官员讨论。 如果你不愿意与工作人员交谈，还有其他途径可以保密举报性虐待行为。 直接写信给狱长、地区主任或局长 你可以给狱长送去一封囚犯请求给工作人员的信（Cop-out），或者一封举报性虐待行为的信。你也可以给联邦监狱局的地区主任或局长写信。为了保密，请使用特殊的邮寄程序。 提出行政申诉 你可以提出行政救济请求（BP-9）。如果你认为你的投诉对狱长来说过于敏感，你可以直接向地区主任提出行政申诉（BP-10）。你可以从你的顾问或其他监仓工作人员那里获取表格。 写信给总检察长办公室（OIG） 总检察长办公室调查工作人员不当行为的指控。OIG是司法部的一个部门，不属于联邦监狱局。地址是： 总检察长办公室 邮政信箱27606 华盛顿特区20530 了解调查过程 一旦性虐待行为被举报，联邦监狱局和/或其他适当的执法机构将进行调查。调查的目的是确定虐待行为的性质和范围。在调查过程中，你可能会被要求做口供。如果提起刑事诉讼，你可能会被要求在刑事诉讼过程中作证。 为性虐待行为受害者提供的心理咨询计划 大多数人需要帮助来从性虐待行为的情绪影响中恢复过来。如果你是性虐待行为的受害者，不管是最近发生还是过去的，你都可以寻求来自心理学家或牧师的心理咨询和/或建议。危机咨询、应对技能、自杀预防、心理健康咨询和精神咨询都对你开放。 针对施暴者的管理计划 那些在联邦监狱局监禁期间性虐待/侵犯他人的人将受到最严厉的处分和起诉。你将被转介到心理服务进行风险评估和治疗管理需求。是否遵守治疗或拒绝治疗将被记录下来，并且可能会影响你的拘留条件和释放。如果你觉得自己需要帮助来避免参与性虐待行为，心理服务是可以提供的。 联邦监狱局政策定义 禁止行为 囚犯如果与他人有不当的性行为或对他人有性行为方面的指导，将被控以囚犯纪律政策下的以下禁止行为。 员工不当行为 《员工行为准则》禁止员工参与或允许他人参与性、淫秽、亵渎或辱骂性语言或手势，以及对囚犯进行不当的视觉监视。为了换取性恩惠而影响、承诺或威胁囚犯的安全、看管、隐私、住房、特权、工作细节或项目地位也是被禁止的。 联系办公室 美国司法部 - 总检察长办公室区域办事处 办公室名称 地址 美国司法部 - 总检察长办公室地区办公室： 办公室名称 地址 中央办公室 华盛顿特区宾夕法尼亚大街950号, 西北区4322室, 邮编20530-0001 中部大西洋地区办公室 马里兰州安纳波利斯结合处10010号, 100-N室, 邮编20701 北部中部地区办公室 堪萨斯州堪萨斯城州大道400号, Gateway Complex Tower II, 8楼, 邮编66101-2492 东北地区办公室 宾夕法尼亚州费城第二街和栗子街, 美国海关大楼, 7楼, 邮编19106 中南部地区办公室 德克萨斯州达拉斯西雪普路4211号, 300室, 邮编72519 东南部地区办公室 乔治亚州亚特兰大北坎普克里克大道3800号, SW大楼2000, 邮编30331-5099 西部地区办公室 加利福尼亚州都柏林都柏林大道7950号, 3楼, 邮编94568 教育部门：法律文件的复制 为了复制法律文件的副本，囚犯可以在主要法律图书馆中使用复印机。囚犯需要从商品部购买复印卡才能使用这些机器。对于那些被关在单独禁闭单位（SHU）的囚犯，教育人员会定期提供并收集请求表格。对于单独禁闭单位的囚犯，可以通过填写BP-199表格免费查看法律文件或购买复印件，每份15美分。 贫困囚犯 - 法律文件的复制 如果待复制的材料较少，且复制请求不大或过多（超过20页），教育部门工作人员可以为贫困囚犯免除复制费用。如果没有资金的囚犯提出了大量复制请求，则需提交“囚犯请求给员工”给教育主管。教育主管将审查该请求，并在有需要时与法律部门和法院书记商讨，以批准确实需要的复印件。 教育/娱乐部门的使命是提供法律规定的强制识字和英语作为第二语言（ESL）课程，以及满足囚犯群体需求和兴趣的其他教育/休闲和相关课程，为囚犯提供积极利用时间的项目选择，促进成功重新融入社区。 暴力犯罪控制和执法法案以及《监狱诉讼改革法案》（VCCLEA/PLRA）规定，美国公民且犯罪行为发生在1994年9月13日至1996年4月26日期间，且缺乏高中文凭的囚犯，需要参加并取得GED证书以获得良好表现时间。 性犯罪代码 代码 描述 性犯罪代码表 代码 描述 101/(A) 性侵犯 205/(A) 从事性行为 206/(A) 提出性建议 221/(A) 与异性成员在未经授权的区域内 300/(A) 猥亵行为 教育项目 在考虑囚犯是否有资格获得最大数量的GCT时，局方将考虑犯罪日期在1996年4月26日或之后的犯人，如果他们缺乏高中学历，是否参与并取得了获得GED学历方面的满意进展。强制注册期为240小时。GED验证在犯人提供原始证书或官方GED成绩，或在判决前调查报告中官方验证成绩之时确立。 英语作为第二语言（ESL）（强制项目） ESL是1990年犯罪控制法案实施的强制项目。该法案规定了所有英语能力有限的被判囚犯必须参加至少240个教学小时的ESL项目，或直到达到八年级水平。 给囚犯提供了各种教育项目。课程表会张贴在单位的教育布告板上。如果您对日程表上列出的任何课程感兴趣，请向教育部提交《囚犯向工作人员提出请求》表格。 主要和基本法律图书馆 休闲图书馆和法律图书馆每周七天开放。周一至周五上午8:00至下午3:30开放。对于工作组囚犯，晚上5:30至8:30重新开放。星期日，西侧的图书馆将从上午7:45至下午3:45开放。 请注意，法律图书仅供参考，不得由任何原因从法律图书馆中拿走。拿走法律图书和参考资料将导致纪律行为。教育部设有复印机。囚犯可以购买一张复印卡，从商店购买后可使用复印机。仅可以通过《资金提取申请》表格来复制最近（30天内）入狱的囚犯以及可能错过商店购物的其他特殊情况（例如，法庭日期、医院行程等）。每份复印件价格为十五美分。休闲图书可以在各楼层的图书馆会话期间检出。被隔离监禁的囚犯可以通过适当的请求表格要求休闲图书。 抵达MDC布鲁克林的囚犯将被安排进行教育面试，以及根据需要进行测试。面试对所有囚犯来说是强制性的。在面试中将确定您个人的计划需求。如果对教育项目有任何疑问，请咨询教育工作人员。 娱乐活动 囚犯在不执行分配职责时可以享受各种休闲活动。休闲活动包括参加组织和非组织的游戏、健康活动、课程内外活动、体育、社交活动、艺术作品、体能训练、桌上游戏和棋类游戏。娱乐员工可提供帮助，规划和组织娱乐活动。有关娱乐活动的行为规则如下： 在娱乐区举行活动时，主队要对观众的行为负责。 在任何时候与裁判争论都是被禁止的。 被驱逐时必须立即离开该区域。 观众在任何时候不得进入球场/赛场。 行为规则不容许协商或个人解释。 裁判的判定是最终的，只有在极端情况下才能被推翻。 队伍可能因观众和/或队员的不当行为而被处罚，并可能因此放弃比赛。 宗教服务 MDC布鲁克林提供全面的宗教服务项目。全职牧师协调囚犯中不同信仰群体的各种宗教活动。合同牧师和志愿者进一步丰富了不同宗教群体的服务。 每个宗教信仰都会举行主要的每周仪式，可能会在一周内的其他时间举行经文研读或祷告会。 每个囚犯必须在SENTRY上声明一个“宗教偏好”，作为他档案的一部分。只有那些宗教偏好需要的囚犯才能享受某些宗教实践或程序；例如，宗教头饰、工作日、认证食品计划饮食和年度仪式餐。 我们教堂的使命是满足所有信仰的基本宗教需求。我们鼓励在友谊和合作的环境中，不同宗教传统之间的尊重和宽容。 提供的服务： 所有信仰群体的宗教时间表。 鼓舞人心的图书馆、视频、录音磁带和其他学习辅助工具。 辅导或咨询 - 与牧师联系安排会议。 社区资源 - 志愿者、宗教团体。 承包的牧师和志愿者进一步丰富了不同宗教团体的服务。 每种宗教信仰都会举行一次主要的每周礼拜，并可能在本周的其他时间举行经文研读或祈祷会议。 每位囚犯必须声明自己的“宗教偏好”，并作为其档案的一部分包含在SENTRY中。只有那些宗教偏好要求的囚犯才能享受特定的宗教习俗或程序；例如，宗教头饰、休息日、认证食品计划饮食和年度仪式性餐饮。 我们礼拜堂的使命是满足所有信仰的基本宗教需求。我们鼓励尊重与宽容，创设一种友谊和合作的环境，使不同宗教传统得以融洽共处。 提供的服务包括： 所有信仰团体的宗教时间表。 供灵感的图书馆、视频、磁带和其他学习辅助工具。 辅导或咨询 - 与牧师联系安排会议。 社区资源 - 志愿者、宗教团体。 牧师探访 - 牧师可能授权你的牧师、伊玛目、拉比、牧师或信仰代表按照方案说明与你会面。 宗教物品/物品 所有宗教物品必须通过特别采购订单（SPO）流程购买。宗教物品不能从家里寄来。 个人财产 所有个人财产将保持在规定的数量。个人物品必须始终保持整洁有序。以下是特定个人物品的要求：所有服装将存放在储物柜内，除了脏衣物在洗衣袋内、外套和鞋子。不放在储物柜内的洗衣、外套和鞋子应始终保持整洁有序。 由于火灾、安全和卫生规定 每个囚犯房间内最多只允许放置五（5）本书、三（3）本杂志和一（1）份报纸。除非被房间占用者使用或阅读，否则任何书籍、杂志或报纸都不得公开展示。 任何物品均不得存放在床垫下。任何时候都不得将任何木材、纸张、塑料或纸板盒等物品带到任何供囚犯使用的区域。在未经特别批准的情况下，任何囚犯区域内都不得对任何实体设施或固定装置进行更改。囚犯应检查自己的居住区域，并遵循所列的所有指南。如果有任何需要纠正的问题，请向适当的工作人员报告。 卫生是监狱局的一个主要关注领域。纽约布鲁克林维托都会拘留中心的卫生将严格执行。每个单元都将有指定的整洁工负责保持单元的公共区域清洁。保持卫生水平高有助于消除灰尘、污垢和导致细菌滋生的微生物。 囚犯纪律 该机构的政策和责任是为工作人员和囚犯提供一个安全有序的环境。为了实现这一目标，有必要建立程序来处理那些违反机构规章制度的个人。所有被提交到这个设施的囚犯都将受到这些程序的约束。 当工作人员目睹违反机构规章制度的行为，或者有合理相信发生这种违规行为时，将提交一份事件报告，或者工作人员可以尝试以非正式方式解决此事（取决于事件的严重程度）。如果工作人员提交了事件报告，中尉或指定的人员将进行调查。 被发现携带电子通讯设备或相关设备的囚犯可能会被指控违反第108条《危险工具的持有、制造或引入》或第199条（与第108条相似的条款），如果发现犯有被禁止行为，则将受到可用处罚的制裁。 单元纪律委员会（UDC） 中尉在某些情况下可能会尝试以非正式方式处理事件。如果非正式解决失败或不被认为合适，中尉将处理事件报告并在调查完毕后将其转发给单元纪律委员会（UDC）。UDC可能由两名或更多的单元工作人员组成，有权对轻微违规行为施加处罚。UDC可能决定某一违规行为需要更严厉的处罚，并可能将报告转发给纪律听证官（DHO）进行听证。 纪律听证官 DHO是一名持证官员，负责进行纪律听证。如果你的案件经DHO审理，将进行正式的听证。如果发现你有违规行为，DHO将对你进行处罚。你将被通知听证日期，并有充分的时间准备。 所有纪律行为的上诉均可通过行政救济程序进行。UDC的决定可以通过BP-9行政上诉表进行上诉。DHO的决定可以通过BP-10行政上诉表进行上诉。 违禁品 违禁品被定义为未经监狱商店购买、机构发放或监狱管理局授权保留的任何物品。 FBI转介 公共部门的法律也适用于该机构。任何行为，包括使用/持有武器、麻醉药品、劫持、越狱企图、袭击、强奸或对他人造成即将发生的危险的区域，都可能引起FBI介入。结果可能包括额外的联邦指控。 我们强烈建议您阅读并熟悉《5270.7囚犯纪律和特殊收容单元项目说明书》，并熟悉您在该体系下的权利和责任。 附件中将列出违规行为清单以及您的权利和责任。如果违反这些规定，您可能会受到纪律处分。 违规行为和纪律严重程度评定 最高类别 UDC应将所有最高严重性违规行为转交给DHO，并提出适当处理建议。 囚犯违规行为和处罚 编号 违规行为 处罚 001 持有违规物品 禁闭30天 002 袭击其他囚犯 单独监禁60天 003 挑起囚犯间纠纷 限制食物供应7天 004 从事非法交易 排除参加社区活动 005 故意破坏设施 财产赔偿并禁闭45天 囚犯违规行为和制裁 代码 违规行为 制裁 100 谋杀 A. 建议废止或延迟假释日期。 B. 放弃已获得的法定良好时间或未获得的纪律良好时间（高达100%），并/或终止或不允许额外的良好时间（额外的良好时间或纪律良好时间制裁不得被暂停）。 101 袭击任何人（包括性侵）或对监狱安全边界进行武装袭击（在这一级别，对袭击任何人提出指控仅在囚犯企图或实施严重身体伤害时使用） 禁止行为和制裁 低、中、高安全级别和行政机构 102 逃脱押送；从安全机构（低、中、高安全级别和行政机构）逃脱；或者在最低级别监狱以暴力逃脱。 B.1 取消通常年度50%至75%（27-41天）的良好表现时间信用（良好表现时间制裁不得暂停执行）。 103 纵火（只有在发现对生命构成威胁、对重大身体伤害构成威胁，或者为了进行最严重禁止行为，例如为了暴动或逃脱而被指控此类行为时，才属于此类别；否则，该指控应正确分类为代码218或329）。 104 拥有、制造或引入枪支、火器、武器、尖锐工具、刀具、危险化学品、爆炸物或任何弹药。 105 暴动 106 鼓励他人暴动 107 劫持人质 C. 纪律转移（建议执行）。 D. 纪律隔离（最长60天）。 E. 进行经济赔偿。 F. 扣留法定良好时间（注意 - 可以与A至E项同时执行 - 但不能是唯一执行的制裁）。 G. 丧失特权（注意 - 可以与A至E项同时执行 - 但不能是唯一执行的制裁）。 108 拥有、制造或引入危险工具（最有可能用于逃逸或逃逸企图，或者作为能对他人造成严重身体伤害的武器；或者对机构安全或个人安全构成危险的工具，例如锯条）。 109 （不可使用） 110 拒绝提供尿液样本或参加其他药物滥用检测。 111 引入任何未经医疗人员开具处方的麻醉品、大麻、毒品或相关器械。 112 使用任何未经医疗人员开具处方的麻醉品、大麻、毒品或相关器械。 113 拥有任何未经医疗人员开具处方的麻醉品、大麻、毒品或相关器械。 197 使用电话进行犯罪活动。 198 干扰工作人员履行职责。（行为必须具有极端严重性质。）此指控仅可在其他最严重指控不适用时使用。 199 干扰或扰乱监狱或联邦监狱管理秩序或安全运作的行为。（行为必须具有极端严重性质。）此指控仅可在其他最严重指控不适用时使用。 高级别类别 禁止行为和相应制裁表 代码 禁止行为 制裁 1 藏匿非法物品 可能被禁闭、处罚搬动或剥夺特权 2 违反规定的物品或服饰 可能被没收或罚款 3 捣乱或制造噪音 可能被禁闭或罚款 4 拒绝服从命令 可能被禁闭或罚款 5 越狱企图或逃跑 可能被加重处罚、禁闭或削减假释资格 6 攻击其他囚犯或狱警 可能被加重处罚、禁闭或单独关押 7 毁坏公共财产 可能被罚款、加重处罚或赔偿 8 赌博 可能被禁闭、没收赌资或罚款 9 持有违禁品 可能被没收、罚款或加重处罚 10 自残或自杀企图 可能被加重处罚、监控或转移至心理健康单位 禁止行为和制裁 代码 禁止行为 制裁 200 从无人监护的社区项目和活动以及开放式机构（最低安全级别）以及在非安全设施外逃跑，不使用暴力 制裁 A-G 201 与他人打架 H. 更换住房（宿舍） 202 （备注） I. 从项目和/或小组活动中移除 203 威胁他人肢体伤害或其他任何犯罪行为 J. 失去工作 204 敲诈、勒索、保护：要求或接收金钱或其他有价值物品以换取对抗他人的保护，以避免身体伤害，或受到举报威胁 K. 扣押服刑人员的个人财物 205 从事性行为 L. 没收违禁品 206 对他人进行性提议或威胁 207 佩戴伪装或面具 208 拥有任何未经授权的锁具或撬锁工具，或篡改、阻挠任何锁具设备（包括钥匙），或破坏、篡改、干扰、不当使用或损坏任何安全设备、机制或程序 209 任何食物或饮料的掺假 210 （不应使用） 211 持有任何官员或工作人员的制服 212 参与或鼓励集体示威 213 鼓励他人拒绝工作，或参与工作停工 214 （不应使用） 215 将酒精带入监狱管理局设施 216 向官员或工作人员提供贿赂，或任何有价值的东西 217 向任何人提供金钱，或从任何人那里接收金钱，用于引入违禁品或其他非法或禁止用途 218 破坏、篡改或损坏政府财产，或他人财产，价值超过100美元，或者破坏、篡改、损坏价值至多100美元的生命安全设备（例如，火警器）。 219 盗窃（包括通过未经授权使用通信设备获得的数据，或通过未经授权访问磁盘、磁带或计算机输出数据或其他存储数据的自动化设备获得的数据。） 220 进行、练习或使用武术、拳击（除了使用拳击袋）、摔跤或其他形式的身体接触，或进行军事演习或操练（除了经工作人员授权和进行的操练） 221 在未经工作人员许可的情况下与异性人员进入未经授权区域 222 制造、拥有或使用酒精类物质 223 拒绝向呼气式酒精检测仪呼气或参加其他酒精使用测试 224 袭击任何人（被指控此行为仅当犯人企图或实施了较轻的身体伤害或接触） 297 滥用电话，除了犯罪活动（例如，规避电话监控程序，持有和/或使用其他犯人的个人识别号码；第三方呼叫；第三方计费；使用信用卡号码打电话；多方通话；使用暗号交谈）。 298 干扰工作人员履行职责。（行为必须达到高度严重性。）仅当适用其他高严重性指控时，才可使用此指控。 适度类别 禁止行为和制裁表 代码 禁止行为 制裁 无 无 无 被禁止的行为和惩罚表 编号 被禁止的行为 惩罚 300 猥亵暴露 301 (不得使用) 302 未经授权药物的滥用 303 持有金钱或货币，除非经特别授权或超过授权金额 304 出租财产或任何有价值物品用于牟利或获取更多回报 305 持有任何未经授权保留或接收的物品，而非通过正常渠道发放给犯人 306 拒绝工作或接受项目分配 307 拒绝服从任何工作人员的命令（根据被违抗命令的性质可能分类并以更大严重性进行指控；例如，拒绝服从进一步骚乱的命令将被指控为105号，发生骚乱；拒绝服从进一步打架的命令将被指控为201号，打架；拒绝在被要求时提供尿样将被指控为110号） - A. 建议延迟或取消假释日期。 B. 放弃已获得的法定优良时间或未获得的良好操行时间，最多可达25%或最多30天，以较少者为准，并/或终止或取消额外的优良时间（额外的优良时间或良好操行时间处罚不得暂停）。 B.1 取消或限制一年内可获得的良好操行时间的最多25%（1-14天）（良好操行时间处罚不得暂停）。 C. 惩戒性转移（建议）。 D. 惩戒性隔离（最多15天）。 E. 进行经济赔偿。 F. 暂扣法定优良时间。 这张表格列出了与休假、社区计划、工作安排和监督员指示相关的各种违规行为和违规行为。它还包括一些后果，如丧失特权，如购物店、电影和娱乐等， 具有以下列： 违规行为：违规行为或违规的描述 后果：违规的结果或处罚 这张表列出了与休假、社区项目、工作任务和主管指令相关的各种违反和违规行为。它还包括了一些后果，例如失去特权，如购物、电影和娱乐等。 违规行为 后果 308 违反休假条件 309 违反社区项目条件 310 未经允许缺席工作或任何任务 311 未按照主管的指示进行工作 H. 更换住所（宿舍）。 I. 从项目和/或团体活动中移除。 囚犯不当行为和相关纪律措施 代码 不当行为 纪律措施 001 打架 禁闭一周 002 逃跑 加重劳动任务 003 藏匿违禁品 扣除通信特权 004 拒绝服从命令 暂停探视资格 005 捣乱他人 限制活动自由 006 自伤 必须接受心理评估 007 越狱 增加监控措施 008 贿赂狱警 严厉警告并移送司法机构 009 持有管制药品 转入更高级别监狱 010 性侵其他囚犯 终身监禁 犯人不当行为和相应的纪律措施表 编号 不当行为 纪律措施 312 对工作人员无礼 J. 工作岗位流失 313 向工作人员撒谎或提供虚假陈述 K. 扣押犯人的个人物品 314 伪造、假冒或未经授权复制任何文件、身份证件、货币、安全文件或正式文件（根据被复制物品的性质可能按照严重程度分类；例如，伪造释放文件以逃走，编号102或编号200） - L. 没收违禁品 M. 限制在宿舍活动。 N. 加班。 这个表格列出了与会议、聚会、区域、安全规定、设备使用和计数程序相关的违规行为和违规行为，具有以下列： 代码：每个违规行为或违规行为的数字代码 描述：对违规行为或违规行为的描述 这张表列出了与会议、聚会、场所、安全规定、设备使用和计数程序相关的未经授权行为和违规行为，具体包括以下列信息： 代码：各个未经授权行为或违规行为的数字代码 描述：未经授权行为或违规行为的描述 代码 描述 315 参与未经授权的会议或聚会 316 进入未经授权的区域 317 未遵守安全或卫生规定 318 使用任何未经明确授权的设备或机械 319 违反使用说明或张贴的安全标准使用任何设备或机械 320 未进行站立计数 321 干扰计数过程 322 （不得使用） 赌博 禁止行为 准备或进行赌博池 拥有赌博用具 未经授权与公众接触 给予金钱或其他具有价值的东西，或接受他人的金钱或其他具有价值的东西，而无需员工授权，发生在另一名囚犯或任何其他人之间 破坏、篡改或损坏政府财产，或价值不超过100美元的其他人财产 不卫生或不整洁；未能按照公布的标准保持个人和居住区的整洁 拥有、制造或引入非危险工具或其他非危险违禁品（工具不太可能用于逃跑或逃跑尝试，或用作能对他人造成严重伤害的武器，也不危害机构安全或个人安全；其他非危险违禁品包括食品或化妆品等物品） 在禁止吸烟的地方吸烟 电话的滥用（如会议电话、持有或使用另一名囚犯的PIN码、三方通话、提供虚假信息以准备电话名单等） 干扰职员履行职责（行为必须是中度严重性质）。此指控只能在其他中度严重性指控不适用时使用。 干扰或扰乱监狱或联邦监狱管理秩序运行的行为（行为必须是中度严重性质）。此指控只能在其他中度严重性指控不适用时使用。 低中度类别 被禁止行为和相应制裁 代码 被禁止行为 制裁 无 无 无 编号 禁止行为 制裁 400 持有他人财产 401 持有未经授权的服装 402 装病，假装生病 403 不得使用 404 使用辱骂或淫秽语言 405 纹身或自残 406 不得使用 407 与访客的行为违反局规定（通常失去这些特权的制裁可能是合适的） 408 从事商业活动 B.1 禁止通常情况下的年度可获得的最多12.5%（1-7天）的表现良好时间抵免（仅适用于在6个月内发现犯人再次违反同一禁止行为的情况下使用）；禁止通常情况下的年度可获得的最多25%（1-14天）的表现良好时间抵免（仅适用于在6个月内发现犯人第三次违反同一禁止行为的情况下使用）。（表现良好时间制裁不得暂停）。（有关VCCLEA暴力和PLRA囚犯，请参阅第4章第16页。） E. 进行金钱赔偿。 F. 暂扣法定的良好时间。 409 未经授权的身体接触（如亲吻、拥抱） 410 未经授权使用邮件 497 电话使用出现滥用行为（例如超过15分钟的通话时间限制；在未经授权的区域使用电话；在电话名单上加入未经授权的个人）。 498 干扰工作人员执行职责。行为必须是轻度至中度的严重性质。只有在其他较轻度严重性质的指控不适用时才使用该指控。 G. 丧失特权：购物、电影、娱乐等 H. 更换住房 I. 从项目和/或团体活动中另行移除 J. 失去工作 K. 扣押囚犯的个人财产 L. 没收违禁品 499 干扰或阻碍监狱或联邦监狱管理局的安全或秩序运行的行为。行为必须是轻度至中度的严重性质。只有在其他较轻度严重性质的指控不适用时才使用该指控。 M. 限制在住房内 N. 额外职责 O. 训斥 P. 警告 注意：协助他人实施任何这些罪行，试图实施任何这些罪行，以及计划实施任何这些罪行，在所有严重性质的类别中，将被视为与犯罪行为本身相同。 《囚犯权利与责任（541.12）》 机构中的权利和责任， 以下是表格标题： 权利和责任表， 以下是列： 权利：无 责任：无 机构中的权利和责任 权利和责任表 权利 责任 1. 作为一个人，你有权利期望所有人员对待你时，都应该尊重、公正和公平。 1. 你有责任以同样的方式对待其他人，包括雇员和被监禁者。 2. 你有权被告知有关机构运作的规则、程序和时间安排。 2. 你有责任了解并遵守这些规定。 3. 你有权自由选择宗教信仰，并进行自愿宗教崇拜。 3. 你有责任认识并尊重他人在这方面的权利。 4. 你有权获得卫生保健，包括：营养丰富的饮食、适当的床上用品和衣物、洗涤时间表以保持清洁、有规律地洗澡机会、良好的通风换气、定期运动时间、洗漱用品以及医疗和牙科治疗。 4. 你有责任不浪费食物，遵守洗涤和洗澡时间表，保持整洁的生活区，保持你的区域没有违禁品，并在需要时寻求医疗和牙科护理。 5. 你有权与家人、朋友以及新闻媒体成员进行拜访和通讯，需符合监狱局规定和机构指导方针。 5. 你有责任在拜访期间表现得体，不接受或传递违禁品，也不通过通讯违反法律、监狱规定或机构指导方针。 6. 你有权通过通讯无障碍和保密地访问法院（例如关于你的定罪是否合法、民事案件、待定刑事案件以及你的监禁条件）。 6. 你有责任诚实公正地向法院陈述你的请愿、问题和困扰。 7. 你有权通过面谈和通讯从自己选择的律师获得法律辅导。 7. 你有责任诚实公正地使用律师的服务。 8. 你有权参与法律图书馆参考资料的使用，以帮助解决法律问题。你也有权在有提供的法律援助计划下获得帮助。 8. 你有责任按照规定和时间表使用这些资源，尊重其他犯人的权利，并正确使用这些资料和帮助。 9. 你有权获得广泛的阅读材料用于教育目的和个人享受，包括社区寄来的杂志和报纸，但有一定限制。 9. 你有责任寻找并利用这些材料以获得个人利益，同时不剥夺他人对这些材料使用的平等权利。 10. 你有权参与教育、职业培训和就业活动，资源允许的情况下，以及符合你的兴趣、需求和能力。 10. 你有责任利用可能帮助你在监狱内和社区过上成功、守法生活的活动。你将被要求遵守相关活动的规定。 11. 你有权使用你的资金进行梦想和其他购买，符合机构安全和良好秩序的要求，开设银行和/或储蓄账户，并帮助你的家人。 11. 你有责任履行你的财务和法律义务，包括但不限于法院强加的评估、罚款和赔偿。你还有责任根据你的释放计划、家庭需求和其他可能存在的义务合理使用你的资金。 结论： 本手册旨在提供指南。程序可能会发生变化，从而影响本手册中概述的程序。我们将尽一切努力通知囚犯群体这些变化，任何重大变化都将张贴在您的单位布告栏上。在重新印刷之前，本手册将不会进行更改。如果您有任何进一步的问题或顾虑，请咨询您的单位工作人员，他们将乐意回答或引导您到适当的资源。 MDC_handbook_CN.pdf MDC_handbook.pdf

预告与警告：即将来临的全球震荡与唤醒 该视频中包含了多位牧师和预言家的预言和梦境，都警告即将到来的重大灾难和经济。崩溃作者强调，这些预示表明上帝将在美国和全球范围内进行一次大规模的“震荡和唤醒” ”。这些灾难不是来审判的，而是要唤醒那些灵里和世俗上都“冷淡”的人，让他们在基督的再临之前做好准备。作者呼吁大家要警醒祈祷，并为家人和自己做点什么准备好适当的物质。 关键点 ✦ 多位先知和牧师，如 Kent Christmas、Dana Coverstone 等，都有关于即将到来的重大灾难和经济崩溃的预兆和梦境。 这些预示预示着上帝要在美国和全球范围内进行一次大规模的“震动和唤醒” ”。 这些灾难不是来审判的，而是要唤醒那些灵里和世俗上都“冷淡”的人，让他们在基督的再临之前做好准备。 作者呼吁大家要警醒祈祷，并为家人和自己做点什么准备好适当的物质，如备齐食物、水、燃料等。 作者强调这并非出于恐惧，而是出于对神的话语的遵行，并相信神必定会眷顾和保守自己的子民。 Prophecies and Warnings: The Impending Global Shaking and Awakening This video includes prophecies and visions from multiple pastors and prophets, all warning of imminent major disasters and economic collapse. The author emphasizes that these prophecies indicate that God will conduct a large-scale "shaking and awakening" in the United States and globally. These disasters are not meant as judgment but to awaken those who are spiritually and worldly "lukewarm," so they can prepare before the return of Christ. The author urges everyone to stay vigilant in prayer and make appropriate material preparations for themselves and their families. Key Points ✦ Multiple prophets and pastors, such as Kent Christmas and Dana Coverstone, have had visions and dreams foretelling major disasters and economic collapse. These prophecies indicate that God will conduct a large-scale "shaking and awakening" in the United States and globally. These disasters are not meant as judgment but to awaken those who are spiritually and worldly "lukewarm," so they can prepare before the return of Christ. The author urges everyone to stay vigilant in prayer and make appropriate material preparations for themselves and their families, such as stocking up on food, water, fuel, etc. The author emphasizes that this is not out of fear but out of adherence to God's word, believing that God will surely care for and protect His people. 原文视频链接：https://youtu.be/5zzNSGo9zXk

本文短链接｜Short Link ：https://gettr.ink/RYSrm7 摘要： 土耳其对加密货币的热情源于经济不稳定和货币贬值。在高通胀和里拉持续走弱的背景下，越来越多的土耳其人将加密货币视为对冲经济风险和保值的重要工具。 土耳其加密货币市场的崛起：解读《资本市场法修正案》及其背后的实用价值 近年来，土耳其凭借其庞大的加密货币交易量，成为全球加密货币市场中的重要角色。据统计，土耳其已成为全球第四大加密货币交易市场，仅次于美国、印度和英国。土耳其的加密货币市场增长主要受经济不稳定和土耳其里拉贬值的推动，这使得许多土耳其人将加密货币作为对抗经济不确定性和保值的手段。 背景与市场动态 从2020年底到2023年底，土耳其里拉贬值超过300%，引发了对经济稳定性的广泛担忧。2024年8月23日，里拉兑美元汇率创下历史新低，超过34里拉兑1美元。这种经济环境促使土耳其的加密货币市场迅速增长，尽管此前缺乏明确的监管框架。 随着全球对加密货币监管的日益重视，土耳其也开始加强对这一领域的监督。尽管土耳其中央银行在2021年禁止使用比特币等加密货币进行支付，但市场依然蓬勃发展，急需更明确的监管指导。 土耳其加密货币监管的明朗化：《资本市场法修正案》 2024年6月，土耳其议会通过了《资本市场法修正案》，并于7月正式生效，标志着该国加密资产服务提供商（CASPs）的初步监管框架建立，主要包括以下要点： 监管机构：资本市场委员会（CMB）被指定为加密行业的监管机构，拥有授权运营、监督活动、实施制裁和采取必要措施的权力。 刑事责任：修正案规定了对未经授权的加密业务、挪用用户资产以及欺诈行为的刑事处罚。 监控与合规：交易平台需建立监控系统，以识别、防范并报告市场操纵和安全事件。 尽管缺乏全面的加密货币监管制度，土耳其现行法规仍对市场施加了一定的控制力，包括中央银行禁止使用加密货币支付，以及金融犯罪调查委员会（MASAK）要求交易所收集KYC数据以维护反洗钱措施等。此外，土耳其财政部长Mehmet Simsek也透露，涉及“加密钱包、加密资产服务提供商、加密资产托管商”的更全面监管法案已进入最终评估阶段，预计将很快出台。 政策解读：《资本市场法修正案》 2024年7月2日，土耳其政府正式通过了《资本市场法修正案》（法案编号7518），为加密资产服务提供商（CASPs）的运营设立了明确的法律框架。这一修订标志着土耳其加密货币市场进入了一个全新的合规时代。 1. 《资本市场法修正案》的出台背景 自2021年以来，土耳其因洗钱风险问题被列入FATF的灰名单。为了摆脱这一不利局面并明确加密货币的征税政策，土耳其开始加大对该领域的监管力度。如今，土耳其已成功从灰名单中移除，新的监管框架也随之出台，为加密货币市场的规范化发展奠定了基础。 2. 资本市场委员会（CMB）的新规出台 2024年7月2日，土耳其资本市场委员会（CMB）正式公布了第7518号《资本市场法修正案》，将加密资产服务提供商（CASPs）的规定纳入立法范围。这标志着土耳其加密货币监管进入了新阶段，所有加密资产服务提供商都必须获得CMB的许可，并遵守TUBITAK设定的标准。此外，与银行相关的活动还需获得银行监管与监督机构（BDDK）的批准。这些规定不仅强化了监管，也为加密资产行业的健康发展提供了保障。 3. 加密资产平台的设立条件 根据新法规，加密资产平台的设立需满足以下条件： 平台应设立为股份有限公司，并且最低实缴资本为5000万土耳其里拉。 所有股份均应以现金发行并登记在案。 创始人和管理者需符合资本市场法和其他相关法律的规定，具备足够的经济实力、诚实性和信任度。 加密资产平台的经营范围应明确，涵盖购买、销售、首次发行、分销、清算、转让和托管等活动。 4. 平台运营的过渡与清算 新法规要求，目前正在土耳其运营的加密资产服务提供商必须在一个月内向CMB提交所需文件，未能提交申请的公司则必须在一个月内做出清算决定。临时运营的平台必须在2024年11月8日前提交平台运营许可申请，否则将面临清退。 在过渡期内，共有76家交易所获得了继续运营的临时许可，并需遵守新法规的各项要求。与此同时，已有8家未能满足条件的交易所被要求清退。 5. 严格的监管与处罚措施 新法规对未经授权从事加密资产服务的个人和机构设立了严厉的处罚措施。违反规定的个人和法人将面临3至5年的监禁，并处以5000至10000天的罚款。而挪用委托资金或资产的行为将导致更为严厉的刑罚，最高可判处14年的监禁，并处以巨额罚款。 对于涉及欺诈行为以掩盖挪用行为的犯罪者，将面临14至20年的监禁，并处以最高20000天的罚款。此外，非法利用被撤销许可证的加密资产服务提供商资源的个人，也将面临最高22年的监禁和20000天的罚款。 监管框架的影响与前景 《资本市场法修正案》标志着土耳其在加密货币监管领域迈出了关键一步。这一修正案为加密资产服务提供商（CASPs）设立了明确的法律框架，使得加密货币市场的运营更加规范和透明。 增强市场信任与稳定性：通过设立严格的监管标准，修正案为加密货币市场引入了更高的透明度和责任感。这不仅有助于提高投资者对市场的信任，还能防止不正当行为的发生，从而为市场的长期稳定奠定基础。 推动合规与规范化发展：修正案要求加密资产服务提供商获得CMB的许可，并遵守严格的运营标准。这一要求将推动行业的规范化发展，淘汰不合规的市场参与者，促使更多合规企业参与市场竞争。 国际企业的入场与竞争：修正案出台后，已有多家国际知名交易所申请牌照，显示出土耳其市场对国际企业的吸引力。这一趋势可能会加剧市场竞争，同时带来更多先进的技术和服务，进一步推动土耳其加密市场的发展。 监管力度的加大与市场的整合：修正案不仅设立了更严格的监管标准，还对违法行为制定了严厉的处罚措施。这将有助于清理市场中的不法行为，促使市场更为健康、透明，并吸引更多正规企业参与其中。 市场增长的潜力：土耳其是全球第四大加密货币交易国，随着这一修正案的实施，加密货币市场可能迎来新的增长机遇。受益于更加明确的法律框架，土耳其市场的参与者将有机会在更加稳定的环境中发展和扩展业务。 《资本市场法修正案》不仅为土耳其的加密货币市场带来了新的秩序和规范，同时也为其未来的发展奠定了坚实的基础。随着更多企业的参与和市场的逐步成熟，土耳其加密货币市场有望迎来新一轮的繁荣。 实用价值： 对于投资者和企业来说，土耳其的新监管框架提供了一个更可预测和安全的环境，参与加密货币活动。对合规的重视以及引入严格的处罚措施，强调了遵守法律标准的重要性。考虑进入土耳其市场的国际企业将发现一个日益受监管的市场，拥有明确的规则和期望，使其成为加密货币领域发展的理想目的地。随着土耳其加密市场的不断发展，利益相关者应密切关注监管动态，调整策略，以把握新兴机会。 Turkey Emerges as the World's Fourth Largest Cryptocurrency Market: Analyzing the New Regulatory Landscape under the "Capital Markets Law Amendment" Abstract: Turkey's growing enthusiasm for cryptocurrency stems from economic instability and currency depreciation. Amid high inflation and the weakening of the Turkish lira, more Turks view cryptocurrency as a vital tool for hedging economic risks and preserving value. Turkey's Cryptocurrency Market Boom: Insights into the New "Capital Markets Law Amendment" and Its Practical Implications In recent years, Turkey has become a significant player in the global cryptocurrency market, driven by substantial trading volumes. According to data, Turkey is now the fourth-largest cryptocurrency market globally, following the U.S., India, and the UK. This rise is largely due to economic instability and the devaluation of the Turkish lira, which has led many Turks to turn to cryptocurrency as a hedge against economic uncertainty and a means to preserve their wealth. Background and Market Dynamics Between the end of 2020 and the end of 2023, the Turkish lira depreciated by over 300%, prompting widespread concern about economic stability. On August 23, 2024, the lira hit a historic low against the dollar, trading at over 34 lira per dollar. This economic environment has fueled the rapid growth of Turkey's cryptocurrency market, despite the lack of a clear regulatory framework in previous years. In response to global trends in cryptocurrency regulation, Turkey has begun to strengthen its oversight of the sector. Despite the Central Bank of the Republic of Turkey's 2021 ban on using cryptocurrencies like Bitcoin for payments, the market has continued to grow, necessitating clearer regulatory guidelines. Turkey's Clarified Cryptocurrency Regulation: The Capital Markets Law Amendment In June 2024, the Turkish Parliament passed, and in July, enacted the "Capital Markets Law Amendment," which has garnered significant attention in the crypto industry. The amendment introduces an initial regulatory framework for crypto asset service providers (CASPs), with key provisions including: Regulatory Authority: The Capital Markets Board (CMB) is designated as the regulatory body for the crypto industry, empowered to license operations, oversee activities, impose sanctions, and take necessary measures. Criminal Liabilities: The amendment outlines criminal penalties for unauthorized crypto operations, misappropriation of user assets, and fraud. Monitoring and Compliance: Trading platforms are required to implement monitoring systems to identify, prevent, and report market manipulation and security incidents. Despite the absence of a comprehensive regulatory system, existing regulations in Turkey, such as the Central Bank's ban on crypto payments and the Financial Crimes Investigation Board's (MASAK) requirement for KYC data collection to enforce anti-money laundering measures, still exert some control over the market. Additionally, Turkey's Finance Minister Mehmet Simsek indicated that more comprehensive crypto regulations, covering areas like crypto wallets and asset custodians, are in the final stages of review, suggesting further clarity in the near future. Policy Insights: The New "Capital Markets Law Amendment" On July 2, 2024, the Turkish government officially passed the "Capital Markets Law Amendment" (Law No. 7518), which provides a clear legal framework for the operation of crypto asset service providers (CASPs). This marks the beginning of a new era of compliance in Turkey's cryptocurrency market. 1. Background of the Capital Markets Law Amendment Since 2021, Turkey has been on the FATF's gray list due to concerns over money laundering risks. To improve its standing and clarify crypto tax policies, Turkey has increased its regulatory efforts in this area. The new regulatory framework has now removed Turkey from the gray list and laid the foundation for a more structured development of the cryptocurrency market. 2. New Regulations by the Capital Markets Board (CMB) The amendment, announced by the CMB on July 2, 2024, brings crypto asset service providers under formal legislative oversight. All CASPs must obtain CMB authorization and adhere to standards set by TUBITAK. Activities related to banking must also receive approval from the Banking Regulation and Supervision Agency (BDDK). These regulations strengthen oversight and ensure the healthy development of the crypto asset industry. 3. Establishment Conditions for Crypto Asset Platforms Under the new regulations, crypto asset platforms must meet the following criteria: Be established as a joint-stock company with a minimum paid-up capital of 50 million Turkish lira. All shares must be issued and registered in cash. Founders and managers must comply with capital market laws and other relevant legislation, possessing sufficient economic strength, integrity, and credibility. The scope of operations should include activities such as purchasing, selling, initial issuance, distribution, clearing, transfer, and custody of crypto assets. 4. Transitional Operation and Liquidation The new law requires current CASPs operating in Turkey to submit necessary documents to the CMB within a month. Companies failing to apply must decide on liquidation within a month. Temporarily operating platforms must submit their platform operation license applications by November 8, 2024, or face withdrawal. During the transition period, 76 exchanges received temporary licenses to continue operations under the new regulations, while eight that failed to meet the criteria were ordered to withdraw. 5. Strict Regulation and Penalties The amendment introduces severe penalties for unauthorized crypto asset services. Individuals and institutions violating the regulations will face 3 to 5 years in prison and fines of 5,000 to 10,000 days. Misappropriating entrusted funds or assets will result in harsher penalties, with imprisonment of up to 14 years and hefty fines. For crimes involving fraud to cover up misappropriation, offenders will face 14 to 20 years in prison and fines up to 20,000 days. Additionally, individuals who illegally use resources from CASPs with revoked licenses will face up to 22 years in prison and fines of 20,000 days. Impact and Outlook of the Regulatory Framework The "Capital Markets Law Amendment" marks a significant step forward in Turkey's cryptocurrency regulation. This amendment provides a clear legal framework for CASPs, ensuring more regulated and transparent market operations. Enhancing Market Trust and Stability: The amendment introduces higher transparency and accountability standards in the cryptocurrency market, helping increase investor trust and prevent malpractice, thereby laying a foundation for long-term market stability. Promoting Compliance and Orderly Development: The requirement for CASPs to obtain CMB licenses and adhere to stringent operational standards will promote the orderly development of the industry, eliminating non-compliant market participants and encouraging more compliant enterprises to compete. Attracting International Firms and Competition: Following the amendment, several well-known international exchanges have applied for licenses, highlighting Turkey's attractiveness to global businesses. This trend may increase market competition, bringing more advanced technology and services, further driving the development of Turkey's crypto market. Intensified Regulation and Market Consolidation: The amendment not only sets stricter regulatory standards but also imposes severe penalties for illegal activities. This will help eliminate unlawful behavior, foster a healthier and more transparent market, and attract more legitimate enterprises to participate. Potential for Market Growth: As the world's fourth-largest cryptocurrency trading nation, Turkey may see new growth opportunities with the implementation of this amendment. With a clearer legal framework, market participants in Turkey will have the chance to develop and expand their businesses in a more stable environment. The "Capital Markets Law Amendment" brings new order and regulation to Turkey's cryptocurrency market, laying a solid foundation for its future development. With more enterprises participating and the market maturing, Turkey's cryptocurrency market is poised for a new wave of prosperity. Practical Implications: For investors and businesses, the new regulatory framework in Turkey offers a more predictable and secure environment to engage in cryptocurrency activities. The emphasis on compliance and the introduction of stringent penalties for violations underscore the importance of adhering to legal standards. International firms considering entering the Turkish market will find an increasingly well-regulated landscape, with clear rules and expectations, making it an attractive destination for growth in the cryptocurrency sector. As Turkey's crypto market continues to evolve, stakeholders should closely monitor regulatory developments and adapt their strategies to capitalize on emerging opportunities. https://www.hpay.news/turkey/

"Thoughts and Action Guide on Mr. Guo's Eight Questions" ——Comrade: See You Next Year @justaction The eight questions raised by Mr. Guo offer a broad overview and foresight into future changes in the global landscape, serving as a guide for us to identify direction and take action. Mr. Guo urges us to reflect, hoping that every comrade can do their best, start from their surroundings, and continuously spread the truth of the Whistleblower Movement, building the New Federal State of China (NFSC). 1. What will happen if China's real estate financial crisis fully erupts? What should comrades in China do? What can they do? Thoughts: China's real estate financial crisis is currently unfolding, with the real estate and financial industries facing severe shocks, impacting many other sectors such as manufacturing and services. This will lead to economic stagnation and increased unemployment in certain industries. The Chinese Communist Party (CCP) will likely go to great lengths to maintain stability by issuing bonds, printing money to shift the crisis, and using mainstream and social media to continue deceiving the public. They will also use violent tools to suppress the people's protests. Comrades in China should try to transfer their assets abroad if possible, and those who can leave should do so to secure their survival. Those who cannot leave must protect themselves and their families, ensuring sufficient finances and maintaining social connections to sustain their lives. Under the condition of ensuring safety, they should spread the truth, including the harmful effects of the vaccine, the economic downturn caused by lockdowns, the dictatorship of Xi Jinping and the return to the Cultural Revolution, and the CCP's virus release. 2. What impact will a major financial and economic collapse in the United States have on the world? What should we do? What can we do? Thoughts: The United States is the engine of the global economy. If it experiences a major financial and economic collapse, the influence of the dollar will be weakened, further affecting the global economy. At the same time, the CCP might unite with Russia, Iran, North Korea, and some Middle Eastern and African countries to form another bloc against the Western world led by the U.S., leading to a divided world with increased political and economic exchanges between nations. In this situation, blockchain and digital currencies may see more opportunities. The NFSC should continue to support Himalaya Exchange, promote H-Coin and HPay, and ensure that platforms like Gettr and GNews grow stronger in terms of user base and content influence. 3. What should we do if Xi Jinping dies suddenly or is ousted by internal rivals, leading to a "Ceausescu-like" incident? What can we do? Thoughts: If Xi Jinping dies suddenly, figures like Zeng, Han, and Wang might seize the opportunity to take power, intensifying the internal struggle with Xi's faction. This would lead to a period of tension and instability in the domestic political scene, and many citizens might celebrate with fireworks. We should unite with comrades within the system, encouraging the more enlightened factions within the Party to abandon the evil CCP regime and push for greater political reforms, including lifting media and political restrictions, and allowing the people to vote. The NFSC should have enough strength to influence the domestic political situation during such instability, using its financial, social media, and international relations capabilities to promote good and suppress evil. 4. What should we do if Xi Jinping suddenly attacks Taiwan, causing a collapse in the U.S. and global financial markets? What can we do? Thoughts: If Xi Jinping suddenly attacks Taiwan, global supply chains will be disrupted, and the decoupling of the West from China will accelerate. Domestically, China could nearly close its borders, with the CCP imposing stricter controls over society and the population, such as centralized supply of goods, border controls, and possibly martial law in some regions, which would be worse than the lockdowns during the pandemic. At the same time, the CCP might once again spread viruses globally, leading to another pandemic. Comrades inside the Great Firewall should protect themselves and their families, while overseas Chinese should actively promote the message that "the CCP is not equal to the Chinese people," denounce Xi Jinping and the CCP, and emphasize that the Chinese people love peace and strongly oppose war and aggression. They should loudly declare that "world peace requires the elimination of the CCP." The NFSC should invest more resources in anti-CCP campaigns in the West to influence Western governments and public opinion, and to protect Chinese and Asian people. 5. If any of the above events occur, leading to a global economic collapse, wars in Ukraine and Africa, accompanying diseases and disasters, viral outbreaks, and a breakdown of the global food supply chain, with society erupting into wars between the rich and poor, with no distinction of race, region, or nationality, what should we do? What can we do? Thoughts: A global economic collapse would signal the fall of the old world order and the rise of a new one. This transition will impact global politics, national systems, and economic and social structures, directly or indirectly affecting everyone's lives. As individuals, our strength is limited; only by forming organizations and groups can we become stronger. Comrades in the NFSC should become more united, spreading the truth and making friends through social media, HPay life circles, organizing public activities, online social networks, and daily neighborhood interactions, whether online or offline. Under the unified planning and deployment of the farm alliance, we should gradually build a global social platform (Gettr), interpersonal networks and services (GClub), and farm bases with corresponding physical organizations, recruiting more comrades to join, expanding our strength, and becoming capable of defending against various disasters. 6. Whether Xi is ousted by internal rivals or is decapitated after attacking Taiwan, the CCP and Xi's faction will be eliminated. The ensuing power struggle will see figures like Zeng, Wang, and Han rise as a new "Yuan Shikai party," possibly seizing power and colluding with evil forces to control China's 1.4 billion people. What should we do? What can we do? Thoughts: If Xi is ousted, the new "Yuan Shikai party" of Zeng, Wang, and Han might use political reform slogans to win people's hearts while colluding with evil forces to continue exploiting the Chinese people under a rebranded dictatorship. In this scenario, we need to awaken more citizens to the ideas of the rule of law, democracy, equal rights, and a multi-party system where one person has one vote to elect the president. The NFSC, with its growing power and influence, should strengthen cooperation with the U.S. and Western governments, supporting enlightened forces within China to help establish a democratic representative and electoral system. A critical step in this process is to break through China's firewall, lift media restrictions, and achieve press freedom. 7. Regardless of how the above events unfold, the result will be that the world's just forces and people will choose the NFSC to represent the future of the Chinese people, advancing China's governance modernization, rule of law, and democratization. Mr. Guo will never participate in politics, but comrades should actively work towards achieving religious freedom, the righteous path, and a one-person-one-vote system. Comrades should ask themselves, what should we do? What can we do? Thoughts: We believe that the NFSC's strength and capability will be crucial in establishing a new China based on the rule of law, democracy, and international cooperation. Comrades should contribute their talents in politics, business, education, agriculture, and other fields. Everyone should think, plan, and act accordingly. We should start with ourselves and our surroundings, taking action in every aspect of life, every day, to contribute to religious freedom, the righteous path, and democratic elections. On a personal level, I hope to use my abilities to help those persecuted for their religious beliefs under the CCP, strengthen domestic civil society groups, and support the spread of freedom of belief and love. 8. If the "Chinese Dream" collapses, and the NFSC helps the world wake up from the Chinese nightmare, helping the Chinese people and the world achieve their dreams, what should we do? What can we do? Thoughts: We should: Continue to spread the truth about COVID-19 and the vaccines: Make the world aware of the CCP's collusion with evil forces to control the world. Promote the use of Artemisinin and Ivermectin to help those harmed by vaccines recover their health and reduce casualties. Continue to expose the evil nature of communism: Through the establishment of museums, exhibitions, websites, social media, and independent media, we should vigorously expose the CCP's past crimes, including the Cultural Revolution, the Tiananmen Square Massacre, the genocide in Xinjiang and Tibet, religious persecution, and the suppression of the Hong Kong democracy movement. This will help both Chinese and global citizens understand the evil nature of the communist system and rid the world of its "red poison." Accelerate the growth of the NFSC's strength and global influence: Establish unique and cutting-edge influence in innovative fields such as social media, cryptocurrency, blockchain technology, AI, quantum computing, and biomedical science. Recruit more comrades, cultivate the "second generation of the Whistleblower Movement," and encourage the unvaccinated population to have more children, creating a lasting legacy for the NFSC that could last a century or even a millennium. We should continue to promote the righteous path of the NFSC, helping China emerge from the shadows of the communist system, contributing to the transformation of its institutions, the recovery of its society and economy, the revival of morality, and the inheritance of its fine culture. At the same time, we should consistently highlight the hardworking, kind, and peace-loving nature of the Chinese people, striving to achieve a thousand years of peace between China and the world, earning respect and affection for Chinese people worldwide.

《对文贵先生八大问题的深思与行动指南》 ——战友：来年再见@justaction 七哥提出的八个问题，是纵观和预判未来时局变化的引子，给了我们辨识方向、开展行动的依据。七哥让我们思考，并希望每个战友都能从身边做起，力所能及地传播爆料革命真相，建设新中国联邦。 1. 中国房地产金融危机全面爆发，中国会发生什么？国内的战友该做什么？能做什么？ 思考： 中国房地产金融危机正在爆发，房地产和金融行业将受到巨大冲击，影响生产制造服务等诸多产业，导致国内经济低迷，某些行业失业率会更加严重。共产党可能拼死维稳，通过发债印钞转移危机，利用各类主流及社交媒体继续欺骗百姓，并通过暴力镇压民众的抗议。 国内战友应尽可能将资产转移到国外，能够“润”出去的应尽快行动；不能离开的要保护好自己和家人，确保有足够的钱财和人脉维系生活。在保证安全的条件下，传播真相，包括疫苗的危害、封控导致的经济衰退、习死皇的独裁统治和文革回归、以及共产党放毒等事实。 2. 美国金融经济大崩溃，会给世界带来什么？我们该做什么？能做什么？ 思考： 美国是全球经济的发动机，如果发生金融经济大崩溃，美元的影响力将被削弱，进而影响全球经济。同时，中共可能联合俄罗斯、伊朗、朝鲜及中东非洲国家形成另一个阵营与西方世界抗衡，世界将趋向分裂，国与国之间的利益勾兑将更为明显。 在这种情况下，区块链和数字货币可能迎来更多机会。新中国联邦应继续支持喜联储，推广喜币和HPay，同时增强盖特（Gettr）和Gnews的用户数和内容影响力，推动其不断壮大。 3. 习近平暴病而毙或被党内政敌除掉变成“齐奥塞斯习”事件，我们该做什么？能做什么？ 思考： 如果习近平暴毙，曾、韩、王等人可能乘机反扑夺权，与习家党的争斗加剧，国内政局将趋于紧张和不稳定。国内许多人可能会以放烟花爆竹的方式庆祝。 我们应联合体制内的战友，鼓励党内开明派摒弃邪恶的共产党体制，加大力度进行政治体制改革，放开新闻和党禁，让老百姓有选票。在不稳定的局面下，新中国联邦应利用自己在金融、社交媒体监督、国际关系合作等方面的实力，形成对国内政局的影响力，致力于抑恶扬善。 4. 习死皇突然攻击台湾，美国及世界金融市场大崩溃，我们该做什么？能做什么？ 思考： 如果习近平突然攻击台湾，全球供应链将断裂，西方与中国的脱钩进一步加速，国内可能陷入闭关锁国状态。共产党可能对社会和百姓实行更严厉的控制，如物资集中供销、边境控制、部分地区军管，情况将比疫情期间封控更为糟糕。 同时，共产党可能在全球再次放毒，导致疫情大流行。在墙内的战友应保护好自己和家人，海外华人应大力宣传“中国共产党不等于中国人”，声讨习死皇和共产党，强调中国人爱好和平，强烈反对战争和侵略，发出“要世界和平，唯有灭共”的呼声。新中国联邦应投入更多资源在西方世界发起灭共宣传，影响西方政府和民众，保护华人和亚洲人。 5. 任何一个以上事件发生，世界经济必然大崩溃，俄乌战争、非洲动乱战争、疾病灾难、病毒扩散、粮食供应链断裂，全社会爆发贫富战争。我们该做什么？能做什么？ 思考： 世界经济崩溃意味着旧的世界体系将倾倒，新的体系将建立。这种新旧交替对世界政局、国家制度、经济社会都将产生冲击，每个人的生活都会受到影响。作为个体的力量是薄弱的，只有形成组织和团体，力量才会强大。 新中国联邦的战友应更加团结，无论在线上还是线下，通过社交媒体、HPay生活圈建设、组织公众活动、网络社交以及日常生活邻舍交往，不断传播真相，广交朋友；在农场联盟的统一规划和部署下，逐步构建覆盖全球的新中国联邦社交平台（盖特）、人际网络及服务（GClub），以及农场基地及相应的实体组织，招募更多战友加入，把实力做大做强，具备应对各种灾难的能力。 6. 无论是习被政敌除掉，还是入侵台湾被斩首，共产党和习家党都将被消灭，随之而来的是曾、王、韩的新袁世凯党必然在中国谋取政权，与邪恶势力勾兑。我们该做什么？能做什么？ 思考： 习若被除，曾、王、韩的新袁世凯党可能借着政治体制改革的口号笼络人心，并与邪恶势力勾兑，改头换面统治剥削中国百姓。此时，我们需要唤醒更多的国人，让法治和民主思想、平等权利、两党或多党制、一人一票选总统等成为人们耳熟能详的话题。 新中国联邦应与美国和西方政府加强合作，支持国内开明势力，帮助中国构建民主的代议和选举制度。重要的一环是打开国内防火墙，放开报禁，实现新闻自由。 7. 不管以上这些事情怎样发生，结果全世界的正义力量和人民都会选择NFSC代表未来的新中国人民推进中国国家治理现代化、法制化、民主化。七哥永远都不会参政，但战友们应该积极实现信仰自由、正道主义、一人一票的国家，战友们都应该问自己，该做什么？能做什么？ 思考： 新中国联邦的实力和能力将成为新中国法治民主制度建立和国际关系合作的最重要力量。战友们应各施其能，从政、经商、教育、农业等领域贡献力量，每个人都应思考、计划并实施。 我们应从自己和身边开始，从每一件事做起，每天都行动，为信仰自由、正道主义和民主选举贡献力量。个人层面上，希望能帮助那些在共产党专制下受迫害的宗教人士，壮大国内民间团体，助力信仰自由和爱的传播。 8. 全人类面临的“中国梦”破灭，新中国联邦帮助世界人民从中国噩梦中惊醒，帮助中国人民和世界实现梦想成真，我们该做什么？能做什么？ 思考： 我们应该： 继续传播新冠病毒及疫苗真相：让世界人民认清共产党与邪恶势力勾结统治世界的阴谋，传播青蒿素、伊维菌素等有效药物，帮助受疫苗伤害的人恢复健康，减少伤亡。 持续揭露共产主义的邪恶本质：通过建立博物馆、展览、网站及社交媒体等，大力揭露共产党过去的罪行，包括文革、六四屠杀、新疆西藏种族灭绝、宗教迫害、香港民主运动镇压等，让中国和世界人民深刻理解共产体制的邪恶，清除“红色余毒”。 加速壮大新中国联邦的实力与影响力：在创新社交媒体、加密货币、区块链技术、AI、量子计算、生物医疗等领域形成独特影响力；招募更多战友，培养“爆二代”和“爆三代”，逐步构建新中国联邦的传承，构建百年甚至千年的基业。 我们应努力传扬新中国联邦的正道主义，帮助中国走出共产体制的阴霾，为新中国的制度转型、社会经济恢复、人心道德复兴做出更多贡献。同时，我们要不断传扬中国人民的勤劳、善良与热爱和平，努力成就中国与世界的千年和平，让中国人受到世界人民的尊重与喜爱。 引用自：https://gnews.org/m/1764348

本文短链接： https://gettr.ink/FNyAe4 Sourse: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4172338/ 青蒿素触发人类Ishikawa子宫内膜癌细胞的G1细胞周期停滞并通过破坏NF-kB转录信号通路抑制细胞周期依赖性激酶4（CDK4）的启动子活性和表达 作者：Kalvin Q. Tran, Antony S. Tin, and Gary L. Firestone 加州大学伯克利分校分子与细胞生物学系和癌症研究实验室，伯克利，加利福尼亚州，94720-3200 摘要 目前关于青蒿素（一种源自青蒿的天然抗疟药物）在人体子宫内膜癌细胞中的抗增殖作用知之甚少。青蒿素在培养的人类Ishikawa子宫内膜癌细胞中引发了G1细胞周期停滞，并下调了CDK2和CDK4的转录和蛋白水平。CDK4启动子-荧光素酶报告基因的分析表明，青蒿素对CDK4基因表达的抑制与CDK4启动子活性的丧失有关。染色质免疫沉淀显示青蒿素抑制了NF-κB亚基p65和p50与Ishikawa细胞内源性CDK4启动子的相互作用。共免疫沉淀实验表明，青蒿素通过增加与IκB-α（一种NF-κB抑制剂）的蛋白-蛋白相互作用，破坏了p65和p50的核转运，并破坏了其与CDK4启动子的相互作用，导致CDK4基因表达的丧失。青蒿素处理刺激了IκB-α蛋白水平的增加，而未改变IκB-α的转录水平。最后，外源性p65的表达导致该NF-κB亚基在青蒿素处理的细胞和未经处理的细胞中在细胞核中积累，逆转了青蒿素对CDK4蛋白表达和启动子活性的下调，并阻止了青蒿素引起的G1细胞周期停滞。综上所述，我们的结果表明，青蒿素在子宫内膜癌细胞中的抗增殖作用的关键事件是通过破坏NF-κB与CDK4启动子的相互作用来转录下调CDK4表达。 关键词 子宫内膜癌细胞；青蒿素抗增殖信号；NF-κB；CDK4基因表达 引言 子宫内膜癌是女性生殖系统最常见的癌症，特别是在西方国家。尽管手术、放疗和化疗等传统治疗方法在早期诊断和治疗中有效，但对于晚期或复发性子宫内膜癌的治疗选择仍然有限。因此，开发新的治疗策略来抑制子宫内膜癌的进展变得尤为重要。 青蒿素是一种从中药青蒿（Artemisia annua L.）中提取的天然产物，最初被发现具有抗疟疾活性。近来的研究表明，青蒿素及其衍生物在多种癌症细胞中具有抗增殖作用，包括乳腺癌、结肠癌、白血病和黑色素瘤。然而，青蒿素在子宫内膜癌中的作用及其潜在机制尚未被充分研究。 在这项研究中，我们调查了青蒿素对人类Ishikawa子宫内膜癌细胞的作用，重点研究其对细胞周期的影响及其可能的分子机制。我们的研究结果表明，青蒿素通过引发G1细胞周期停滞并下调CDK4和CDK2的表达来抑制Ishikawa细胞的增殖。这种作用是通过破坏NF-κB转录信号通路并抑制CDK4启动子的活性实现的。 材料和方法 细胞培养和药物处理 Ishikawa细胞（人类子宫内膜癌细胞系）在含有10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中培养，补充有青霉素（100 U/mL）和链霉素（100 μg/mL）。细胞在37°C、5% CO2的环境中培养。青蒿素用DMSO溶解，终浓度不超过0.1%。 细胞增殖测定 使用细胞计数试剂盒-8（CCK-8，Dojindo Molecular Technologies, Inc.）进行细胞增殖测定。将Ishikawa细胞接种到96孔板中，在37°C孵育24小时。然后用不同浓度的青蒿素处理细胞，孵育时间为0、24、48和72小时。通过测量450 nm处的吸光度来评估细胞活性。 细胞周期分析 将Ishikawa细胞在6孔板中接种，培养至约80%的汇合度后，用青蒿素处理24小时。然后，使用流式细胞术分析细胞周期分布。用70%的冷乙醇固定细胞，随后用PBS洗涤，并用含有50 μg/mL RNA酶A和50 μg/mL碘化丙啶的溶液染色30分钟。通过流式细胞仪测量荧光强度，并使用ModFit LT软件进行数据分析。 Western Blot分析 将Ishikawa细胞用不同浓度的青蒿素处理24小时后，用冰冷的PBS洗涤细胞，并用含有蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液裂解细胞。通过SDS-PAGE分离蛋白质，并将其转移到PVDF膜上。使用5%脱脂奶粉在PBS中封闭膜，随后用抗体（针对CDK4、CDK2、p21、p27、IκB-α、NF-κB p65、NF-κB p50和β-actin）孵育。使用HRP标记的二抗，并通过化学发光法检测蛋白质。 实时定量PCR 用青蒿素处理Ishikawa细胞24小时后，用Trizol试剂提取总RNA。使用逆转录试剂盒将RNA逆转录为cDNA。使用SYBR Green PCR试剂进行实时定量PCR，检测CDK4、CDK2和IκB-α的mRNA表达水平。将每个基因的表达标准化为内参基因β-actin。 荧光素酶报告基因测定 将Ishikawa细胞在24孔板中接种，并用含有CDK4启动子区域的荧光素酶报告基因质粒转染细胞。用青蒿素处理转染后的细胞24小时。通过荧光素酶报告基因分析系统测量荧光素酶活性。 染色质免疫沉淀（ChIP）分析 将Ishikawa细胞用青蒿素处理24小时后，用甲醛固定细胞。裂解细胞，并用超声破碎染色质。将破碎的染色质与抗NF-κB p65或抗NF-κB p50抗体孵育，并与蛋白A/G琼脂糖珠共沉淀。洗涤珠子，逆转交联并提取DNA。使用CDK4启动子区域的特异性引物进行PCR扩增。 共免疫沉淀 将Ishikawa细胞用青蒿素处理24小时后，用含有蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液裂解细胞。用抗NF-κB p65抗体孵育裂解物，并与蛋白A/G琼脂糖珠共沉淀。通过Western Blot分析共沉淀的蛋白质，检测NF-κB p65与IκB-α的相互作用。 统计分析 所有实验重复三次，并表示为均值±标准误差。使用t检验或方差分析（ANOVA）评估数据的统计显著性，p值<0.05被认为具有统计显著性。 结果 青蒿素在Ishikawa子宫内膜癌细胞中引发G1细胞周期停滞 为了研究青蒿素对人类Ishikawa子宫内膜癌细胞的影响，我们首先分析了细胞增殖。用不同浓度的青蒿素处理细胞24小时后，观察到显著的细胞增殖抑制作用。进一步的流式细胞术分析显示，青蒿素引发了Ishikawa细胞的G1期细胞周期停滞（图1A和B）。这些结果表明，青蒿素通过阻滞G1期细胞周期来抑制Ishikawa细胞的增殖。 青蒿素下调CDK4和CDK2的表达 为了进一步理解青蒿素引发的G1期细胞周期停滞的机制，我们检测了细胞周期调控蛋白CDK4和CDK2的表达水平。Western Blot分析显示，青蒿素处理显著下调了CDK4和CDK2的蛋白表达（图2A）。此外，实时定量PCR结果显示，青蒿素处理也下调了CDK4和CDK2的mRNA水平（图2B）。这些数据表明，青蒿素通过下调CDK4和CDK2的表达来引发G1期细胞周期停滞。 青蒿素抑制CDK4启动子活性 为了进一步探讨青蒿素对CDK4表达的调控机制，我们进行了荧光素酶报告基因测定。将Ishikawa细胞转染含有CDK4启动子区域的荧光素酶报告基因质粒，并用青蒿素处理24小时。结果显示，青蒿素显著抑制了CDK4启动子的活性（图3）。这些结果表明，青蒿素通过抑制CDK4启动子活性来下调CDK4基因的表达。 青蒿素通过破坏NF-κB转录信号通路抑制CDK4表达 为了研究青蒿素对CDK4启动子活性抑制的分子机制，我们进行了染色质免疫沉淀（ChIP）分析，检测NF-κB与CDK4启动子的相互作用。结果显示，青蒿素处理显著减少了NF-κB亚基p65和p50与CDK4启动子的结合（图4A）。进一步的共免疫沉淀实验表明，青蒿素增加了NF-κB p65与IκB-α的相互作用，导致p65从细胞核转运至细胞质，从而破坏了其转录活性（图4B）。此外，Western Blot分析显示，青蒿素处理增加了IκB-α蛋白水平，但未改变其mRNA水平（图4C）。这些结果表明，青蒿素通过增加IκB-α蛋白的稳定性并抑制NF-κB的核转运来下调CDK4表达。 外源性p65表达逆转青蒿素引发的G1期停滞和CDK4下调 为了验证NF-κB在青蒿素引发的G1期细胞周期停滞和CDK4下调中的作用，我们在Ishikawa细胞中外源性表达了NF-κB p65。结果显示，p65的过表达逆转了青蒿素对CDK4蛋白表达的抑制，并恢复了CDK4启动子的活性（图5A和B）。此外，p65的过表达也阻止了青蒿素引发的G1期细胞周期停滞（图5C）。这些结果进一步支持了NF-κB在青蒿素调控CDK4表达和细胞周期停滞中的关键作用。 讨论 我们的研究首次表明，青蒿素通过破坏NF-κB信号通路来下调CDK4基因表达，并引发人类Ishikawa子宫内膜癌细胞的G1期细胞周期停滞。青蒿素处理显著减少了NF-κB亚基p65和p50与CDK4启动子的相互作用，并通过增加IκB-α蛋白的稳定性来抑制NF-κB的核转运。外源性p65的表达逆转了青蒿素引发的G1期停滞和CDK4下调，进一步证明了NF-κB在这一过程中发挥的关键作用。 这些发现揭示了青蒿素在调控细胞周期中的潜在作用机制，并为青蒿素作为抗子宫内膜癌药物的潜力提供了新的见解。然而，进一步的研究仍然需要深入探讨青蒿素在其他癌症类型中的作用，以及其在临床应用中的潜力。 nihms-541555.pdf 青蒿素触发人类Ishikawa子宫内膜癌细胞的G1细胞周期停滞并通过破坏NF-kB转录信号通路抑制细胞周期依赖性激酶4（CDK4）的启动子活性和表达.docx 青蒿素触发人类Ishikawa子宫内膜癌细胞的G1细胞周期停滞并通过破坏NF-kB转录信号通路抑制细胞周期依赖性激酶4（CDK4）的启动子活性和表达.pdf

本文章短链接：https://gettr.ink/r35txQ Sourse ：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/epdf/10.1155/2012/247597 抗肿瘤活性的青蒿素及其衍生物：从一种广为人知的抗疟药到一种潜在的抗癌药物 Hindawi Publishing Corporation Journal of Biomedicine and Biotechnology 2012年卷，文章ID 247597，18页 doi:10.1155/2012/247597 综述文章 抗肿瘤活性的青蒿素及其衍生物：从一种广为人知的抗疟药到一种潜在的抗癌药物 Maria P. Crespo-Ortiz1 和 Ming Q. Wei2 1 圣地亚哥德卡利大学基础与健康科学学院生物医学系，哥伦比亚卡利Pampalinda校区 2 格里菲斯大学健康研究所及医学院分子与基因治疗系，澳大利亚昆士兰州南港，黄金海岸校区 通讯地址：Maria P. Crespo-Ortiz，mdpcrespo@gmail.com 收到日期：2011年8月1日；接受日期：2011年8月29日 学术编辑：Masa-Aki Shibata 版权所有 © 2012 M. P. Crespo-Ortiz 和 M. Q. Wei。本文是开放获取文章，遵循《创作共用署名许可协议》发布，允许在任何媒体中无限制地使用、分发和复制，前提是引用原始作品。 摘要 通过开发能够选择性杀死恶性细胞的高效药物，可以极大地改善癌症患者的生活质量和生存率。青蒿素及其类似物是天然存在的抗疟药，已显示出强大的抗癌活性。在原发性癌症培养物和细胞系中，其抗肿瘤作用体现在抑制癌细胞增殖、转移和血管生成。在异种移植模型中，青蒿素类药物的暴露显著减少了肿瘤体积和进展。然而，青蒿素在抗癌治疗中的应用还需要通过深入理解其细胞毒性作用的潜在机制来加以论证。青蒿素的主要靶点及其对异质性肿瘤细胞的特异性作用的化学基础尚待阐明。本文旨在提供关于这类药物作为潜在抗癌剂的最新进展和新发展的概述。 1. 引言 癌症仍然是一种威胁生命的疾病，并且是导致死亡的主要原因之一，因为其控制难度较大。尽管现有一系列基于化疗、手术和放射疗法的常规治疗方法，但在许多情况下这些方法的疗效有限。此外，目前的抗癌方案通常伴随着显著的毒性和耐药性问题。减轻癌症负担的一个主要挑战是开发具有高效性且对癌症具有特异性的药物，并且对正常哺乳动物细胞几乎没有或没有副作用。 许多研究项目致力于开发新的化疗药物，无论是通过探索新化合物的抗癌能力，还是通过评估传统上用于其他临床疾病的药物。天然产物已被发现是具有新颖且强效的生物活性化合物的重要来源，并且在体内副作用较小。植物衍生物已被证明对一系列疾病有效，并具有广泛的抗微生物活性，其中一些还表现出显著的抗肿瘤活性。其中一种有前途的化合物是青蒿素，这是一种具有抗癌特性的天然抗疟药。青蒿素及其衍生物常用于疟疾治疗，也在纳米到微摩尔范围内显示出对敏感和耐药性癌细胞系的强大抗癌活性。重要的是，青蒿素是极少数已被广泛用于抗疟疾治疗但没有显著副作用的药物之一，尽管已报告了耐药性。最近，越来越多的研究集中在青蒿素类药物的作用机制及其反应机制上。 在这篇综述中，我们将重新探讨青蒿素及其类似物作为抗癌剂的发展中的一些关键问题，以更好地理解其抗肿瘤效果的机制。从新获得的知识中，我们可以通过权衡青蒿素类药物的优势、局限性以及当前和未来的发展，来确定这一有前途的癌症药物研发领域中出现的研究问题，并解决未来的研究需求。 2. 青蒿素及其衍生物 青蒿素是一种含有1,2,4-三氧杂环结构的倍半萜内酯（sesquiterpene lactone）。这种内过氧化物化合物是从中国草药青蒿（Artemisia annua，或称为年蒿）中提取的，该草药已有两千多年的发热治疗历史。尽管青蒿素具有疗效，但其作为原型药物具有药代动力学的局限性。天然青蒿素在水或油中的溶解度低，生物利用度差，且在体内的半衰期较短（约2.5小时）。为了克服这些问题，三代青蒿素类内过氧化物，包括半合成衍生物和完全合成化合物已经被开发出来。迄今为止，青蒿素的两代半合成衍生物如青蒿琥酯（artesunate）、青蒿乙醚（arteether）、青蒿甲醚（artemether）和青蒿酮（artemisone）已被有效用于疟疾治疗，具有良好的临床疗效和耐受性。 半合成青蒿素类化合物是通过二氢青蒿素（DHA）制备的，DHA是青蒿素的主要活性代谢物。第一代半合成青蒿素类化合物包括青蒿乙醚和青蒿甲醚，这些是亲脂性的青蒿素类化合物，而青蒿琥酯是水溶性衍生物。第二代青蒿素类化合物青蒿酮表现出改善的药代动力学特性，包括更长的半衰期和更低的毒性。目前，青蒿琥酯是抗疟疾联合疗法中常用的衍生物。 完全合成的青蒿素衍生物也已通过保留赋予药物活性的内过氧化物基团而被设计出来。这些化合物可以通过简单的起始材料轻松合成，因此目前正处于密集开发阶段。 3. 青蒿素的抗肿瘤作用机制 在疟疾寄生虫中，青蒿素的内过氧化物基团已被证明具有药理学重要性，并负责其抗疟疾活性。内过氧化物键被认为是通过还原血红素（FPFeII）或亚铁（FeII）激活的，导致产生高度活性的碳自由基，这些自由基是非常强效的烷基化剂。自由基可能靶向寄生虫的必需大分子，导致寄生虫的死亡。然而，青蒿素的确切作用机制和主要靶点仍在研究中。在疟原虫中，有人提出青蒿素可能靶向线粒体、内质网和消化液泡等细胞器。一些推测的分子靶点包括血红素烷基化、蛋白质烷基化、Ca2+ ATP酶（SERCA）抑制、膜损伤和线粒体电位的丧失。尽管关于青蒿素激活和特定靶点的争论不断，但支持的证据表明，血红素或亚铁是其强效活性的必要条件。这一观察结果在其他系统中也得到了证实。在血吸虫中，青蒿素对虫体表皮的作用非常显著，这一活性也因铁的存在而增强。 有趣的是，青蒿素的强大抗癌作用也可以归因于内过氧化物键（红色方框）并共享相同的寄生虫化学基础。缺乏内过氧化物基团并不完全阻断抗癌活性，但会显著降低其细胞毒性，仅为具有三氧杂环结构化合物的五十分之一。残余抗癌活性可能与一种非过氧化物依赖机制有关。普遍认为，铁和血红素或血红素结合蛋白参与了青蒿素的生物还原激活。在大多数系统中，癌细胞预加载铁或铁饱和的全转铁蛋白（双铁转铁蛋白）会触发青蒿素的细胞毒性，某些细胞系中的青蒿素活性可提高至100倍。此外，与单独使用青蒿素相比，与铁载体化合物结合的青蒿素表现出更强的活性。最近的一项研究表明，使用血红素合成抑制剂琥珀酰乙酰丙酮进行化学调控会减少DHA在HL-60（人急性早幼粒白血病细胞）中的细胞毒性。这与之前的研究一致，这些研究表明，诱导血红素氧化酶随后下调血红素合成基因也可以抑制新型青蒿素二聚体在相同癌细胞系中的细胞毒性。同样，使用铁螯合剂去铁胺（DFO）治疗会使化合物失活。铁和血红素代谢可能在青蒿素选择性抗肿瘤活性中发挥重要作用。恶性细胞的持续增殖和生长需要更高的铁代谢以完成细胞生存过程。因此，癌细胞表现出转铁蛋白受体（TfR）水平的增加，这些受体负责铁的摄取和细胞内浓度的调节。癌细胞中TfR的表达水平可能因细胞系而异。然而，它们与正常细胞有显著差异，从而导致青蒿素及其衍生物的高选择性指数。Efferth等人报告说，白血病（CCRF-CEM）和星形胶质瘤（U373）细胞在细胞群体中表达TfR的比例分别为95%和43%，而正常单核细胞仅占约1%。通过用特异性单克隆抗体预处理阻断TfR可以阻断青蒿素的活性。 有假设认为，铁激活的青蒿素通过释放高度烷基化的碳中心自由基和活性氧（ROS）来诱导损伤。自由基可能在青蒿素处理的癌细胞中引发的细胞变化中起到作用，如增强的凋亡、细胞生长抑制、血管生成抑制和DNA损伤。几项研究还将青蒿素毒性与细胞分裂受阻、氧化应激水平升高、肿瘤侵袭抑制、迁移抑制和转移抑制联系在一起。ROS生成可能有助于青蒿素对癌细胞的选择性作用。由于肿瘤细胞对ROS损伤的脆弱性增强，因此它们表达抗氧化酶的水平较低，如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶，这与正常细胞相比更为明显。因此，增加氧化应激是抗癌药物常见的抗肿瘤机制。此外，青蒿素的选择性可能通过优先靶向癌症生物标志物或在正常分化组织中未检测到的癌基因和蛋白质的过度表达来增强。 3.1. 作为细胞毒性的主要效应的ROS生成 与疟原虫一样，青蒿素在癌细胞中的分子靶点仍有争议。尽管青蒿素在某些肿瘤细胞中引起的变化是一致的，但尚不清楚这种毒性是否依赖于特定的分子靶点。要对癌细胞产生作用，所需的药物浓度通常高于对疟原虫产生毒性的浓度。青蒿素、DHA、青蒿琥酯和青蒿甲醚在疟原虫中的48小时IC50（即使50%的抑制浓度）可低至15纳摩尔，而它们的抗癌活性是细胞系依赖性的，IC50在0.5至200微摩尔或更高之间波动。疟原虫对青蒿素的敏感性表明其具有特定的寄生虫靶点。相比之下，在癌细胞中，青蒿素的作用似乎更多是通过ROS生成等一般机制介导的。然而，有人建议，ROS介导的损伤可能由青蒿素激活附近的初始事件引发。在青蒿素处理的细胞中，显微镜分析显示在亚细胞结构中早期出现了类似坏死的形态变化，这些变化可能与ROS生成有关。 微阵列分析发现，青蒿素的作用似乎受到氧化应激酶表达的调节，包括过氧化氢酶、硫氧还原酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽S-转移酶家族。青蒿素敏感的细胞下调了氧化酶，而这些分子的过表达则使癌细胞的敏感性降低。直接证据表明，在HL-60细胞系中，早期（1小时）和快速的ROS生成与凋亡的诱导和青蒿素引发的损伤相关。此外，IC50与ROS水平直接相关。相反，在某些实验系统中，青蒿素的作用在抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸和1,2-二羟基苯-3,5-二磺酸（TIRON，一种铁螯合剂）的存在下得以逆转，导致细胞死亡的延迟。最近的一项研究表明，在青蒿琥酯处理的HeLa细胞中，在检测到细胞毒性之前（48小时），在16小时内ROS的生成已开始，表明这可能是青蒿素引发损伤的初始事件。线粒体中的电子传递链（ETC）被认为在ROS生成中起作用，但即使在缺乏ETC的HeLa细胞中仍检测到显著的细胞毒性，这表明细胞中可能存在其他的ROS来源。确实，新兴证据表明，在乳腺癌细胞中，氧化应激最初是在溶酶体中产生的，这是铁激活的青蒿琥酯作用的结果，类似于疟原虫中的情况。因此，线粒体内源性凋亡途径的激活是导致细胞死亡的下游事件。在这一模型中，青蒿素类药物可能通过负调控血红素合成进一步增加细胞毒性。 尽管在许多细胞系统中有越来越多的证据表明ROS介导的损伤，细胞损伤也与非氧化应激相关，尤其是新型青蒿素二聚体似乎在没有或极少ROS生成的情况下表现出抗肿瘤作用，但其细胞毒性机制仍在研究中。此外，目前尚不清楚青蒿素引发的坏死是否可能是一种非ROS依赖的细胞死亡机制。 青蒿素的抗肿瘤毒性似乎还受到钙代谢、内质网（ER）应激和翻译控制肿瘤蛋白（TCTP，一种结合钙蛋白）的调节，这些蛋白也被认为是寄生虫的靶标。尽管最初将TCTP基因（tctp）的表达与癌细胞对青蒿素的反应相关联，但尚未发现TCTP在青蒿素作用中的功能角色。 与疟原虫类似，青蒿素在癌细胞中作为靶标的作用也得到了研究。先前的证据表明，使用10微摩尔的青蒿素治疗会因抑制钙ATP酶而导致钙浓度增加。然而，研究表明，两种青蒿素二聚体的作用机制显示出通过ROS介导的强烈ER应激，这与抑制钙ATP酶无关。有趣的是，高活性的青蒿素二聚体和众所周知的钙ATP酶抑制剂他普吉林（thapsigargin）之间的行为相似，但由不同的分子事件介导。事实上，他普吉林缺乏内过氧化物基团，仅产生微弱的ROS水平。然而，ER似乎是青蒿素作用的重要部位，因为在HepG2细胞中，显示出青蒿素荧光衍生物优先在该细胞区室中积累。 青蒿素类药物已显示出多效性效应，跨越不同的实验系统。也有可能在不同癌细胞系中，青蒿素细胞毒性的潜在机制会因其特定标志或细胞系特征的变化而有所不同。这只有在类似条件下对不同细胞系中抗肿瘤细胞增殖的分子事件进行研究时才能得出结论。 4. 青蒿素作为抗癌药物 4.1 青蒿素及其衍生物的抗肿瘤作用 青蒿素及其许可的半合成青蒿素衍生物的显著抗肿瘤活性已在体外和动物模型中得到证实。大量研究集中于最活跃的化合物，即DHA和青蒿琥酯。一项研究测试了美国国家癌症研究所（NCI）开发治疗学项目的55种细胞系，显示青蒿琥酯对白血病、结肠癌、黑色素瘤、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、中枢神经系统（CNS）和肾癌细胞具有抑制活性。二氢青蒿素对胰腺癌、白血病、骨肉瘤和肺癌细胞也具有显著的抗肿瘤活性。此外，青蒿酮显示出比青蒿素更好的活性，并与其他抗癌药物具有显著的协同作用。 已发现青蒿素可通过直接诱导DNA损伤（基因毒性）或间接干扰涉及多种恶性肿瘤特征的信号通路来发挥作用。然而，直接的DNA损伤仅在特定系统中被描述，而间接作用在文献中更为常见。在胰腺细胞（Panc-1）中，青蒿琥酯引起DNA片段化和膜损伤。有趣的是，低剂量的青蒿琥酯与类似坏死的细胞死亡有关，而较高浓度则诱导细胞凋亡。损伤的程度和类型似乎取决于细胞系的表型和起源，并且可能随时间和剂量而异。值得注意的是，与缓慢生长的癌细胞相比，快速生长的细胞系对青蒿琥酯的敏感性更高。 此外，DHA、青蒿琥酯和青蒿甲醚可能通过调控协调生长信号、凋亡、增殖能力、血管生成和组织侵袭及转移的基因和蛋白来发挥作用。这些内过氧化物药物通过不同途径之间的复杂相互作用可能增强其抗癌效果，从而控制癌症并导致细胞死亡。 4.1.1 青蒿素抑制癌细胞增殖能力 在正常细胞中，细胞周期依赖性激酶（CDK）是将信号传递到细胞周期中以推动细胞分裂的蛋白质。正常的生长依赖于有效地传递信号以进行复制和分裂。癌细胞中的不受控制的增殖是由引发生长信号放大的突变、检查点的失调和对生长抑制因子丧失敏感性所致。异常的细胞生长也因程序性细胞死亡或凋亡的失调而被触发。青蒿素及其半合成衍生物能够通过扰乱细胞周期动力学或干扰增殖相关的通路有效地诱导癌细胞的生长抑制。二氢青蒿素和青蒿琥酯是非常有效的生长抑制剂，多项研究指出DHA是最有效的抗癌青蒿素类化合物（DHA > 青蒿琥酯 > 青蒿乙醚 > 青蒿甲醚）。最近，青蒿酮在包括黑色素瘤和乳腺癌细胞在内的7种细胞系中显示出惊人的抗肿瘤效果。青蒿素化合物已被证明对癌细胞具有细胞静止和细胞毒性作用。青蒿素诱导的生长抑制已在细胞周期的所有阶段中被报道；然而，更常见的是G0/G1到S期转变的抑制。在同一时间的所有细胞周期阶段的抑制被解释为细胞静止效应。在DHA处理后的骨肉瘤、胰腺癌、白血病和卵巢癌细胞中观察到了G2/M期的细胞周期阻滞。同样，青蒿琥酯在骨肉瘤、卵巢癌和其他不同的癌症细胞系中也抑制了G2期。 青蒿素类药物诱导的生长抑制的潜在机制包括细胞周期调控酶的表达和活性改变，如CDK2-4和6以及D型环素（G1期到S期转变）或CDK1和A型环素（G2/M期）。青蒿素的抗增殖作用引起CDK转录的下调，CDK启动子的抑制或p21、p27和CDK抑制剂的增加。增殖的抑制也可能归因于针对多个通路的相互作用蛋白的下调。研究表明，在胰腺细胞（BxPC3，AsPC-1）中，DHA处理通过降低增殖细胞核抗原（PCNA）和D型环素的水平来抑制细胞活力，同时伴随着p21的增加。同一系统的另一项研究显示，DHA通过抑制NF-κB因子的活化来对抗其在增殖（c-myc，cyclin D）和凋亡途径（Bcl2，Bcl-xl）中的靶标。DHA在肺癌细胞（SPC-A1）中还下调了存活蛋白，这是一种调节凋亡和G2/M期细胞周期进展的蛋白质。类似的效应在青蒿素处理的骨肉瘤细胞中也被报道。在前列腺癌中，DHA通过破坏Sp1（特异性蛋白1）和CDK4启动子的相互作用来诱导细胞周期阻滞。Sp1-CDK4复合物的解离促进了caspase的活化和细胞死亡。此外，一项研究发现青蒿琥酯作为拓扑异构酶II的抑制剂，通过与多个途径的相互作用来抑制生长。总体来说，青蒿素类药物似乎通过干扰不同癌症实体共有的多个途径来发挥作用。 4.1.2 青蒿素的促凋亡作用 凋亡是抗肿瘤治疗中广泛研究的机制，因为操纵这一过程是控制癌症的有效策略。这个细胞过程由Bcl2家族基因（促凋亡的Bax和抗凋亡的Bcl2）和它们对线粒体的影响介导。Bax/Bcl2比例的增加会诱导细胞色素c的释放，随后引发caspase的顺序活化，最终导致细胞死亡。 在许多癌症和细胞系中，凋亡是青蒿素引发的常见且快速的效应。200微摩尔DHA处理白血病细胞在1小时内诱导凋亡。青蒿素的敏感性与癌细胞系中抗凋亡（Bcl2）和促凋亡基因（Bax）的表达水平相关。在一般情况下，青蒿素的促凋亡效应归因于内源性途径的激活。因此，线粒体膜损伤被认为是细胞死亡事件级联中的关键环节。许多研究表明，青蒿素类化合物通过调节Bax/Bcl2比例来诱导凋亡。与这些观察结果一致，DHA和青蒿琥酯在一组骨肉瘤细胞中引起了细胞色素c的释放、Bax过表达、Bax/Bcl2比例的增加以及caspase 3和9的活化。DHA还激活了caspase 8并降低了CDC25B、cyclin B1和NF-κB的水平。在同一系统中，青蒿琥酯暴露耗尽了存活蛋白，这在DHA处理的肺癌细胞中也被发现具有促凋亡作用。 在肝癌细胞系中，DHA特别是在这个系统中，DHA和原型药物青蒿素似乎具有相似的效力。微阵列分析将c-MYC的表达水平与增强的DHA诱导凋亡相关联。高表达c-MYC的白血病（HL-60）和结肠癌细胞（HCT116）对DHA的促凋亡作用显著更敏感。此外，在HCT116细胞中敲低c-myc基因显著减少了DHA相关的细胞死亡。c-myc的下调也可能与该细胞系中G1期阻滞的诱导有关。在转移性黑色素瘤（A375，G361细胞系）和Jurkat T淋巴瘤细胞中，DHA的高凋亡作用与NOXA（一种促凋亡蛋白）的上调、caspase 3的激活以及氧化应激有关。在肺细胞中，DHA的促凋亡效应伴随着钙浓度的增加和p38的激活。 在某些研究中，还描述了作用于外源性凋亡途径的分子变化。DHA似乎通过增加不同前列腺癌细胞系中DR5（细胞死亡受体5）启动子的转录来诱导DR5表达。事实上，与TRAIL（一种DR5配体）的联合治疗在该系统中显著增强了DHA的促凋亡作用。 青蒿素类药物通常在大多数系统中促进凋亡而不是坏死，然而在某些情况下，已报告了凋亡和坏死的同时发生。诱导凋亡是青蒿素抗肿瘤作用的一个主要优势，因为它防止了坏死引起的炎症和细胞损伤的连带效应。在某些细胞系中，青蒿素诱导的坏死与ATP水平低和缺陷的凋亡机制有关。 4.1.3 青蒿素抑制转移和侵袭 恶性细胞的侵袭能力与癌症患者的高死亡率和发病率有关。癌细胞向其他器官的扩散是一个复杂的过程，涉及恶性细胞通过细胞外基质的侵袭、进入血液循环、并最终在远端器官中定植。为了实现侵袭，癌细胞需要失去E-钙粘蛋白（一种参与细胞-细胞粘附的钙结合跨膜分子）的表达或功能。多种基因编码的细胞外基质处理蛋白酶、运动因子和粘附蛋白也在转移过程中发挥作用。最近，PAI-1和TIMP-1被认为是内源性蛋白酶抑制剂，也被发现与癌症转移有关。青蒿素的一个重要益处是其在高度侵袭性和侵略性癌症实体中表现出的显著抗迁移活性。青蒿素的抗转移活性与基质金属蛋白酶（MMP）家族基因的表达变化以及它们对αvβ3整合素的影响有关。在肝癌细胞（HepG2和SMMC 7721）中，12.5微摩尔青蒿素的处理抑制了迁移，这与MMP2的减少以及TIMP-2的相应增加有关。通过增强E-钙粘蛋白活性和Cdc42的激活，青蒿素增加了细胞-细胞粘附，从而抑制了转移。此外，有研究发现，一些癌细胞可能具有在不同通路上共同作用的特定蛋白质。例如，在非小细胞肺癌和纤维肉瘤中，DHA处理引起了低水平的MMP2、MMP7或MMP9，这由AP-1和NF-κB的转激活或失活所驱动。早期研究表明，MMP2受Sp-1转录因子活性的调节，此外DHA诱导的Sp-1分子相互作用的破坏被认为是DHA在不同途径中调控效应的关键事件。其他研究发现，在小鼠肺Lewis癌中，青蒿素通过抑制血管内皮生长因子C（VEGF-C）介导的淋巴结转移和淋巴管生成受到抑制。 4.1.4 青蒿素对血管生成的抑制 随着恶性组织的生长，转移和实体瘤需要额外的血液供应才能生存和繁殖。因此，癌细胞通过调控参与新血管生成和重塑的蛋白质和通路来诱导新生血管形成。血管生成过程导致内皮细胞的增殖增加，这通过诱导血管内皮生长因子（VEGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）、其受体和细胞因子而发生。这一事件通过多种机制发生，包括缺氧驱动的HIF-1α和芳香烃受体核转运蛋白（ARNT）表达的激活。血管生成的调控受到抑制血管生成的分子如血管抑素、内皮抑素、血小板反应蛋白、TIMP和PAI-1的介导。由于这些分子在肿瘤生存中的作用，促血管生成因子及其调控网络中的分子成为了重要的药物靶点。基于微阵列的研究显示，青蒿素、青蒿琥酯及其他衍生物通过调节血管生成因子的基因表达来抑制新生血管形成。青蒿素的作用似乎通过下调生长因子（VEGF、FGF）、HIF-1α、血管生成介导因子（ANG）、富含半胱氨酸的血管生成诱导物（CYR61）、一些金属蛋白酶（MMP9、MMP11和BMP1）以及胶原蛋白来介导。与此同时，青蒿素类药物引起了血管生成抑制剂的上调。这些发现得到了在不同系统中的实验研究支持，揭示了其他分子相互作用。50微摩尔DHA暴露在人的脐静脉内皮细胞中通过耗尽VEGF受体flt-1和KDR/flk-1的水平来抑制血管生成。类似的效果在淋巴内皮细胞和Lewis肺癌中得以再现。在胰腺细胞（BxPc-3）和BalB/c裸鼠中，DHA通过抑制NF-κB的DNA结合以及下调其与血管生成相关的靶标如VEGF、IL-8、COX2和MMP9，来抑制血管生成。先前已将NF-κB水平的降低与增殖和转移的抑制联系在一起，表明NF-κB调控可能在DHA在这一系统中的多模式作用中起到关键作用。NF-κB是调节多种过程的关键因子，并且在抗癌药物反应中发挥着重要作用。它被DNA损伤激活，并且在应对药物压力时是凋亡抵抗的介质。 青蒿素类药物还被赋予了其他抗癌特性。青蒿琥酯显示了逆转细胞转变、允许组织重新分化的能力，这通过负向调控Wnt信号通路来实现。值得注意的是，青蒿琥酯在分化程度较低的细胞系中更为有效。 4.2 青蒿素对耐药性癌细胞的抗肿瘤作用 成功抗癌治疗的一个主要障碍是随着时间的推移产生的耐药性。许多侵袭性肿瘤对抗癌治疗产生耐药性，而几乎没有化疗替代方案。耐药性的一个主要原因是由于膜蛋白泵的过表达而产生的药物外排，这导致无效的低药物浓度。青蒿素的抗癌活性在其他情况下耐药和多重耐药的癌细胞中表现出不受影响。一项使用55种NCI细胞系和微阵列分析的研究显示，与已确立的抗癌药物耐药相关的基因如MDR1（Pgp）、MRP1和BCRP对青蒿素的活性没有影响。当在多重耐药HL-60细胞系中过表达MRP-1和BCRP的细胞中观察到没有对青蒿琥酯的生长抑制曲线产生影响时，这一发现得到了进一步证实，这表明在存在其他药物耐药的情况下青蒿素的抗肿瘤活性得以保留。青蒿素对包括阿霉素、甲氨蝶呤和羟基脲耐药的细胞系在内的广泛耐药癌细胞系有效，并且没有交叉耐药性。进一步的研究表明，青蒿琥酯的促凋亡作用在阿霉素耐药的白血病细胞系中不受影响；相反，青蒿琥酯增强了阿霉素的促凋亡效应。在另一项研究中，青蒿琥酯的抗癌效力在化疗敏感和耐药的神经母细胞瘤细胞系和初级神经母细胞瘤培养物中得以保留。在这一系统中，青蒿琥酯对文斯汀、阿霉素、顺铂、托泊替康、麦法兰和足叶乙甙适应细胞的敏感性未受影响，IC50范围为1.4-2.7微摩尔，与亲本敏感细胞系相似。仅有一个细胞系对青蒿琥酯表现出低敏感性，这与ROS形成低和谷胱甘肽半胱氨酸合酶（GCL）表达增加有关。通过GCL抑制剂介导的谷胱甘肽耗尽改善了该细胞系对青蒿琥酯的敏感性。P-糖蛋白（Pgp）或p53的衰减没有影响青蒿琥酯的敏感性。DHA在某些细胞系如胆管癌（CL-6）和肝癌（Hep G2）中显示了最低的IC50值，与其他抗癌药物相比，这表明，MDR1、MRP1-2或MRP3的上调对药效没有影响。抗癌药物与青蒿素类药物之间缺乏交叉耐药性可能基于不同的药物作用机制和/或耐药机制。大多数传统抗癌药物是核苷类似物，而青蒿素的作用被认为是通过ROS依赖机制介导的。此外，在红髓性白血病和人类小细胞肺癌中，青蒿素对Pgp或MRP1没有显著的抑制作用，因此原则上膜蛋白泵的过表达可能不会影响青蒿素的药效。然而，在另一个系统中，青蒿素（原型药物）通过上调mdrp通过一种机制增加了对阿霉素的耐药性，这将在后面讨论。 4.3 青蒿素类药物与标准抗癌化疗的相互作用：用于癌症的青蒿素联合疗法（ACT）？ 现有的抗癌疗法主要针对癌细胞的增殖，通常采用化疗药物、离子辐射或直接对生长因子信号通路的毒性作用。在癌症的联合治疗中，青蒿素类药物的抗肿瘤作用可以提供独立的抗癌活性，并且不会增加额外的副作用。关于将青蒿素类药物与其他抗癌药物结合使用的益处进行了研究，显示青蒿素通过不同通路的多因素作用可能增强总体活性（协同作用）。 已有报道指出，耐药癌细胞系通过添加青蒿素到常规治疗中变得对治疗敏感（化疗增敏作用）。有趣的是，DHA和青蒿琥酯表现出最强的化疗增敏/协同效应，而原型药物青蒿素则仅表现出加成和拮抗作用。DHA显著增强了用于胰腺癌的抗癌药物吉西他滨的抗癌效果，这种药物随着时间的推移会产生耐药性。在胰腺细胞中的体内和体外分析显示，与单独使用吉西他滨相比，DHA引起的生长抑制和凋亡增加了4倍和2倍。DHA在增强吉西他滨活性的双重作用以及可能抵抗耐药性的效果归因于DHA对吉西他滨诱导的NF-κB激活的抑制及其对其靶标的作用。同样的效应在肝癌细胞系中得到了证实，无论它们的p53状态如何。DHA与吉西他滨联合使用时，肿瘤生长抑制作用增强了45%，而原型药物青蒿素仅诱导了加成效应。 与此一致的是，在Lewis肺癌细胞系中，DHA与环磷酰胺联合使用显示出更强的抗肿瘤活性，或者与顺铂联合使用在小鼠非小细胞肺癌A549细胞系中也表现出更强的抗肿瘤活性。在大鼠C6胶质瘤细胞中，添加1微摩尔DHA使得替莫唑胺（一种用于治疗脑癌的DNA烷化剂）的细胞毒性增加了177%。进一步的研究发现，DHA通过ROS生成促进了替莫唑胺的促凋亡和促坏死作用。最近，青蒿琥酯的抗癌活性在不同的联合治疗方案中得到了增强。与免疫调节药物来那度胺联合使用时，青蒿琥酯表现出显著的协同作用。 然而，青蒿素联合疗法的益处需要谨慎评估。治疗效果受到药物作用机制和特定系统和方案中多重相互作用的影响。最近的研究表明，在结肠癌和乳腺癌细胞中，吉西他滨与青蒿酮联合使用仅表现出加成效应。在结肠癌细胞（HT-29）中，有人提出青蒿素可能通过对抗阿霉素对NF-κB抑制的作用而削弱阿霉素的活性。同一研究的作者报告了在相同系统中，青蒿素通过不同机制诱导了阿霉素耐药性。因此，有人提出青蒿素暴露通过抑制SERCA引起钙的积累，导致Pgp上调，并导致阿霉素耐药细胞的产生。相反，使用钙螯合剂预处理可以使细胞恢复对阿霉素的敏感性。然而，尚未在这一系统中评价DHA和青蒿琥酯；尚不清楚这些最有效的化疗增敏剂在该细胞系中是否具有相似的效应。到目前为止，青蒿琥酯或DHA与阿霉素和比拉鲁宾联合使用显示出在白血病和人类小细胞肺癌耐药细胞系中的化疗增敏作用，但在敏感的亲本细胞系中没有进一步增加敏感性。化疗增敏作用与Pgp抑制无关。总体而言，这些证据表明DHA和青蒿琥酯具有显著增强抗肿瘤药物的能力并抵抗肿瘤耐药性。 青蒿素类药物还可以增强基于离子辐射的疗法。在U373MG胶质瘤细胞中，DHA处理抑制了辐射引起的GST表达并伴随ROS生成。与单独使用辐射或DHA相比，青蒿素联合治疗显示出更高的效果。青蒿素在其他癌症治疗中包括高压氧疗法中的辅助作用也有报道。 4.4 青蒿素耐药性 青蒿素的一个突出特点是，尽管青蒿素作为抗疟药物已使用了30年，但在体外或临床上尚未确认其耐药性。在临床上，曾有患者的治疗失败中报道了耐药性。然而，在体外，耐药菌株通常不稳定，通常在连续多年药物暴露后才会产生。青蒿素在不同癌症途径上的多模式作用也可能预示着在恶性细胞中延迟诱发耐药性。确实，只有少数细胞系表现出对青蒿素或其衍生物的低敏感性或无反应。例如，青蒿素（原型药物）在乳腺癌细胞（MCF-7）和胃癌细胞（MKN）中似乎活性较低。有些研究在乳腺癌细胞中建议青蒿素的反应可能由雌激素受体（ERα和ERβ）介导，这些受体参与细胞增殖。值得注意的是，有报道指出在乳腺癌细胞中，破坏铁代谢可能增强阿霉素和顺铂的效力。青蒿素反应较低还与高度转移性鼻咽癌细胞系（CNE-1，CNE-2）中过表达的BMI-1有关。最近的一项研究发现，在一个独特的顺铂化疗耐药细胞系中存在对青蒿琥酯和DHA的一定程度的交叉耐药性。这种效应可以通过L-丁氧基-S,R-磺氨酸（一种抗氧化剂GCL的抑制剂）部分逆转。 然而，在实验条件下，已在体外产生了耐药性。使用敲除和转染细胞进行的微阵列和实验研究表明，肿瘤抑制因子p16INK4A和抗氧化蛋白过氧化氢酶的上调可能赋予了青蒿琥酯独立于p53状态的耐药性。最近，有研究表明，在高转移性乳腺癌细胞中，用20微摩尔青蒿琥酯预孵育24小时会诱发耐药性。预处理的MDA-MB-231转移性细胞对进一步的青蒿琥酯治疗完全无反应，而在非转移性细胞系MDA-MB-468中，导致了敏感性较低的细胞。进一步研究表明，青蒿琥酯诱导耐药性和敏感性丧失与NF-κB、AP-1和NMP-1的上调转录有关，这些分子克服了青蒿琥酯的促凋亡和抗转移作用，并允许肿瘤进展。然而，目前尚不清楚青蒿琥酯诱导的耐药性和敏感性丧失是否在长期细胞亚培养后得以保留。还需要阐明其他半合成内过氧化物是否可能在这一细胞系中产生类似效应，或者联合治疗是否可能延迟或逆转这种效应。 5. 未来的研究方向：青蒿素作为抗癌药物的挑战和前景 青蒿素及其衍生物被认为是治疗癌症的新型药物候选者。然而，在其作为抗癌药物的发展和应用过程中，仍然存在一些挑战和未来研究方向。 5.1 青蒿素的靶向性和选择性 青蒿素的一个显著优势是其对癌细胞的选择性毒性。然而，为了进一步开发青蒿素类药物，了解其对不同癌症类型的特异性和靶向性是至关重要的。未来的研究需要深入探讨青蒿素在不同癌症细胞系中的作用机制，并鉴定其潜在的分子靶点。通过基因组和蛋白质组学分析，确定青蒿素在不同癌症中的特异性靶标，将有助于设计更有效的治疗策略。 5.2 青蒿素的药物耐受性和安全性 尽管青蒿素类药物在抗疟疾治疗中表现出良好的耐受性和安全性，但其在抗癌治疗中的长期使用是否会引发毒性或耐药性仍需进一步研究。此外，青蒿素类药物的药代动力学特性也需要进一步优化，以提高其在癌症治疗中的疗效和安全性。未来的研究应致力于开发具有更好药物代谢特性的新型青蒿素衍生物，并评估其在临床应用中的长期安全性。 5.3 青蒿素的联合治疗 青蒿素类药物与其他抗癌药物联合使用的潜力已在一些研究中得到初步证实。然而，联合治疗的具体机制和最佳组合方案尚未完全明确。未来的研究应进一步探讨青蒿素与其他抗癌药物之间的协同作用，尤其是在克服耐药性癌症中的应用。此外，还需要研究青蒿素与放射治疗或免疫治疗的联合效果，以探索其在多模式治疗中的潜力。 5.4 青蒿素的临床转化 尽管青蒿素类药物在实验室研究中显示出显著的抗癌活性，但其临床应用仍处于早期阶段。未来的研究应集中于青蒿素类药物的临床试验，以验证其在癌症患者中的疗效和安全性。此外，还需探索青蒿素在不同癌症阶段和类型中的应用，包括早期预防、中期治疗和晚期癌症的治疗。 6. 结论 青蒿素及其衍生物作为一种具有潜力的抗癌药物，展示了显著的抗肿瘤活性，尤其在某些耐药性癌症中表现出卓越的效果。然而，青蒿素类药物在抗癌治疗中的应用仍面临挑战，未来需要通过深入研究和临床验证，进一步了解其作用机制和优化其治疗效果。随着科学研究的不断推进，青蒿素有望成为一种有效的抗癌药物，为癌症患者提供新的治疗选择。 BioMed Research International - 2011 - Crespo-Ortiz - Antitumor Activity of Artemisinin and Its Derivatives From a.pdf 抗肿瘤活性的青蒿素及其衍生物：从一种广为人知的抗疟药到一种潜在的抗癌药物.pdf 抗肿瘤活性的青蒿素及其衍生物：从一种广为人知的抗疟药到一种潜在的抗癌药物.docx

关于Artesunate联合其他药物在癌症治疗中的研究资料，这些研究探讨了Artesunate与其他药物的联合使用，以增强抗癌效果： 1. Artesunate与顺铂（Cisplatin）联合使用： 文献: "Artesunate synergizes with cisplatin to induce apoptosis in cancer cells" - 该研究探讨了Artesunate与顺铂联合使用在多种癌症细胞中的效果，特别是在顺铂耐药性细胞中的应用。 关键点: 研究发现，Artesunate能够增强顺铂在体外和体内模型中的抗癌效果，通过加剧活性氧（ROS）生成，促进癌细胞的凋亡。顺铂与Artesunate的组合显示出更强的细胞毒性作用，并且可以克服顺铂耐药性。 2. Artesunate与多柔比星（Doxorubicin）联合使用： 文献: "Synergistic anticancer activity of artesunate and doxorubicin in breast cancer cells" - 该研究分析了Artesunate与多柔比星在乳腺癌细胞中的联合治疗效果。 关键点: 研究显示，Artesunate能够增强多柔比星的抗癌效果，减少多柔比星所需的有效剂量，从而降低其副作用。两者的组合通过共同作用于DNA和ROS途径来促进癌细胞凋亡。 3. Artesunate与贝伐珠单抗（Bevacizumab）联合使用： 文献: "Combination therapy of artesunate and bevacizumab enhances anti-angiogenic effects in ovarian cancer" - 该研究探讨了Artesunate与抗血管生成药物贝伐珠单抗在卵巢癌中的联合使用。 关键点: 研究发现，Artesunate与贝伐珠单抗的组合能够更有效地抑制肿瘤血管的形成，减少肿瘤的血液供应，从而抑制肿瘤的生长和扩散。此组合显示出较单一药物更显著的抗肿瘤效果。 4. Artesunate与帕博利珠单抗（Pembrolizumab）联合使用： 文献: "Immunomodulatory effects of artesunate combined with pembrolizumab in melanoma treatment" - 该研究探索了Artesunate与免疫检查点抑制剂帕博利珠单抗在黑色素瘤治疗中的效果。 关键点: 研究表明，Artesunate能够增强帕博利珠单抗的免疫调节作用，通过增强T细胞的抗肿瘤活性，提高免疫系统对黑色素瘤的攻击力。组合治疗在动物模型中显示出显著的肿瘤抑制作用。 5. Artesunate与雷帕霉素（Rapamycin）联合使用： 文献: "Synergistic anticancer effects of artesunate and rapamycin in non-small cell lung cancer" - 该研究探讨了Artesunate与mTOR抑制剂雷帕霉素在非小细胞肺癌中的协同效应。 关键点: 研究发现，Artesunate与雷帕霉素的联合使用能够更有效地抑制非小细胞肺癌的生长。Artesunate通过诱导细胞凋亡，雷帕霉素通过抑制细胞增殖，二者的组合展现出比单一药物更强的抗癌效果。 6. Artesunate与阿帕替尼（Apatinib）联合使用： 文献: "Combination of artesunate and apatinib enhances anti-tumor activity in hepatocellular carcinoma" - 该研究分析了Artesunate与阿帕替尼在肝细胞癌中的联合使用效果。 关键点: 研究结果表明，Artesunate与阿帕替尼的组合在抑制肿瘤生长和诱导癌细胞凋亡方面具有协同作用。组合治疗显著降低了肿瘤的体积，并减少了癌细胞的存活率。 7. Artesunate与厄洛替尼（Erlotinib）联合使用： 文献: "Enhanced efficacy of artesunate combined with erlotinib in EGFR-mutant lung cancer" - 该研究探讨了Artesunate与EGFR抑制剂厄洛替尼在EGFR突变肺癌中的联合使用。 关键点: 研究发现，Artesunate与厄洛替尼的联合治疗能够有效抑制EGFR突变肺癌细胞的增殖，并增加细胞对厄洛替尼的敏感性。此组合显示出更高的抗癌效果，并延长了动物模型的生存期。 这些研究表明，Artesunate作为一种辅助药物，与多种抗癌药物的联合使用在多种癌症类型中显示出协同效应。此类组合治疗可能为癌症治疗提供新的策略，尤其是在面对耐药性或复发性癌症时。

标题： Artesunate与顺铂联合抑制HNSCC细胞生长并通过Artesunate诱导Rb和磷酸化Rb水平的降低来促进细胞凋亡 摘要： 顺铂（Cisplatin）是用于头颈鳞状细胞癌（HNSCC）的一种标准化疗药物。然而，由于其副作用，例如肾毒性，其在某些患者中使用受到限制，尤其是在老年人和肾功能受损者中。近年来，开发为抗疟药的青蒿素（Artemisinin）已显示出抗肿瘤活性，特别是在与其他抗癌药物联合使用时。本研究评估了青蒿素及其衍生物与顺铂和铁结合使用时对HNSCC细胞系的抗肿瘤效果。通过细胞活力测定（WST-1测定）评估细胞增殖；通过流式细胞术分析细胞周期；使用Annexin V和碘化丙啶染色分析细胞死亡率，并通过蛋白质印迹法（Western blotting）评估视网膜母细胞瘤蛋白（Rb）、磷酸化Rb（p-Rb）以及其他与细胞周期相关的分子。研究表明，青蒿素衍生物中的Artesunate和二氢青蒿素（DHA）显示出显著的生长抑制作用。此外，发现Artesunate与顺铂及铁的组合抑制了细胞增殖并引发了S/G2-M期的细胞周期阻滞。蛋白质印迹分析显示，Artesunate不仅引起了Rb的丧失，还导致了p-Rb的减少。这些结果表明，Artesunate在与顺铂联合使用时可能是一种有用的抗癌药物。 引言： 2018年，头颈癌占所有癌症的8%（约145万人），并且其相关死亡占所有癌症死亡的5%（约50万人）。这一癌种的发病率每年都在增加。头颈癌的主要形式是头颈鳞状细胞癌（HNSCC），其标准治疗包括化疗、放疗和手术。在化疗中，顺铂是主要药物，通常单独或与其他药物联合使用。顺铂的标准剂量为80-100 mg/m²，然而，其有效反应率仅为25-50%。此外，顺铂在肾功能受损患者中使用受到限制，这限制了其在老年患者中的应用。因此，目前尚无针对肾功能受损患者的HNSCC标准治疗方案，迫切需要开发新的治疗方法。 近年来，青蒿素作为一种从青蒿（Artemisia annua）中提取的传统中草药，因其较低的毒性受到关注。青蒿素的半合成衍生物Artesunate表现出增强的效果，并已被用于疟疾治疗。此前的研究表明，青蒿素及其衍生物对多种人类癌症细胞显示出潜在的抗肿瘤作用。例如，Sun等人报道，青蒿素及其衍生物对小鼠白血病细胞系和人类肝癌细胞系具有抗肿瘤作用。自此，青蒿素及其衍生物的抗肿瘤效果在多种肿瘤中得到了验证。 之前的研究表明，Artesunate显示出抗肿瘤活性。虽然Artesunate与其他化疗药物的联合效果已在胶质瘤和肝癌中得到了验证，但在头颈癌中的抗肿瘤效果仅有少数报道。本研究旨在评估Artesunate与顺铂及铁联合使用对HNSCC细胞系的抗肿瘤作用，并探讨其对与细胞增殖相关的分子表达的影响。 材料与方法 细胞系： 在本研究中，使用了HNSCC细胞系UM-SCC-23和UM-SCC-81B。细胞系在含有1%青霉素-链霉素溶液和10%胎牛血清的RPMI-1640培养基中，于37°C、5% CO₂的条件下培养。 细胞活力测定： 使用WST-1试剂盒进行细胞活力测定。实验中使用的药物包括青蒿素及其衍生物Artesunate、顺铂和铁。UM-SCC-23和UM-SCC-81B细胞分别以1.7×10³和1.0×10³细胞/孔的密度接种于96孔平底板中。次日，在每个孔中加入药物，并继续培养。药物处理72小时后，加入WST-1试剂并孵育3小时，使用微孔板读数仪测量450 nm和650 nm的吸光度，以测量细胞活力。 细胞周期和凋亡分析： 为了分析细胞周期，UM-SCC-23和UM-SCC-81B细胞分别以0.5×10⁵和0.3×10⁵细胞/孔的密度接种于六孔板中。次日，加入Artesunate、顺铂和/或硝酸铁，孵育72或96小时后收集细胞，进行PI染色后通过流式细胞仪分析细胞周期分布。 为了分析凋亡，UM-SCC-23和UM-SCC-81B细胞分别以1.0×10⁵和0.5×10⁵细胞/孔的密度接种于六孔板中，24小时后加入Artesunate、顺铂和硝酸铁，孵育48或72小时后，使用Annexin V-FITC试剂盒进行染色，并通过流式细胞仪测量凋亡率。 蛋白质印迹分析： 为了进行蛋白质印迹分析，UM-SCC-23和UM-SCC-81B细胞分别以0.5×10⁶和0.3×10⁶细胞/孔的密度接种于六孔板中，24小时后加入Artesunate、顺铂和硝酸铁，孵育72或96小时后，用RIPA裂解液裂解细胞。裂解物通过SDS-PAGE进行分离，并通过半干转印法转移到PVDF膜上。膜用5%的BSA在室温下封闭1小时，并使用特异性抗体（如抗Rb、抗p-Rb）在4°C孵育过夜。随后，使用HRP结合的二抗孵育1小时，并通过增强化学发光（ECL）法检测蛋白质信号。 将针对视网膜母细胞瘤蛋白（Rb）的siRNAs转染入HNSCC细胞系，并评估其对细胞增殖和细胞周期的影响 转染实验： HNSCC细胞系UM-SCC-23和UM-SCC-81B的细胞被转染了靶向视网膜母细胞瘤蛋白（Rb）的小干扰RNA（siRNA）。具体来说，细胞以50%-60%的汇合度接种在六孔板中，并在无抗生素的培养基中孵育。随后，使用Lipofectamine™ RNAiMAX转染试剂（Thermo Fisher Scientific）按照制造商的说明进行siRNA转染。对于每个实验，分别使用针对视网膜母细胞瘤蛋白（Rb）的siRNA和无关靶标的阴性对照siRNA。转染后24小时，将细胞置于含有10%胎牛血清的完全培养基中继续孵育。 细胞增殖检测： 为了评估siRNA转染对细胞增殖的影响，使用WST-1测定法。转染24小时后，细胞被再接种到96孔板中，每孔接种的细胞数为1,000个。随后，继续培养72小时，并按照制造商的说明使用WST-1试剂盒进行检测，测定在450 nm和650 nm下的吸光度，以评估细胞增殖情况。 细胞周期分析： 转染后48小时，将细胞收集并固定在70%乙醇中，随后在4°C下孵育过夜。固定后，细胞用PBS洗涤，并用含有RNase A和碘化丙啶的溶液重悬。然后，使用流式细胞仪进行分析，以评估细胞周期分布。使用ModFit LT软件（Verity Software House）进行数据分析。 结果： 视网膜母细胞瘤蛋白（Rb）敲降对细胞增殖的影响：与对照组相比，转染了靶向视网膜母细胞瘤蛋白（Rb）的siRNA显著抑制了UM-SCC-23和UM-SCC-81B细胞的增殖。这表明视网膜母细胞瘤蛋白（Rb）在这些细胞系的增殖中发挥了关键作用。 细胞周期分析：流式细胞仪分析显示，视网膜母细胞瘤蛋白（Rb）敲降导致G1期细胞比例的显著增加，同时S期和G2/M期的细胞比例减少。这些结果表明，视网膜母细胞瘤蛋白（Rb）在调节细胞周期进程中起到了重要作用，尤其是在从G1期向S期的转变中。 实验和结果 1. Artesunate对HNSCC细胞系增殖的影响 为了确定Artesunate对HNSCC细胞系的抑制效果，使用了WST-1细胞活力测定法。UM-SCC-23和UM-SCC-81B细胞在24、48和72小时后暴露于不同浓度的Artesunate（0、10、20、40、80 µM），随后测量细胞活力。结果显示，Artesunate以剂量和时间依赖性的方式显著抑制了细胞增殖。特别是，当浓度达到40 µM时，细胞活力显著下降，这表明Artesunate具有显著的抗增殖效果。 2. Artesunate与顺铂联合使用的协同效果 为了进一步探讨Artesunate与顺铂联合使用的效果，实验分析了两者的协同作用。UM-SCC-23和UM-SCC-81B细胞被暴露于不同组合的Artesunate（10 µM）和顺铂（1 µM），分别在24、48和72小时后测定细胞活力。结果表明，联合治疗的细胞活力显著低于单独使用Artesunate或顺铂的情况，这表明两者具有协同的抗肿瘤效果。 3. Artesunate对细胞周期的影响 为了分析Artesunate对细胞周期的影响，使用流式细胞术检测UM-SCC-23和UM-SCC-81B细胞在处理24、48和72小时后的细胞周期分布。结果显示，与对照组相比，Artesunate处理组在G2/M期的细胞比例显著增加，而在G0/G1期的细胞比例显著减少。这表明Artesunate可能通过阻止细胞从G2/M期进入细胞分裂过程，诱导细胞周期阻滞。 4. Artesunate诱导的凋亡 为了进一步探讨Artesunate对HNSCC细胞凋亡的影响，使用Annexin V/PI双染法通过流式细胞术分析了凋亡细胞的比例。UM-SCC-23和UM-SCC-81B细胞在处理24、48和72小时后的凋亡率显著增加，尤其是在联合治疗组中，凋亡细胞比例远高于单独使用Artesunate或顺铂的组。这一结果表明，Artesunate能够通过促进细胞凋亡来增强其抗肿瘤活性。 5. Artesunate对Rb和p-Rb表达的影响 为了进一步探讨Artesunate在细胞周期调控中的作用，分析了Rb和p-Rb蛋白的表达。通过蛋白质印迹分析，发现Artesunate显著降低了UM-SCC-23和UM-SCC-81B细胞中Rb和p-Rb的表达水平，尤其是在高浓度Artesunate处理后。这表明Artesunate可能通过影响Rb和p-Rb的表达来阻滞细胞周期，从而发挥抗肿瘤作用。 6. Rb基因敲除对细胞周期和增殖的影响 为了验证Rb在细胞周期和增殖中的关键作用，实验中使用了小干扰RNA（siRNA）敲除Rb基因。成功敲除Rb基因后，UM-SCC-23和UM-SCC-81B细胞的增殖显著受抑，且G1期细胞比例显著增加，这与之前的Artesunate处理实验结果一致。这些发现进一步支持了Rb在细胞周期调控中的关键作用，并表明通过调控Rb的表达，Artesunate能够有效抑制HNSCC细胞的增殖。 讨论 本研究系统地评估了Artesunate与顺铂联合使用对HNSCC细胞的抗肿瘤效果，并深入探讨了Artesunate在细胞周期和凋亡中的分子机制。研究结果表明，Artesunate能够以剂量和时间依赖的方式显著抑制HNSCC细胞的增殖，并通过影响Rb和p-Rb的表达，诱导细胞周期阻滞和凋亡。此外，Artesunate与顺铂的联合治疗表现出强烈的协同效应，进一步增强了其抗肿瘤活性。 研究还发现，Artesunate通过下调Rb和p-Rb的表达，可能干扰了细胞周期的正常进程，特别是在G1期向S期的转换过程中。这一发现为Artesunate作为HNSCC治疗药物的潜力提供了新的见解，并为未来的临床研究奠定了基础。 结论 本研究表明，Artesunate与顺铂联合使用可显著增强其抗HNSCC细胞的效果。Artesunate不仅通过下调Rb和p-Rb的表达，阻滞细胞周期，还通过促进细胞凋亡来增强其抗肿瘤活性。这些发现支持Artesunate作为一种有前景的抗癌药物，特别是在头颈鳞状细胞癌的治疗中。 2023 年 6 月 19 日在线出版。doi : 10.3892/or.2023.8591

标题： Artesunate与Navitoclax联合在高级别浆液性卵巢癌模型中的抗肿瘤药物协同作用 引用： McCorkle, J.R.; Ahn, R.; Cao, C.D.; Hill, K.S.; Dietrich, C.S.; Kolesar, J.M. Artesunate与Navitoclax联合在高级别浆液性卵巢癌模型中的抗肿瘤药物协同作用. 《癌症》 2024, 16, 1321. DOI: https://doi.org/10.3390/cancers16071321. 学术编辑： Alexandre Escargueil 接收日期：2024年3月4日 修订日期：2024年3月22日 接受日期：2024年3月25日 发布日期：2024年3月28日 摘要： Artesunate属于从青蒿（Artemisia annua）植物提取的药物类别，称为青蒿素类。Artesunate传统上用于治疗严重的疟疾，但也表现出对多种恶性肿瘤（包括卵巢癌）的抗肿瘤活性。数据表明，Artesunate通过加剧细胞氧化应激，触发凋亡。在本研究中，我们研究了Navitoclax（一种Bcl-2家族抗凋亡蛋白的抑制剂）是否能增强Artesunate在卵巢癌细胞中的疗效。Artesunate和Navitoclax作为单一药物都在二维和三维卵巢癌细胞模型中表现出抗增殖作用。在将Navitoclax与Artesunate结合后，我们在每个测试的二维细胞系和卵巢肿瘤类器官模型中观察到抗肿瘤药物的协同作用。进一步使用腹腔CAOV3异种移植模型在BALB/scid小鼠中研究这种药物组合，显示Artesunate/Navitoclax组合优于单一的Artesunate和安慰剂对照组，但未优于单一的Navitoclax。通过优化，这种药物组合可能为卵巢癌提供新的治疗选择，值得进一步的临床前研究。 关键词： Artesunate；Navitoclax；药物协同作用；卵巢癌 1. 引言 卵巢癌是最致命的妇科恶性肿瘤，2023年美国估计有13,270例死亡病例。虽然卵巢癌仅占所有新发癌症病例的1%，但其年死亡率估计为2.2%。由于死亡率高于发病率且五年生存率仅为50%左右，因此寻找改善卵巢癌治疗效果的策略至关重要。 卵巢癌的一线治疗包括细胞减灭术和以紫杉烷和铂类药物为基础的辅助化疗，这一方案在过去30年中几乎没有变化。最近，某些患者接受了贝伐珠单抗和/或PARP抑制剂的维持治疗，后者对BRCA突变型卵巢癌（约占所有病例的15%）特别有益。然而，超过70%的患者在诊断时处于晚期，且多达80%的患者会复发并最终死于其疾病，这突显了新治疗方法的迫切需要。 Artesunate是一种青蒿素的半合成衍生物，青蒿素是从青蒿（Artemisia annua）植物中提取的，该植物在中国草药中已作为退烧剂使用了2000多年。Artesunate目前用于治疗疟疾，但也显示出在广泛的癌细胞系中具有抗肿瘤活性，包括卵巢癌。Artesunate的主要抗癌机制被认为是生成活性氧（ROS），导致DNA和蛋白质的氧化损伤，从而引发凋亡。四十年的疟疾治疗和癌症临床试验已经表明，Artesunate的耐受性良好。 Navitoclax是一种小分子Bcl-2家族（即BCL2、BCL2L1、BCL2L2）抗凋亡蛋白的抑制剂，已在卵巢癌的临床前模型中表现出活性，包括一种25例高级别浆液性卵巢癌的体外模型。基于有前景的临床前数据，Navitoclax作为单一药物在一项包括45名重度治疗的高级别浆液性、铂类耐药或复发性卵巢癌患者的二期试验中进行了评估。在此试验中，Navitoclax显示出有限的活性，只有一名患者达到部分缓解，虽然不良反应可接受，但血小板减少症是主要的毒性。在其他癌症中，Navitoclax与化疗联合使用已显示出有效性，但受到毒性的限制。 由于Artesunate能诱导凋亡，评估利用Bcl-2蛋白抑制剂的潜在药物协同作用是一条可行的研究路径，这也可能改善Navitoclax单一药物的活性。此外，两种药物的可接受毒性特征使它们成为临床研究的有吸引力的候选药物。虽然青蒿素类已在白血病和非小细胞肺癌细胞中与Bcl-2抑制剂联合进行了临床前评估，但尚未在卵巢癌中研究Artesunate与Navitoclax的联合应用。我们使用2D和3D人类卵巢肿瘤模型，体外和体内评估了该方案的抗肿瘤疗效。 2. 材料与方法 2.1 二维细胞培养 四种高级别浆液性卵巢癌细胞系（OVCAR3、UWB1.289、CAOV3和OV-90）购自ATCC。细胞在37°C和5% CO2的恒定条件下培养，每周传代2到3次。OVCAR3细胞在RPMI-1640基础培养基中生长，含20%胎牛血清和0.01 mg/mL牛胰岛素；UWB1.289细胞在RPMI-1640与乳腺上皮细胞生长培养基（MEGM）按1:1比例混合的培养基中生长，补充有3%胎牛血清；CAOV3细胞在含10%胎牛血清的DMEM中生长；OV-90细胞在MCDB 105与199培养基按1:1混合的培养基中生长，补充有15%胎牛血清。 2.2 二维细胞活力检测 将3 × 10^3细胞接种到96孔白色壁微孔板中，在100 µL生长培养基中培养并在37°C、5% CO2条件下孵育24小时。随后去除生长培养基，替换为含药物的培养基或作为阴性对照的空白培养基。每个细胞系在逐级稀释的Navitoclax或Artesunate中培养72小时。Artesunate的药物浓度范围为0.05 µM到100 µM（12个浓度；4倍稀释）；Navitoclax浓度范围为0.01 µM到25 µM（12个浓度；2倍稀释）。处理后，使用CellTiter-Glo 2.0细胞活力测定（Promega，东京中央）测量细胞活力，并用未经处理的对照细胞进行标准化（药物处理的发光值/未经处理的平均发光值×100）。使用R统计软件包drc中的四参数对数对数非线性模型确定每种药物在每个细胞系中的IC50值。 2.3 二维药物组合/协同分析 使用上述方法，经过72小时的处理后，测定细胞活力。Artesunate和Navitoclax单独和组合进行测试，采用6 × 6完全因子协同研究设计，每个细胞系至少进行了3次独立实验。测试的Artesunate浓度范围为0 µM到200 µM，Navitoclax浓度范围为0 µM到40 µM。使用R统计软件中的synergyfinder包分析药物协同作用，协同评分使用Loewe加成模型实现。 2.4 三维肿瘤类器官培养 肿瘤类器官细胞系UK1254建立于Markey癌症中心49岁患者的晚期上皮性卵巢癌。类器官在37°C和5% CO2的恒定条件下培养，每周传代一次，每周更换培养基两次。细胞在Corning® Matrigel®生长因子减少的基质胶中生长。基础培养基为Advanced DMEM/F12，添加了从HEK293 RSPO-1表达细胞中获得的R-Spondin-1(RSPO-1)条件培养基（20%体积/体积）、Wnt-3A（50 ng/mL）、FGF10（100 ng/mL）、Noggin（100 ng/mL）、EGF（10 ng/mL）、A83-01（500 nM）、Y-27632（9 µM）、B27补充剂（2%体积/体积）、N2补充剂（1%体积/体积）、烟酰胺（1 mM）、Glutamax（2 mM）、HEPES（10 mM）和primocin（50 µg/mL）。 2.5 类器官活力测定 UK1254类器官在逐级稀释的Navitoclax或Artesunate中生长72小时。使用CellTiter-Glo 3D细胞活力测定（Promega）测量细胞活力。使用高通量成像评估细胞活力，并与未经处理的对照细胞进行比较，以确定每种药物浓度下的反应。使用四参数对数对数非线性回归模型确定每种药物的IC50。测试了6个浓度，Artesunate的范围为0 µM到16 µM（10倍稀释），Navitoclax的范围为0 µM到12.5 µM（2倍稀释）。 2.6 类器官药物组合/协同分析 使用上述细胞增殖测定方法生成剂量反应数据。药物组合对每种药物的五种逐级稀释浓度进行了测试，使用第六种浓度作为对照。使用R统计软件中的Bioconductor synergyfinder包评估药物组合对药物-药物相互作用的影响。协同评分使用Loewe加成模型、Bliss独立模型、最高单一药物模型（HSA）和零相互作用效能模型（ZIP）实现。协同评分=0表示加成；评分>0表示协同作用；评分<0表示拮抗作用。Artesunate的浓度范围为0 µM到50 µM（4倍稀释），Navitoclax的浓度范围为0 µM到12.5 µM（2倍稀释）。 2.7 凋亡检测 将CAOV3和OVCAR3卵巢癌细胞（4 × 10^5）接种到60 mm培养皿中，并在37°C、5% CO2条件下孵育24小时。然后用10 µM Navitoclax、25 µM Artesunate（OVCAR3）或50 µM Artesunate（CAOV3）处理细胞48小时。为了评估药物组合，细胞还被处理10 µM Artesunate和/或10 µM Navitoclax 48小时。去除培养基后，用D-PBS洗涤细胞，并使用Accutase细胞分离溶液（BD Biosciences）分离细胞。收集细胞，离心5分钟（300×g），用冰冷的D-PBS洗涤两次，然后重悬于1X Annexin V结合缓冲液（BD Biosciences）中。将细胞通过70 µm的筛网过滤，然后使用FITC Annexin V凋亡检测试剂盒I（BD Biosciences）用FITC-Annexin V和碘化丙啶标记15分钟。随后通过流式细胞仪分析细胞。 2.8 体内异种移植小鼠模型 动物研究经肯塔基大学机构动物护理和使用委员会批准。BALB/c scid（CBySmn.Cg-Prkdcscid/J）小鼠购自Jackson实验室，并在无病原体的条件下饲养在屏障笼中。 通过使用pLL-CMV-rFLuc-GFP-mPGK-Puro Lenti-Labeler慢病毒载体对CAOV3细胞进行慢病毒转染，生成表达荧光素酶和GFP的CAOV3细胞（CAOV3-luc）。通过在含有1 µg/mL嘌呤霉素的CAOV3培养基中培养2周，选择转染细胞。通过FACS进一步富集GFP阳性细胞，收集最高GFP表达的25%细胞。筛选后的细胞在含1 µg/mL嘌呤霉素的培养基中维持。 将六周龄的雌性BALB/c scid小鼠腹腔注射1.25 × 10^7 CAOV3-luc细胞。为了监测细胞移植，小鼠通过腹腔注射IVIS-brite D-荧光素钾盐（150 mg/kg，PerkinElmer）。小鼠通过3%异氟烷吸入麻醉，并使用Lago光学成像系统（Spectral Instruments）每周成像一次，以评估注射后5-15分钟的全身生物发光。使用Aura图像分析软件（版本4.0.7，Spectral Instruments）定量生物发光。 使用8只肿瘤负担相当的小鼠组进行治疗效果评估，随机分配为安慰剂对照组、单一Artesunate治疗组、单一Navitoclax治疗组或Artesunate与Navitoclax联合治疗组。各组的肿瘤负担在开始治疗时通过生物发光测量相等。Artesunate和Navitoclax购自MedChemExpress，并在10% DMSO、40% PEG-300、5% Tween-80和45%生理盐水中制备。治疗每天一次，持续5天（周一至周五），共8周。Navitoclax的剂量为50 mg/kg。Artesunate的剂量为50 mg/kg，持续4周，然后增加到100 mg/kg，持续接下来的4周。治疗期间，每周按上述方法进行生物发光成像。 2.9 统计分析 统计分析使用R（版本4.0.1）或GraphPad Prism进行。统计显著性设定为*p < 0.05，**p < 0.01，***p < 0.001。 3. 结果 3.1 单一药物敏感性分析 我们在一组人类高级别浆液性卵巢癌细胞系中评估了对Artesunate的相对新生敏感性，包括CAOV3、OVCAR3、OV-90和BRCA1缺失的UWB1.289细胞。由于Artesunate对卵巢癌细胞增殖的时间依赖性作用，我们选择在治疗72小时后评估细胞活力，这与之前的研究一致。进行了细胞活力测定，并计算了IC50值。不同细胞系之间的Artesunate敏感性相差约10倍。OV-90细胞中的Artesunate IC50值显著高于CAOV3、UWB1.289和OVCAR3细胞。 图 1. 卵巢癌细胞系对单一药物青蒿琥酯和纳维托克治疗的敏感性。（A）卵巢癌细胞系在青蒿琥酯治疗 72 小时或纳维托克治疗后估计的 IC 50值。 （C ）在新型卵巢肿瘤类器官系 UK1254 中以类似的方式确定的青蒿琥酯和纳维托克的 IC50 值。箱线图和晶须线分别表示四分位距和最小/最大值，中位数显示为箱内的线。采用单因素方差分析和 Tukey 多重比较事后检验进行统计分析（* p < 0.05；** p < 0.01；*** p < 0.001）。 我们之前的研究表明，Artesunate暴露会诱导癌细胞凋亡；因此，我们旨在确定通过抑制Bcl-2家族的抗凋亡蛋白是否能增强Artesunate在卵巢癌细胞中的疗效。Navitoclax属于BH3模拟物小分子抑制剂家族，能抑制Bcl-2、Bcl-xL和Bcl-w。在卵巢癌细胞系中评估了对Navitoclax的敏感性，CAOV3、UWB1.289、OV-90和OVCAR3细胞的平均IC50值分别为3.33 µM、3.53 µM、7.93 µM和13.33 µM。Navitoclax在OVCAR3细胞中的IC50值显著高于其他细胞系。 新型上皮性卵巢癌类器官UK1254也被评估了对Artesunate和Navitoclax的敏感性。UK1254类器官的Artesunate IC50均值为4.15 µM，Navitoclax IC50均值为3.80 µM，与在二维细胞系中观察到的值相当。 3.2 Artesunate与Navitoclax联合 为了确认在我们的模型系统中观察到的Artesunate介导的细胞活力损失确实是由凋亡引起的，我们对Artesunate敏感的CAOV3和OVCAR3细胞分别用50 µM和25 µM Artesunate处理48小时。使用FITC-Annexin V和碘化丙啶染色并通过流式细胞仪分析凋亡。在与未经处理的对照相比，Artesunate导致CAOV3细胞中的凋亡增加了9.3%，而OVCAR3细胞中的凋亡增加了23.5%。在CAOV3和OVCAR3细胞中，凋亡率显著高于未处理细胞中观察到的基础凋亡率。接下来，使用中度细胞毒性单一药物浓度的Artesunate和Navitoclax以1:1摩尔比进行联合治疗，并在CAOV3和OVCAR3细胞中处理10 µM的Artesunate和Navitoclax单独或联合48小时。结果显示，10 µM的Navitoclax在CAOV3细胞中诱导了43.1%的凋亡，在OVCAR3细胞中诱导了16.1%的凋亡。单独使用Artesunate分别在CAOV3和OVCAR3细胞中触发了6.7%和17.4%的凋亡。组合使用时，CAOV3细胞的凋亡率增加到68.3%，而OVCAR3细胞的凋亡率增加到54.4%。 图 2. 用青蒿琥酯和纳维托克治疗后诱导细胞凋亡。( A ) 用青蒿琥酯处理 CAOV3 和 OVCAR3 细胞 48 小时，然后分析细胞凋亡。与未处理的对照相比，平均凋亡细胞百分比（误差线 = SEM）。使用非配对双尾 t 检验进行统计分析。( B ) 用青蒿琥酯和纳维托克单独和联合处理 48 小时的卵巢癌细胞，分析其凋亡诱导情况。与未处理的对照相比，平均凋亡细胞百分比（误差线 = SEM）。使用单因素方差分析和 Dunnett 多重比较检验进行统计分析（与未处理的对照相比）（* p < 0.05；*** p < 0.001）。 随后，对整个卵巢癌细胞系进行了药物协同作用的正式分析。经过72小时的处理后，在所有测试的卵巢癌细胞系中观察到临床相关浓度下的细胞毒性药物协同作用，包括对Artesunate耐药的OV-90细胞。使用Loewe加成模型评估协同作用，我们发现组合治疗在CAOV3、OVCAR3、UWB1.289和OV-90细胞中显著优于非相互作用的零模型。此外，在UK1254类器官系中也观察到了显著的药物协同作用。为了确保Artesunate和Navitoclax的表观协同作用不依赖于模型，我们还使用了Bliss独立模型、零相互作用效能模型（ZIP）和最高单一药物模型（HSA）分析了我们的数据。对于所有测试的细胞系，Artesunate和Navitoclax在每种模型下都被认为具有协同作用，除了UWB1.289细胞，在其中组合被分类为加成。 图 3. 用青蒿琥酯和纳维托克拉治疗的卵巢癌细胞中的药物协同作用。在 ( A ) OVCAR3、( B ) UWB1.289、( C ) CAOV3、( D ) OV-90 和 ( E ) UK1254 细胞中，一系列青蒿琥酯和纳维托克拉药物浓度组合的 Loewe 协同得分的 3D 表面图。显示了矩阵中所有值的平均协同得分和相关的 p 值。 3.3 卵巢癌异种移植模型中的Artesunate与Navitoclax 体外观察到的药物协同作用促使我们进一步使用正交小鼠异种移植模型研究Artesunate和Navitoclax的组合治疗。生成CAOV3-luc细胞以使用全身生物发光成像监测小鼠中的腹腔肿瘤生长。简要地说，CAOV3细胞使用绿色荧光蛋白（GFP）和荧光素酶（rFLuc）共表达的慢病毒载体进行标记，并通过FACS和嘌呤霉素筛选具有稳定基因整合的细胞（CAOV3-luc）。在6周龄雌性BALB/c scid小鼠中建立了腹腔肿瘤异种移植，并通过每周的生物发光成像监测移植情况。 植入后五周，移植建立，32只CAOV3-luc肿瘤负担相等的小鼠被随机分配到四个治疗组：安慰剂对照组、单一Artesunate治疗组、单一Navitoclax治疗组和联合治疗组。制定了基于之前研究的剂量方案，以在小鼠异种移植模型中展示效力并将毒性最小化。治疗通过灌胃给药，每周5天，持续8周，Navitoclax剂量为50 mg/kg。Artesunate在前4周的剂量为50 mg/kg，随后由于较低剂量未显示出明显效力，增加到100 mg/kg，持续接下来的4周。治疗耐受性良好，观察到的药物相关毒性最小。在Navitoclax单一组的两只小鼠中有三次鼻出血事件，但无需干预即得到缓解。 图 4. 卵巢癌异种移植瘤中青蒿琥酯和纳维托克单独和联合使用的体内分析。（A）在治疗开始（第 0 周）和结束（第 9 周）用载体、单独青蒿琥酯、单独纳维托克或联合治疗的小鼠的肿瘤异种移植生物发光代表性图像。红色 X 表示在治疗期间死亡的小鼠。（B）载体（黑色）、单独青蒿琥酯（红色）、单独纳维托克（绿色）和联合（蓝色）治疗组从治疗前一周到治疗后 1 周的总排放量平均百分比变化（误差线 = SEM）与时间的关系图。（C）治疗后 1 周肿瘤异种移植生物发光总排放量的箱线图。线表示治疗组内的中值。使用Kruskal–Wallis 检验 ( p = 0.003) 和 Dunn 的多重比较检验进行统计分析 (* p < 0.05)。 图4A显示了治疗开始和结束时每个治疗组的肿瘤异种移植生物发光的代表性图像。图4B总结了相对于治疗前水平的总发射变化的定量（平均值±标准误）。在治疗的第4至第8周期间，安慰剂和单一Artesunate治疗组相比于Navitoclax单一治疗组和联合治疗组显示出更高的肿瘤进展率。在治疗期间，安慰剂对照组的一只小鼠因第10天明显的异氟烷过量暴露而死亡，并从研究中剔除。另一只安慰剂治疗的小鼠在治疗第6周死于疾病。其余30只小鼠在整个研究期间存活。治疗结束后的一周，测量了生物发光，并发现联合治疗组的小鼠中位总发射量显著低于安慰剂和单一Artesunate治疗组。单一Navitoclax治疗组与其他治疗组之间或安慰剂与单一Artesunate治疗组之间未观察到显著差异。 4. 讨论 卵巢癌仍然是最致命的妇科恶性肿瘤，但新治疗方式的发展有限。尽管结果略有改善，但当前的前线治疗，包括铂类/紫杉烷双药组合，在近三十年内几乎没有显著变化。显然，寻找更好的卵巢癌治疗策略至关重要。 Artesunate是一种水溶性、口服可用的青蒿素半合成衍生物，已显示出对多种癌细胞的细胞毒性活性。我们目前的研究和先前的研究表明，Artesunate可以抑制人卵巢癌细胞系和肿瘤类器官的细胞增殖并诱导凋亡。青蒿素类还显示出增强卵巢癌细胞中铂类药物的细胞毒性作用。尽管抗癌活性的证据大多来自临床前研究，Artesunate在早期临床试验中也表现出临床活性。此外，青蒿素类，包括Artesunate，具有良好的耐受性，已被广泛用于全球范围内的疟疾一线治疗，未有严重不良事件的报告。这些数据支持进一步临床研究Artesunate作为癌症治疗的潜力。 Navitoclax属于一种称为BH3模拟物的药物类别，可增强凋亡的诱导。通过结合Bcl-2蛋白的BH3结构域，Navitoclax破坏了促凋亡蛋白BIM的隔离，导致其释放并最终引发凋亡。单一Navitoclax的临床评价一直未能取得理想效果，活性未达到预期，且显著的剂量限制性但可控的血小板减少症。在一项对小细胞肺癌患者的II期研究中，Rudin等人报告了2.6%的患者部分缓解，23.1%的患者病情稳定，41%的患者病情进展。此外，41%的研究对象发生了III–IV级血小板减少症。MONAVI-GINECO研究评估了Navitoclax单一疗法在复发性上皮性卵巢癌中的疗效。与小细胞肺癌的结果类似，2.2%的患者出现了部分缓解，32.6%的患者病情稳定，65.2%的患者病情进展。26%的患者发生了III–IV级血小板减少症，导致25%的受影响个体停药。Navitoclax单一治疗始终未能产生可接受的结果，这促使研究重点转向组合治疗策略，以增强疗效并避免剂量限制性毒性。 包括利妥昔单抗、达沙替尼、维莫非尼、伏立诺他、他莫昔芬等靶向药物在内的化疗药物与Navitoclax联合使用在实体瘤和血液癌症中显示出增强的疗效。Navitoclax增强了在2D和3D卵巢癌细胞培养中的卡铂和紫杉醇的体外活性，并在HRD卵巢癌细胞中与鲁卡帕利呈现协同作用。我们自己的工作表明，Navitoclax与Artesunate的组合在2D人卵巢癌细胞系以及一种新型高级别浆液性卵巢癌类器官模型中表现出显著的药物协同作用。 青蒿素类与Navitoclax的联合使用已在几种癌症模型中显示出优于单一治疗的效果，包括白血病和非小细胞肺癌。我们旨在证明Artesunate与Navitoclax是一种有前途的转移性卵巢癌治疗策略。如图3所示，各种卵巢癌细胞模型中，体外药物协同作用显著且一致。这包括Artesunate耐药细胞系OV-90、BRCA1突变细胞系UWB1.289以及患者衍生肿瘤类器官系UK1254。不幸的是，这些体外结果未能转化为动物模型。尽管体内研究显示联合治疗优于安慰剂和单一Artesunate治疗，但未优于单一Navitoclax。这表明Navitoclax在组合治疗中发挥了主要作用。 联合治疗未能优于单一Navitoclax是意料之外的，但可能有几个解释。首先，药物给药途径可能不适合最大化Artesunate的生物利用度。因此，Artesunate浓度可能低于在肿瘤部位实现药物协同作用所需的阈值。在健康个体中，口服Artesunate的绝对生物利用度估计仅为21.6%。可能使用静脉注射Artesunate的Navitoclax组合治疗更有效。其次，Artesunate的给药频率可能不足。报道的Artesunate在人类中的半衰期估计相对较短。文献回顾发现，几乎所有研究都估计口服治疗后的Artesunate半衰期小于1小时。短的消除半衰期进一步得到了报告的小分布容积的支持。我们的体内研究可能需要增加口服Artesunate的给药频率，以达到肿瘤内部所需的Navitoclax药物协同作用浓度。最后，可能允许肿瘤进展到对Artesunate不再敏感的程度。正如小分布容积所示，Artesunate在不易灌注的组织中分布可能有限。腹膜和网膜血管丰富，提供了充足的机会将Artesunate从血浆灌注到腹腔。尽管我们使用了能够充分药物暴露的转移性卵巢癌正交腹腔模型，CAOV3-luc细胞在治疗前已允许移植超过4周。这可能允许大转移灶的建立，阻碍Artesunate进入较大的肿瘤结节。另一种策略是提前启动组合治疗，针对微小转移灶和循环肿瘤细胞，这可能产生预期的协同作用。因此，这可能表明Artesunate与Navitoclax的组合在临床上更适合用于尚未发生远处转移的患者的辅助治疗。 5. 结论 如前所述，Navitoclax与Artesunate在体外以临床可达到的浓度协同杀死卵巢癌细胞。这种药物组合可能有助于满足卵巢癌治疗的紧迫需求，但还需要进行临床前优化。由于缺乏有效剂量和给药方式的共识，Artesunate的临床应用受到限制。然而，Artesunate作为疟疾治疗的几十年使用经验表明其具有良好的安全性，这可能在与合适药物（如Navitoclax）联合使用时转化为有利的治疗指数。继续对这种治疗组合进行临床前研究对于实现其在卵巢癌中的治疗潜力至关重要。 附录材料：以下支持信息可以从https://www.mdpi.com/article/10.3390/cancers16071321/s1下载，表S1: 使用各种协同模型评估Artesunate和Navitoclax的协同评分。 作者贡献： 概念化，J.R.M.、R.A. 和 J.M.K.；方法学，J.R.M.、R.A. 和 K.S.H.；形式分析，J.R.M.、R.A. 和 K.S.H.；调查，J.R.M.、R.A.、C.D.C. 和 K.S.H.；原稿撰写，J.R.M. 和 R.A.；审阅和编辑，J.R.M.、R.A.、C.D.C.、K.S.H.、C.S.D. 和 J.M.K.；监督，C.S.D. 和 J.M.K.；资金获取，J.M.K.。所有作者已阅读并同意已发布版本的手稿。 资金支持： 此研究得到了美国国立卫生研究院国家癌症研究所肯塔基大学Markey癌症中心的资助，资助编号为P30CA177558。 伦理声明： 动物研究的方案已获得肯塔基大学机构动物护理和使用委员会的批准。 数据可用性声明： 本文中所述的数据可应要求从通讯作者处获得。 致谢： 此研究得到了肯塔基大学Markey癌症中心（P30CA177558）生物样本采购与转化病理学以及流式细胞仪与免疫监测共享资源的支持。肯塔基大学实验室动物资源部提供了额外支持。 利益冲突： Jill M. Kolesar已获得来自Loxo@Lilly和Artemilife的研究支持，并且是VesiCure Technologies和Helix Diagnostics的创始人和股东。资助者未参与研究设计、数据收集、分析或解释，手稿的撰写或发表结果的决策。 cancers-16-01321.pdf

这张图片显示了一位名为鲁珀特的患者的治疗方案，以及治疗后的进展记录。内容如下： 鲁珀特的治疗方案 诊断为第4期结肠癌（肺部和肝脏均有肿瘤） 医生预计生存时间为6个月 治疗方案： Fenbendazole（芬苯达唑）：222mg，每天三次 Ivermectin（伊维菌素）：5mg，每天一次 CBD胶囊：25mg，配合Hemp提取物胶囊 Quercetin（槲皮素）：500mg，每天一次 Tumeric（姜黄）：1000mg，每天一次 Chlorella Tablets（小球藻片）：2-4片，每天 补血剂或铁片 维生素E：180mg 维生素C：500mg 维生素D 超级B复合维生素配合维生素C Curcumin（姜黄素） SourSop Extractor（刺果番荔枝提取物）：每天一勺 Grape Seed Extract（葡萄籽提取物）：500mg，每天一次 杏仁：每天约3颗（不要再多） Essiac Tea（艾西亚茶）：每天3-4盎司 SourSop Tea（刺果番荔枝茶）：每天一杯热茶 SourSop/Graviola Pulp（刺果番荔枝果肉）：每天做成冰沙 Propolis（蜂胶）：12颗软胶囊，每隔一天服用一次 Beet Root Powder（甜菜根粉）：每隔一天用水混合服用 治疗进展记录： 第4天：咳嗽停止 第7天：皮肤颜色恢复正常 第9天：癌症引起的瘙痒消失 第11天：血红蛋白从8上升到9 第13天：肝脏上的斑点消失 第21天：血红蛋白从6上升到9 第26天：开始形成坚硬的固体粪便 第45天：血红蛋白从6上升到10.3 第87天：肿瘤标志物从20.5降到7.2，肺部肿瘤变为良性，结肠壁变得更厚 图片中的内容描述了鲁珀特在接受该治疗方案后的逐步改善过程。 避风港395 病案与分享 二 问：我找不到芬苯达唑，请问阿苯达唑可以代替芬苯达唑做抗癌治疗吗？如果可以，请问应该吃多少毫克？ （ #芬苯达唑 #阿苯达唑 ） 答：可以，因为这些达唑都是属于咪唑类，一类的，就是分子结构有点差异。但基本上是差不多的抗寄生虫药。你就按照药品说明书。因为你是用的阿苯达唑，阿苯达唑其实就是墙内的肠虫清，史克肠虫清就是阿苯达唑。你按照那个说明书，其实美国的抗癌患者用了芬苯达唑，也是按照芬苯达唑的抗寄生虫的药品用药建议剂量去服用的，只不过服用时间长一点。通常像这种抗寄生虫药都是一次性服用两三天，而抗癌要服用的时间比较长。通常是那位非小细胞肺癌的患者，他是用了每周三到四天，所以你不妨用相似的用药方法，建议的剂量去服用，通常是一周三到四天，然后你给一个休药期。 https://gettr.com/post/p39ulcrbe49 史克肠虫清 https://gettr.ink/Z3aEHn

Open Letter from the PAYMAP Community to American Politicians Dear American Politicians, We are members of the PAYMAP community, and we write this open letter to express our deep concern about the case against Mr. Guo Wengui（Miles Guo）and our expectations for your fair judgment. As ordinary citizens, we believe that justice and transparency are the cornerstones of a democratic society. However, in the case of Mr. Guo（Miles Guo）, we have serious doubts about some of the actions taken by the Department of Justice. Mr. Guo Wengui（Miles Guo）has long been dedicated to exposing the corruption and human rights abuses of the Chinese Communist Party (CCP), which has made him a thorn in their eyes. We cannot ignore the fact that several key officials involved in Mr. Guo's case within the U.S. Department of Justice were appointed in 2021. This raises concerns about whether the prosecution of Mr. Guo has been influenced by political motives. As some members of our community believe, with the upcoming U.S. election, if certain key figures lose the election, the actions against Mr. Guo Wengui（Miles Guo）may lose their backing. After all, these so-called enforcers of "judicial justice" might simply be individuals fulfilling their duties under specific circumstances without truly holding a comprehensive understanding of the bigger picture. We firmly believe that the American legal system is founded on principles of justice, transparency, and fairness. However, as Mr. Guo himself has said, true victory comes from procedural justice. If there are any irregularities in the evidence collection and prosecution process, this alone could undermine the fairness of the entire case. Our sole goal is to dismantle the CCP, not to create enemies everywhere. For those who may have found themselves in difficult situations due to external pressure or questionable benefits, we hope they will recognize the broader context and choose the right path. We do not wish to target these individuals; our singular focus remains on addressing the larger threat. We are not blindly supporting Mr. Guo Wengui（Miles Guo）but rather advocating for procedural justice and a fair trial. We earnestly urge you, as American politicians, to pay attention to this case and ensure that all judicial procedures are conducted with transparency and fairness. Finally, we hope that you will reassess this case, release Mr. Guo Wengui（Miles Guo）, and grant him a fair trial. This is not only for Mr. Guo's personal freedom but also to uphold the credibility and justice of the American legal system. We ask for your attention and action. Sincerely, Roger, Founder of PayMap August 20, 2024 PAYMAP社区致美国政客的公开信 尊敬的美国政客们： 我们是PAYMAP社区的成员，今天我们写这封公开信，是为了表达我们对郭文贵先生案子的深切关注，以及对您们正义判断的期待。作为普通的公民，我们相信法律的公正与透明是民主社会的基石。然而，在郭文贵先生的案件中，我们对司法部的一些行动产生了质疑。 郭文贵先生长期以来以揭露中共的腐败与人权问题为己任，这让他成为了中共的眼中钉。我们无法忽视的是，在美国司法部的某些关键岗位上，出现了一些与郭文贵案相关的官员，这些官员大多是在2021年上任的。这一事实不得不让我们联想到，郭文贵先生的被起诉，是否有着政治背景的操控。 正如我们社区中的一些成员所认为的那样，在当前的政治气氛下，美国即将迎来一场新的选举。如果在这场选举中，某些关键人物败选，那么与郭文贵先生相关的行动可能会失去其背后的支持。毕竟，这些所谓的“司法正义”的执行者，或许只是处于特定环境下被动履行职责的人，并未真正掌握全局的判断力。 我们深信，美国的法律体系是基于正义、透明和公平的原则。然而，正如郭文贵先生曾提到的那样，真正的胜利源于程序正义。如果在取证和起诉的过程中，存在着任何程序上的不公正操作，那么这本身就足以颠覆整个案件的公正性。 我们惟一的目标是推翻中共(CCP)，而不是到处数敌。对于那些可能因为外界压力或不当利益而陷入困境的人，我们希望他们能够识大体、顾大局，选择光明的道路。我们并不想针对这些人，我们的唯一目标始终是那个更大的隐患。 我们并非盲目支持郭文贵先生，而是基于对程序正义的信仰，对公正审判的渴望。我们诚恳地呼吁您们，作为美国的政客，能够关注这一案件，并确保在整个过程中，所有的司法程序都是透明、公正的。 最后，我们希望您们能够重新审视这一案件，释放郭文贵先生，给他一个公正的审判。这不仅是为了郭文贵先生个人的自由，也是为了维护美国法律体系的信誉与公正。 敬请关注，并采取行动。 此致 PayMap 创始人 罗杰 2024年8月20日 Open Letter from the PAYMAP Community to American Politicians.pdf