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抗aids病毒的药物组合物 本发明涉及抗艾滋病毒的青蒿素类药物，例如青蒿琥酯等，是抗艾滋病毒的高效药物，毒性低，治疗指数大，安全可靠，价廉。青蒿素类药物是我国首创的药物，具有新型结构，本类药物原仅用于抗疟疾。因此本发明是使本类药在治疗艾滋病上有突破性的进展。 抗AIDS病毒的药物组合物 本发明涉及碳环化合物领域，特别涉及倍半萜内酯的青蒿素的衍生物二氢青蒿素苯氨基甲酸酯。 艾滋病是由艾滋病毒感染引起的一种传染性疾病导致人体免疫机能损伤性缺陷，它是一种世界性，致死性的传染性疾病。目前世界上约有2000万人感染了艾滋病毒，AIDS病期患者达600万，约有一半人已经死亡。我国也不例外，艾滋病已于1984年传入我国，目前我国已发现的HIV感染者890例，其中中国人带毒者740例，AIDS期病人5例，艾滋病者仍在不断地增加。 抗艾滋病毒药物，第一个被报导的是苏拉明(Suramin)，1985年发现AZT(叠氮胸腺嘧啶脱养核苷)等具体抗艾滋病毒的活性，1986年进行了临床研究，1987年AZT作为第一个被美国FDA批准用于治疗艾滋病的药物。至今世界范围内筛选的有几百种新化合物及其配方，并包括几十种天然药物和中药。到目前为止，被美国FDA批准用于治疗艾滋病的药仅AZT、DDI(二脱氧肌苷)、DDC(二脱氧胞苷)、天然药物和中药中天花粉蛋白(GLQ23)被FDA批准进行临床观察，但是这几种药都存在着不同类型的毒性，如AZT应用4-6周后，病人出现骨髓抑制，继而发展成严重贫血，单独应用6个月后可产生耐药性，而且AZT并不能对巨噬细胞内感染的病毒有抑制作用，因而不能消除隐患，同时价格昂贵。DDC及DDI存在对外周神经的毒性，服药6周后即出现，应用较大剂量，既使停药一年仍然有后遗症。天花粉蛋白在临床试用中发现了神经毒，严重者出现一时性痴呆，甚至昏迷，实验研究表明天花粉蛋白处理感染HIV的巨噬细胞，产生和释放可溶性毒性物质，对人脑细胞有严重的破坏作用。 到目前为止在世界范围内被实验研究和评价的有几百种药物及其配方、天然药物、单味中药及复方中药中除很少数已分离了有效成分，如：日本报导甘草甜素、香菇多糖等，美国加州大学报导的紫花地丁有效成分等，而大多数均以粗提物进行实验，化合物中多为核苷，腺苷或肽类衍生物。及至1992年在荷兰阿姆斯特丹(Amsterdam)举办的世界艾滋病大会上，仍未见药物研究有突破性进展。 本发明目的在于：提供一种从中药中提取的化学有效成分及其衍生物，它们是毒性低、价廉的抗艾滋病类药物。克服AZT、DDI、DDC药物的缺点。本发明的另一个目的是用式I化合物制备抗AIDS病毒的组合物。本发明还有一个目的是用式I化合物或含淡化合物的药物治疗AIDS病的应用。 本发明的目的是这样达到的：采用了我国具有丰富资源的中药青蒿，即植物黄花蒿(Artemisia annua L..)中提取的青蒿素(artemisinin)，进而合成二氢青蒿素苯氨基甲酸酯在抗艾滋病毒的作用上取得突破性进展，从而本发明目的就完全达到了即，本发明提供了如通式(I)的化合物... https://patents.google.com/patent/CN1051451C/zh?oq=CN1051451C抗艾滋病病毒药物组合物---青蒿素类药物，如青蒿琥酯等，是一种高效的抗艾滋病病毒药物 Anti-AIDS-virus drug composition The present invention relates to an artemisinin medicine for resisting AIDS viruses such as artesunate, etc., which is a high efficient medicine for resisting AIDS viruses. The present invention has the advantages of low toxicity, high therapeutic index, safety, reliability and low cost. The artemisinin medicine is firstly originated in China, and has a new structure. The artemisinin medicine is originally used for resisting malaria only, and therefore, the present invention makes a prominent progress for the medicine of curing AIDS. The pharmaceutical composition of anti-AIDS-virus The present invention relates to the carbocyclic compound field, particularly the derivative dihydro-abrotine phenyl urethan of the arteannuin of sesquiterpene lactones. Acquired immune deficiency syndrome (AIDS) is to cause the damaging defective of human immunologic function by a kind of infectious disease that HIV (human immunodeficiency virus) infection causes, it is a kind of worldwide, the infectious disease of lethal.Have 2,000 ten thousand people to infect HIV (human immunodeficiency virus) at present in the world approximately, AIDS stadium patient reaches 6,000,000, has half people dead approximately.China was no exception, and acquired immune deficiency syndrome (AIDS) has been imported China in 1984, present HIV the infected's 890 examples of having found of China, and Chinese carrier's 740 examples wherein, AIDS phase patient 5 examples, the AIDS patient is still constantly increasing. Anti-hiv drug, that first is reported is suramin (Suramin), found the activity of AZT concrete anti AIDS virus such as (Azidothymidine take off foster nucleoside) in 1985, carried out clinical research in 1986, AZT was used for the treatment of the medicine of acquired immune deficiency syndrome (AIDS) as first by drugs approved by FDA in 1987.So far in the world wide screening hundreds of kind noval chemical compound and prescription thereof arranged, and comprise tens kinds of natural drugs and Chinese medicine.Up to the present, the medicine that is used for the treatment of acquired immune deficiency syndrome (AIDS) by drugs approved by FDA trichosanthin (GLQ in AZT, DDI (didanosine), DDC (zalcitabine), natural drug and the Chinese medicine only 23) by FDA approval carrying out clinical observation, but these several medicines all exist dissimilar toxicity, use 4-6 after week as AZT, bone marrow depression appears in patient, then develop into serious anemia, can produce drug resistance after using 6 months separately, and AZT can not have inhibitory action to the virus that infects in the macrophage, thereby can not remove a hidden danger, cost an arm and a leg simultaneously.DDC and DDI exist peripheroneural toxicity, promptly occur after 6 weeks of taking medicine, and use heavy dose, have both made drug withdrawal that sequela was still arranged in 1 year.Trichosanthin has been found neural poison in clinic trial, momentary dementia appears in severe patient, even stupor, and experimentation shows the macrophage of trichosanthin processing infected by HIV, produce and release solubility toxicant, people's brain cell is had serious destruction. Up to the present worldwide being removed seldom in hundreds of kind medicine and prescription, natural drug, single medicinal material and the herbal mixture by having of experimentation and evaluation, number has separated effective ingredient, as: Japan's report glycyrrhizin, lentinan etc., the Herba Violae effective ingredient of California, USA university report etc., and number average experimentizes with crude extract mostly, mostly be nucleoside in the chemical compound, adenosine or peptide derivative.And to 1992 in world's acquired immune deficiency syndrome (AIDS) conference that Amsterdam, the Netherlands (Amsterdam) is held, do not see that yet drug research has breakthrough. The object of the invention is: a kind of chemical effective ingredient and derivant of extracting from Chinese medicine thereof is provided, and they are low, the inexpensive anti-AIDS class medicines of toxicity.Overcome the shortcoming of AZT, DDI, DDC medicine.Another object of the present invention is the compositions with formula I compound anti-AIDS-virus.A further object of the invention is with formula I chemical compound or contains the application of the Drug therapy AIDS disease of desalinating compound. The objective of the invention is to reach like this: adopted China to have the Chinese medicine Herba Artemisiae Annuae of affluent resources, it is the arteannuin (artemisinin) that extracts in the plant Artemisia annua (Artemisia annua L..), and then synthesizing dihydro arteannuin phenyl urethan makes a breakthrough using of anti AIDS virus, thereby the object of the invention has just reached promptly fully, the invention provides the chemical compound as general formula (I)... https://patents.google.com/patent/CN1051451C/en?oq=CN1051451C抗艾滋病病毒药物组合物---青蒿素类药物，如青蒿琥酯等，是一种高效的抗艾滋病病毒药物

新型青蒿素凝胶及其制备方法 一类青蒿素或脱氧青蒿素的12位或11位和12位取代的衍生物，它们可由二氢青蒿素类化合物出发，通过醚化、酯化、胺化、水解、曼尼许反应制备生成。带胺基的青蒿素类化合物与无机酸或有机酸能制成人体生理上可接受的盐，经初步药理筛选发现它们具有多种生物活性；抗寄生虫病、抗爱滋病及其相关病、抗癌、免疫调节等方面的活性，这些衍生物有的油溶性大，有的水溶性好，易于制剂，具有成药前景。 新型青蒿素衍生物及其制备方法 本发明属有机化学中萜类化合物青蒿素衍生物及其制备方法。 青蒿(菊科植物黄花蒿Artemisia annua)是常用中药。李时珍“本草纲目”记载，青蒿苦、寒、无毒，主治疥疮痂痒、恶疮、疟疾寒热、虚劳寒热、骨蒸烦热、心痛热黄、赤白痢下等病。七十年代初，中国科学家从青蒿中提取分离到抗疟有效成份青蒿素，它的化学结构式为：天然青蒿素具有抗疟活性，但由于它有溶解度小，制剂困难和复燃率高的不足，致使它的广泛应用受到了限制，这就促使科学家们致力于青蒿素的结构改造工作，以解决上述问题。中国科学家发明了抗疟活性高于青蒿素的蒿甲醚和青蒿琥酯的新抗疟药。前者溶于油，后者的钠盐溶于水，但这一水溶液稳定性差。欧洲专利[EP0362730(1989年)]报道了二氢青蒿素的醚类及硫醚类衍生物(其中包括含碱性基团的青蒿醚类)的抗疟作用、提及它们兼有抗阿米巴和抗球虫作用。美国专利[US4816478(1989年)]提到二氢青蒿素的醚类，酯类衍生物有抗艾滋病及其相关病的作用，但无具体化学结构。中国专利[CN 89109562.4(1989年)]报道了一类含有碱性基团可制成盐的水溶性青蒿素衍生物。 近年的药学杂志报道，中国科技人员对青蒿及青蒿素类除抗疟外的其他生物活性作了广泛的探索，有的已在临床上试用成功，例如对急性上感高热的退烧作用，红斑狼疮的治疗、鸡球虫病的防治、牛羊焦虫病的防治、牛血吸虫病的防治、猪弓形虫病的治疗等，这些研究结果给人启迪。 为探索青蒿素类化合物的潜在药用价值，本发明旨在设计新的合成路线，合成并提供更多类型的青蒿素衍生物。 https://patents.google.com/patent/CN1038416C/zh Artemisin derivant and its preparation method The present invention relates to 11 position or/and 12 position substituted derivates of artemisinin or deoxidized artemisinin, which can be prepared by carrying out etherealization, esterification, oxidation, aminolysis reaction, hydrolyzation and Manish reaction on dihydroartemisinin compounds. An artemisinin compound with amido can be prepared into a human physiology acceptable salt together with inorganic acid or organic acid. The derivates have various kinds of bioactivity by preliminary pharmacological sieving, such as the anti-parasitic disease activity, the activity of anti-AIDS and relevant diseases, the anticancer activity, the immunological regulation activity, etc. Some derivates have high lipid solubility, and some derivates have high water solubility. The derivates can be easily prepared into preparations and have pharmaceutical prospect. Artemisin derivant and preparation method thereof The invention belongs to terpenoid artemisinin derivative and preparation method thereof in the organic chemistry. Sweet wormwood (feverfew Herba Artemisiae annuae Artemisia annua) is a conventional Chinese medicine.LI Shi-Zhen " Compendium of Materia Medica " record, sweet wormwood hardship, cold, nontoxic cures mainly the scabies scab and itches, dislikes sore, malaria fever and chills, consumptive disease fever and chills, hectic fever due to yin dysphoria with smothery sensation, yellow, the inferior disease of dysentery with red and white feces of pained heat.Early seventies, extraction separation is to antimalarial effective ingredient Artemisinin from sweet wormwood for the Chinese science man, and its chemical structural formula is: Natural Artemisinin has antimalarial active, but because it has solubleness little, preparation difficulty and the high deficiency of recrudescence rate cause its widespread use to be restricted, and this just impels scientists to be devoted to the structure of modification work of Artemisinin, to address the above problem.The Chinese science man has invented antimalarial active and has been higher than the Artemether of Artemisinin and the new antimalarial drug of Artesunate.The former is dissolved in oil, and the latter's sodium salt is water-soluble, but this aqueous stability is poor.European patent [EP0362730 (1989)] reported the ethers of Dihydroartemisinin and thioether analog derivative (comprising the sweet wormwood ethers that contains basic group) the antimalarial effect, mention that they have anti-amoeba and anticoccidial effect concurrently.United States Patent (USP) [US4816478 (1989)] is mentioned the ethers of Dihydroartemisinin, and ester derivative has the effect of anti-AIDS and related diseases thereof, but does not have particular chemical.Chinese patent [CN 89109562.4 (1989)] has reported that a class contains the water-soluble arteannuin derivant that basic group can be made into salt. In recent years pharmaceutical journal report, the Chinese science and technology personnel to sweet wormwood and artemisine the other biological activity except that antimalarial done widely to explore, what have tries out successfully clinically, for example to the acute effect of bringing down a fever of going up the high heat of sense, the treatments of the control of the treatment of lupus erythematosus, the control of coccidiosis of chicken, cattle and sheep babesiasis, the control of bos sinicus, pig toxoplasmosis etc., these results of study edify to the people. Be to explore the potential pharmaceutical use of artemisine compounds, the present invention is intended to design new synthetic route, and is synthetic and more eurypalynous artemisinin derivative is provided. https://patents.google.com/patent/CN1038416C/en

本文短链接：gettr.ink/ijct53 译注：CRISPR编辑是指利用CRISPR-Cas系统进行基因组编辑的过程。CRISPR（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）是一种存在于细菌和古细菌中的天然免疫系统，能够识别和切割特定的DNA序列。通过设计合成特定的RNA分子（通常称为gRNA），CRISPR系统可以将Cas蛋白（通常是Cas9）引导到目标DNA序列上，并在那里引发双链切割。这样，科学家们可以利用CRISPR-Cas系统来编辑基因组，包括插入、删除或修饰特定的基因序列。 Cas-9是CRISPR系统中的一种蛋白质，用于切割和编辑DNA。 我们现在有证据表明，在癌细胞系中，COVID-19修改的mRNA产品可能会发生污染的外源DNA整合事件。您可以在这里和这里阅读更多相关信息。Phillip Buckhaults即将开始一个新项目，测试真实人类的癌细胞，以寻找这种整合事件。您可以在这里阅读相关信息。 我每天总结科学文章的帖子并不如以前频繁，因为我现在正处于深思的阶段，经过了四年的全力以赴。我需要停下来更深入地思考，从科学的角度来看，他们究竟为了什么做了所有这些。我大部分认为整个COVID事情都是一个诡计，为基因治疗时代提供了一个过渡，而修改的mRNA LNP平台将是至关重要的。您可以在这里听我谈论这个。 我希望这篇文章是一篇关于 CRISPR/Cas 系统及其实验室制造的对应系统（"gRNA-Cas-9 系统"）的综述 1 ,因为我相信这将是下一阶段 "个性化医疗保健 "的重要组成部分，我相信这将完全融入 "集中式医疗保健系统"，在这个系统中，数据将被提取出来并在各机构之间无限制地使用，每个人的基因组都将被知晓，甚至可能被访问和修改。 关于CRISPR/Cas CRISPR/Cas系统源自细菌古生物，是一种设计用来在特定地点切割DNA的系统，以应对外来入侵物（如噬菌体）或质粒，作为一个巧妙的免疫防御系统的一部分。2 我们人类已经借用了这一巧妙的系统，用于基因治疗和基因工程。例如，它主要用作基因组工程工具，用于诱导DNA中的位点定向双链断裂，以敲除基因。特别是来自链球菌的Cas-9，在基因组编辑工具中‘备受青睐’。 关于CRISPR - 集群规律间隔短回文重复序列 CRISPR是一类发现于细菌和古生菌基因组中的DNA序列家族。这些序列来源于先前感染该原核生物的噬菌体的DNA片段。它们用于在随后的感染中检测和破坏类似噬菌体的DNA。因此，这些序列在原核生物的抗病毒（即抗噬菌体）防御系统中起着关键作用，并提供了一种后天免疫。CRISPR在约50%的已测序细菌基因组中发现，在近90%的已测序古生菌中发现。 3 图1：CRISPR Cascade蛋白（青色）结合到CRISPR RNA（绿色）和噬菌体DNA（红色）。来源：https://en.wikipedia.org/wiki/CRISPR#Evolution 关于Cas-9 - CRISPR相关蛋白-9 Cas9是一种在某些细菌对抗DNA病毒和质粒的免疫防御中发挥关键作用的蛋白质，在基因工程应用中被广泛利用。它的主要功能是切割DNA，从而改变细胞的基因组。4 图2：S. pyogenes Cas9与sgRNA及其靶向DNA的复合物的晶体结构。PDB：4OO8。来源：https://en.wikipedia.org/wiki/Cas9 关于gRNA/sgRNA - （单）导向RNA 导向RNA（gRNA）或单导向RNA（sgRNA）是一种短的RNA序列，作为Cas9内切酶或其他Cas蛋白的引导，用于切割双链DNA，从而可用于基因编辑。在细菌和古生菌中，gRNA是CRISPR-Cas系统的一部分，它作为一种适应性免疫防御机制，保护生物免受病毒侵害。在这里，短的gRNA充当外源DNA的检测器，并指导C as酶降解外源核酸。5 关于PAM - 原位间隔基序 原位间隔基序（PAM）是在CRISPR细菌适应性免疫系统中由Cas9核酸酶靶向的DNA序列之后紧接着的一段2-6碱基对的DNA序列。PAM是入侵病毒或质粒的一个组成部分，但在细菌宿主基因组中找不到，因此不是细菌CRISPR位点的组成部分。如果目标DNA序列后面不是PAM序列，则Cas9将无法成功结合或切割目标DNA序列。PAM是一个至关重要的靶向组分，区分了细菌自身和非自身DNA，从而防止CRISPR位点被CRISPR相关核酸酶靶向和破坏。6 图3：Cas9-sgRNA-DNA三元复合物的示意结构。来源：https://en.wikipedia.org/wiki/Guide_RNA 这个系统的令人惊奇之处在于，CRISPR/Cas-9复合物可以简化为一个包括sgRNA和Cas-9蛋白的二元系统，有效地创建了一个人工Cas-9系统（gRNA-Cas-9系统）。通过这样做，这个系统可以根据gRNA指定的任何DNA目标进行‘查找’和切割。你们明白这意味着什么吗？这相当令人难以置信。这意味着实验室制造的gRNA-Cas-9系统可以被编程用来定位任何DNA序列，从而实现对任何想要的基因的修改。另一个令人惊奇的地方是它还是‘模块化’的：可以对系统进行额外的酶或修饰，不仅能够实现双链DNA断裂，还能进行核苷酸交换7、基因激活（或沉默）8 或基因治疗，其中DNA序列被编辑。9 核酸酶结构域使DNA出现切割，以敲除特定的基因。你还可以停用切割结构域，并将新的酶，如脱氨酶，融合到Cas-9蛋白上以突变特定的碱基。2018年发表的一项研究已经证明了CRISPR/Cas-9系统在兔模型中敲除了与人类糖尿病相关的基因（PAX4）的应用。敲除PAX4基因，兔子就会生病。 10 、 11 图4：使用CRISPR-Cas9系统生成PAX4基因敲除（KO）兔子。来源：https://academic.oup.com/g3journal/article/8/8/2833/6026920?login=false 这是一个总结我们如何使用CRISPR/Cas-9系统的视频，讲得非常好。 现在我们都对CRISPR/Cas-9系统有了很好的理解，知道人类是如何利用这个系统进行基因治疗等工作的，让我们回到最初为什么对这个主题感兴趣。 最近，对COVID-19修改的mRNA辉瑞瓶进行的测序揭示了SV40增强子的存在。由Medical Genomics（工作已复制）测序的瓶子显示增强子是用于生产修改的mRNA的质粒图中的一部分 - 辉瑞或BioNTech在发布的‘原始质粒图’中没有披露 - 如在这个版本的滚动评议员报告中所示。12 目前，加拿大卫生部（HC）和欧洲药品管理局（EMA）均承认其存在。顺便说一句，这只是数十亿片段中发现的一个DNA片段而已，这些片段也在辉瑞单价和双价瓶中被发现。 SV40增强子【译注：SV40增强子是一种源自病毒（Simian virus 40）的DNA序列，具有增强邻近基因转录的能力。它通常用作基因表达调控的工具，可以增加基因的转录效率和稳定性。SV40增强子广泛应用于生物医学研究和基因工程中，用于提高目标基因的表达水平】作为基因治疗工具非常有用，因为它是一个核定位序列（NLS）：它对将物质运送到细胞核非常有效。您可以在这里阅读相关信息。14如果这是您第一次发现这个，那么您可能会想知道为什么这个NLS会出现在这些辉瑞质粒/瓶子中。它在制造过程中实际上并没有起到功能，所以不需要出现在那里。它是一个哺乳动物表达启动子。你会对此感到奇怪是很正常的。 我们一些人担心发现（并了解）这些瓶子中的多余DNA，是其潜在地整合到被修改的mRNA LNPs转染的细胞的基因组中，这些细胞已经被注射到数十亿人体内作为COVID-19注射推出疯狂的一部分（我希望Substack有一个可怕字体的选项）。随机整合事件可能导致基因组不稳定，并可能导致诸如癌症之类的事情，尤其是如果它们发生在基本基因中。 图5：随机DNA整合与人类基因组相关的癌症风险。来源：在华盛顿特区举行的ICS峰会中的演示 - 2024年2月。 最近，医学基因组学的Kevin McKernan确实报道了人类染色体9和12上的整合事件的证据。在这里了解了PAM后，我开始考虑增加GC含量的修改mRNA的密码子优化方面。请记住，PAM是允许Cas-9定位和查询DNA的2-6核苷酸片段。“Cas-9与PAM之间的特定相互作用是有效结合目标序列并在切割之前进行局部链分离所必需的。”16 通常情况下，它们以NGG的形式出现【译注：以NGG的形式出现指的是特定DNA序列的结构，其中N代表任意核苷酸（即A、T、C或G），而GG表示两个鸟嘌呤核苷酸。在CRISPR-Cas9系统中，NGG序列通常被称为PAM（Protospacer Adjacent Motif，靶标毗邻序列），是Cas9蛋白用于识别和结合目标DNA序列的关键部分。】，其中N是任何核苷酸。 理论上，CG含量【译注：CG含量是指DNA或RNA序列中胞嘧啶（Cytosine，C）和鸟嘌呤（Guanine，G）碱基的比例或百分比。在基因组学和分子生物学中，CG含量通常被用作评估基因组或基因组区域的甲基化程度、遗传稳定性和其他生物学特性的指标。高CG含量的区域可能在基因组中具有特定的功能或起重要的调控作用】的增加将增加质粒中刺突基因中PAM的数量【译注：PAM代表“Protospacer Adjacent Motif”（靶标毗邻序列），是CRISPR-Cas9系统中的一个关键部分。PAM是Cas9蛋白用于识别和结合目标DNA序列的特定模式，通常以NGG（其中N代表任意核苷酸，G代表鸟嘌呤）的形式出现。在基因组编辑中，增加质粒中刺突基因中PAM的数量意味着增加CRISPR-Cas9系统针对特定DNA序列的识别和切割能力。】，不是吗？如果发生了短DNA片段的整合事件，那么与PAM相关插入的可能性会增加，不是吗？如果这在之前已经知道，那么预先设计的sgRNA将是就绪的。它们只需要到达细胞核并切割，切割，切割。这完全是假设性的。没有必要相信这甚至在逻辑上可能。 有人以‘M.A.’的名义将一项名为“辉瑞疫苗CRISPR实验”【译注："疫苗CRISPR实验"指的是使用CRISPR基因编辑技术进行疫苗研发或生产的实验。在这种实验中，科学家可能利用CRISPR技术来设计、构建或改良疫苗的基因组，以增强其免疫原性、稳定性或其他特性。】的研究上传到了Zenodo预印本服务器，讨论了Comirnaty（‘他’一直将其错误地拼写为Cominarty）产品中的修改的mRNA是否含有CRISPR/Cas9的编码物质的想法。17 原因我记得这个拼写是因为‘Comir’是onComir这个词的一部分，就像：与癌症相关的微RNA。在‘Comirnaty’这个名称中，miRNA本身被包裹在‘co’和‘ty’之间。很遗憾，它不是‘zy’，对吧？那就会是一个非常‘co-zy’的miRNA。 就我个人而言，我认为这个‘人’可能是假的，因为虽然他们有ORCID ID【译注：Open Researcher and Contributor ID开放式研究者和贡献者识别号】，但他们没有名字。而且他们的电子邮件似乎也是假的。我已经发送了一个问题到他们列出的电子邮件地址，但几天来都没有收到回复。这可能是一个机构心理操作，因为在Kevin McKernan发现的辉瑞质粒基因中，没有Cas-9的编码物质迹象。我检查过。如果有的话，它会非常明显，因为它很大（1,018 bp）。 我脑海中有两个问题。在任何给定的转染细胞中，带有PAM的整合事件会有多容易发生？有没有人实际上考虑过这个问题？如果一个Cas-9蛋白被指示制作为另一个‘疫苗’的一部分，那么与Cas-9，sgRNA（也是外源引入的）和整合片段的相互作用会导致切割吗？还是这涉及基因沉默或激活？理论上，您可以通过这种方法引入终止密码子或改变突变基因。您还可以向Cas-9添加转录激活因子，以激活特定基因的转录机器，即我之前提到的模块化方面。您还可以通过使基因转录失活来物理阻止一个基因。可能性很广泛。 我将以下内容留在这里，并在最后回过头来。这个对齐是由Ah Kahn Syed博士提供的。太棒了。还要感谢Ugene的提示（对于Mac OS来说，它比MEGA更好用），以及阅读。注意我添加了一些‘控制’序列 - 包括已发布的WHO序列：11889 - 以供自己检查。这非常引人注目。即使在Novavax产品中，所有这些产品中都保留/保留了38个核苷酸 - 不包括可以构成PAM的CGG。 图5：辉瑞、莫德纳、诺瓦克斯等的序列比对... 在PAM CGG起始位置1290处共享相同的38个核苷酸序列。 需要思考的问题：为什么这个保守的片段（1252-1289）在所有这些产品/载体/序列中都存在？为什么它们位于PAM（CGG）的上游？它们可能是后续gRNA-Cas-9系统管理的目标DNA吗？ 相当黑暗的问题。如果‘安装’这种硬件到基因组中的结果 - 从逻辑上讲 - 真的永远无法预测或复制吗？它是否不可预测/不可复制？ HIV gRNA-Cas-9系统的发散 我有一个非常狂野的想象力，我可以在科学可能性方面想得很远。传统科学‘知识’作为背景可能有点棘手，我试图不要对我的知识基础过于严格。关于任何事情，我们到底知道什么呢？我们甚至不知道意识是什么，但它每天都在‘驱动’我们每个人。 我可以想象，工程化的Cas-9系统被用于从潜伏感染的人类细胞的基因组中剪切HIV基因组。事实上，科学界的人们多年来一直在进行这方面的实验。这是一个绝妙的想法。这几乎就像有人最初的想法是把它放在那里看看能不能拿出来一样（开玩笑）。我的意思是，我们的基因组大约有8%是逆转录病毒的（参见内源性逆转录病毒（ERV）），这些逆转录病毒整合对我们的存在非常重要（我们已经进化出了共同利用某些逆转录病毒蛋白来服务于生殖和发育的机制），但当你谈论的是像HIV这样的东西时，它就像早餐吃CD4+ T细胞一样（而且其起源（在我看来）仍然‘有问题’（阅读书籍‘The River’）），你确实不希望那种病毒整合。 关于使用gRNA-Cas-9系统清除HIV，您还可以使用它来吃掉HIV-1整合基因组的某些片段以使其失活。就拿艾滋病毒来说吧，在2013年发表的一篇论文中，使用了经密码子优化的gRNA-Cas-9系统来针对HIV-1的长末端重复序列（LTRs）。设计的gRNA与LTRs互补。通过转染，将gRNA与人性化的Cas-9一起通过质粒引入哺乳动物细胞中。19 这个想法让人想起了最近的发现，即LNPs的特洛伊木马技术也包含质粒和质粒DNA片段。 gRNA-Cas-9系统也可以在‘打击和消灭’策略的背景下用于清除HIV。在这种情况下，gRNA-Cas9系统用于激活潜在的HIV-1病毒储库，以便可以使用药物（抗逆转录病毒疗法（ART））来杀死潜在感染的细胞。有点像熏蜂窝一样。2022年发表了一篇名为“SARS CoV-2 mRNA疫苗暴露潜在的HIV至Nef特异性CD8+ T细胞”的论文，其中作者描述了一个听起来像是意外的‘打击和消灭’结果（策略）。20 基本上，COVID-19修改的mRNA注射剂激活了（有效地参与）HIV-Nef特异性CD8+ T细胞 - 杀死病毒感染细胞的细胞 - 并导致细胞相关HIV RNA的减少，这是衡量HIV持续存在的一个指标。 烟雾（潜伏性逆转录激活剂）21 = 修改的mRNA COVID-19注射剂；蜜蜂 = 潜在的HIV；养蜂人 = 抗逆转录病毒治疗 作者总结了他们的发现如下： 尽管这种活动在SARS-CoV-2 mRNA疫苗的背景下是偶然的，但不足以导致整体HIV DNA的可测量减少，但未来的研究可以有多种方式有意地优化和利用这种内置的潜伏性逆转录激活剂（LRA）活性，以通过编码HIV抗原的mRNA疫苗来实现储备减少。 翻译：让我们在将来将修改的mRNA技术用作LRA - 即：推进平台并将其扩展到HIV设置。可能性是无限的！ 在COVID-19事件中，关于HIV相关的‘事情’在幕后进行了很多，这让我真的很好奇为什么。还有怎么回事。除了spike蛋白在结构和组成上与gp120相似之外，为什么在临床试验中有一个特定的HIV阳性人群测试组，以及为什么人们被鼓励在注射后进行HIV筛查？22 据报道，其他疫苗可以诱导细胞相关HIV RNA的增加，也有报道称，细胞相关HIV RNA的增加可能伴随着HIV-p24特异性CD8+ T细胞反应的轻微和短暂增加，那么这是否可以解释为什么？2324 在这些领域的某些人只是好奇知道这种新的实验性技术的影响吗？或许是这样。 在我看来，似乎有很多 "惊人 "的重叠。我的意思是，是的，定期筛查可能会因为精神病患者的 2 周来充实钱包的事情而减少，但仍然如此。上述论文实际上指出，"与前 4 年相比，大流行期间每天的急性艾滋病感染（AHI）诊断率明显更高"。我个人并不相信这完全是因为医疗机构的常规 HIV 筛查减少而导致检测频率提高（在我看来，如果有的话，这很可能会相互平衡），那么，HIV 诊断频率提高又是怎么回事呢？我们谈论的是急性感染--开始；新感染--那么，这里发生了什么？也许更多的人滥交？更多的人使用静脉注射毒品？ 艾滋病毒抗原检测中的 p24 抗原不太可能与 SARS-2 的存在有任何关系，因此，至于 SARS-2 使艾滋病毒检测结果 "呈阳性"，我怀疑这种情况不会发生。因此，我们所面临的似乎是急性艾滋病病毒感染者人数的真正上升。但为什么会这样呢？ 在研究这篇文章的过程中，我还发现了一些不为人知的东西。HIV 对整合到人类基因组的位置是有选择性的。事实上，它非常喜欢 11 号染色体。25 研究还表明，HIV 的整合不成比例地针对癌症基因。 26 根据我的逻辑思维，整合事件会发生在 DNA 活跃的地方，即：未盘绕/可接触的地方。我必须转贴这段精彩的动画，因为它非常直观地展示了 DNA 是如何以及在什么时候解开的（4:09），例如在转录过程中。 我为什么要谈这个？因为如果有人想使用 CRISPR/Cas-9 系统激活一个基因，如果他们知道基因在哪里，他们就会更容易成功。 我之所以要讲这个艾滋病毒的故事，是因为我想展示在艾滋病毒--一种现实生活中对人类造成问题的逆转录病毒--目前还没有可持续的解决方案的背景下，使用工程化 gRNA-Cas-9 系统的概念验证（体内）。还有这个，不过没关系。我之所以需要调查他们的研究进展（或至少是已发表的研究进展），是因为我想知道使用 LNPs 作为 gRNAs 的递送系统，以及使用质粒作为人源化 Cas-9 的递送系统，实际部署工程化 gRNA-Cas-9 系统有多容易。如果作为一项研究目标可以实现，是否有人会允许它超越研究范围？ 这项研究的下一步是寻找 Cas-9 和与之互补的 gRNA： GAT CGC CGA CTA CAA CTA CAA GCT GCC CGA CGA CTT CAC CGG 待续 1. 许艳，李忠. CRISPR-Cas系统：概述，创新和在人类疾病研究和基因治疗中的应用. 计算结构生物技术杂志. 2020年9月8日;18:2401-2415. doi: 10.1016/j.csbj.2020.08.031. PMID: 33005303; PMCID: PMC7508700 2. Barrangou R (2015). "CRISPR-Cas系统在适应性免疫和更多领域中的作用". 当前免疫学观点. 32: 36–41. doi:10.1016/j.coi.2014.12.008 3. https://en.wikipedia.org/wiki/CRISPR 4. https://en.wikipedia.org/wiki/Cas9 5. https://en.wikipedia.org/wiki/Guide_RNA 6. https://en.wikipedia.org/wiki/Protospacer_adjacent_motif 7. Fortunato F, Rossi R, Falzarano MS, Ferlini A (2021-02-17). "Duchenne肌萎缩症的创新治疗方法". 临床医学杂志. 10 (4): 820. doi:10.3390/jcm10040820 8. Jiang F, Doudna JA (2017-05-22). "CRISPR–Cas9结构和机制". 生物物理学年度评论. 46 (1): 505–529. doi:10.1146/annurev-biophys-062215-010822 9. Demirci S, Leonard A, Haro-Mora JJ, Uchida N, Tisdale JF (2019), "镰状细胞疾病的CRISPR/Cas9：应用，未来可能性和挑战", 细胞生物学与转化医学, 卷5, 实验医学和生物学的进展, vol. 1144, Cham: Springer International Publishing, pp. 37–52, doi:10.1007/5584_2018_331 10. 徐元元, 王勇, 宋宇宁, 邓继超, 陈茂, 欧阳洪生, 来良雪, 李战军. 利用CRISPR/Cas9系统产生和表型鉴定PAX4基因敲除兔. 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郭文贵 Miles Kwok 郭文贵先生是爆料革命、法治基金、法治社会的发起人，新中国联邦和G系列的创始者，全球灭共第一人。 郭文贵先生祖籍山东聊城莘县，出生于文革时期一个普通的农民家庭。成年后，由于在民主运动中反对中国共产党的独裁体制而遭到无情的政治迫害，由此开始，激发了他内心反共与灭共的理想。随着时间的推移和实力的积累，基于灭共的使命，他于2017年开始发起爆料革命，和西方反共人士共同创建了“法治基金”和“法治社会”，并缔造了新中国联邦。 1989年学生民主运动期间，郭文贵先生因捐助学运而遭到中共当局的抓捕，随后他被关押在河南省青峰看守所。1989年6月4日是中国历史中黑暗的时刻，中共向手无寸铁的学生开枪，用坦克碾压学生的身体，就在同一天，郭文贵先生的八弟也被警察枪杀。 在清丰看守所被关押的22个月里，郭文贵先生受尽了当局的残酷折磨，并目睹了那些为实现中国的民主而抗争的勇士被无情的残害。大部分勇士没有经过法律程序，没有经过控告和辩护，就被执行了枪决。经历过地狱般的牢狱生活，使郭文贵先生彻底认清了CCP的邪恶本质。也就是从那时候起，他便发誓要消灭邪恶的中国共产党。 1991年，郭文贵先生被释放，时年21岁的他创立了河南大老板家具厂，两年后与香港爱莲有限公司的董事长夏萍女士合作创立了合资企业裕达置业，于1998年建成了被赞誉为“中原佛手”的“裕达国贸”五星级酒店，这也是中国首家五星级酒店。该酒店以其卓越的建筑艺术审美和完美的品质，成为了河南省的地标性建筑。为报复郭文贵先生所发起的爆料革命，2021年中共当局以12.8亿元人民币起价拍卖裕达面积合计13.5万平方米的房产。 2000年后，郭文贵先生进入北京发展。在2002年成立了北京政泉置业有限公司，即后来的北京政泉控股有限公司。2019年，辽宁大连市中级法院以强迫交易罪为名判罚北京政泉控股有限公司600亿人民币。 2007年郭文贵先生在毗邻北京奥林匹克运动会公园之地建起了集5A智能写字楼、高档酒店、高档公寓和精品商业区龙廊的龙形建筑，即盘古大观。该建筑与鸟巢、水立方一并成为北京新的地标性建筑。 盘古大观的建设过程非常的不平凡。在2003年底2004年初，时任北京市副市长的刘志华无理由的将盘古大观的建设用地收回，此后郭文贵先生历经三年的维权和控诉，终于拿回了该建设用地，并提告刘志华使之进了监狱，也因此得罪了王岐山和一些中共权贵家族。 在拿回盘古大观的建设之地后，郭文贵先生只用了380多天，在2007年9月建成了七星盘古大观，该建筑成为了2008年北京奥运会的新闻中心和接待世界各国政要、运动员的主要酒店。同样作为报复，2019年北京市第三中级法院以债务为名，将盘古大观龙首以51.82亿元人民币进行了拍卖。 2012年习近平、王岐山上台掌握了国家权力，并在中共十八大以后展开了以反腐为名，实为清除异己的党内清洗运动。以此，时任中纪委书记的王岐山公报私仇，将曾经调查刘志华受贿案的马建、孟会清抓捕，并借此累及郭文贵先生。2015年，郭文贵先生被迫出走英国，而他的家人、员工几十人被抓捕，其中包括他的妻子与女儿。 2017年1月23日郭文贵先生接受《明镜》采访，爆料时任北京市公安局局长傅政华的贪腐，以及对他本人的威胁，在抓捕他家人和员工时的暴力执法。自此，以“保命、保财、报仇”为目标起始，拉开了爆料革命的序幕，更提出了“反对以贪治国，反对以假治国，反对以黑反贪，反对以警反贪。不反习主席，不反中华民族，不反国家”的“郭七条主张”，提出把灭共的战场延展至海外，通过“以美灭共，以法灭共，以共灭共”的战略彻底消灭中共。 此后郭文贵先生分别在3月8日、6月16日、7月17日、9月19日接受《明镜》采访，展示了大量证据，揭露王岐山的腐败，以及其家族、养女、私生子，及其属下王健、陈峰控股的海航集团和渤海金控如何盗取国家财富并转移至海外的贪腐行为，爆出王岐山等盗国贼在海外购置大量的地产和金融资产，总资产竟然达到了20万亿美元之多。尤其讽刺的是，自称“打铁还须自身硬”的王岐山及其家人不仅在海外拥有万亿资产，而且还拥有海外多国护照。 2017年4月19日，郭文贵先生接受VOA（美国之音）的直播采访，然而自采访开始不到一个小时，当要爆出王岐山的腐败时，VOA却借故停止了采访进程。这次的断播门事件是VOA有史以来的第一次，并震惊了世界。也因此，郭文贵先生对中共高层腐败的爆料和揭露引起了举世瞩目。而就在郭文贵先生即将接受VOA采访前不到24小时，由中共原公安部副部长孟宏伟担任主席的国际刑警组织向郭文贵先生发出了红色通缉令。也正是在VOA断播事件后，郭文贵先生正式开启了爆料革命。 2018年9月孟宏伟回到北京后被中纪委国家监委抓捕，2020年1月21日孟宏伟以受贿罪被判有期徒刑13年6个月。 2017年9月1日、15日、24日，10月14日郭文贵先生接连揭露了袁宝璟之死和他死后财产被政法委书记孟建柱、公安部副部长孙力军等抢夺，以及雷洋因窥视到杨澜、王芳与孟建柱的私情关系后惨遭灭口的真相。同时郭文贵先生用证据展示了王岐山、孟建柱、孙力军如何利用海外信托大量洗钱将钱转到海外情妇、私生子女名下，同时揭露了他们如何为了保命换器官按需杀人，戕害无辜的暴行，揭露了CCP以假治国，以警治国、以黑治国的真实面目。 2017年10月2日，郭文贵先生原计划要在华盛顿哈德逊中心演讲，却因为CCP的蓝金黄，使这次演讲如VOA的4.19断播一样被迫取消。10月4日，郭文贵先生在华盛顿国家中心召开了新闻发布会，在这次新闻发布会上郭文贵先生第一次告诉美国和世界中共的蓝金黄战略，警告美国和世界黑暗已经来临，并提示要做好充分的准备和应对。 2017年郭文贵先生以一人抗衡一国之力，撼动了中共邪恶帝国的根基。通过向全世界揭露中共的本质及其危害，使中共遭受到了极其严峻的挑战。出于对郭文贵先生爆料的恐惧，2017年5月中共先后派出公安部纪委书记刘彦平和公安部副部长孙力军至美国运作，意图遣返郭文贵先生。同时孟建柱在马来西亚的私生子刘特佐花费重金买通了赌场大亨斯蒂芬·韦恩（Steve Wynn）和时任共和党筹款委员会副主席艾利奥特·布罗伊迪（Elliott Broidy），并指使二人游说美国总统川普和美国政府，以达到引渡郭文贵先生的目的。 2020年，美国司法部宣布艾利奥特·布罗迪违反了外国人代理登记法，其本人对此指控表示服罪。 为了阻止郭文贵先生的爆料，阻止他在社交媒体的发声，Facebook、Twitter先后关停了郭文贵先生的社交帐户，Youtobe关闭了郭文贵先生的直播功能。因此，郭文贵先生于2018年1月创建了自己的媒体平台———郭媒体。 2018年，郭文贵先生的爆料革命注定是一个不平凡的一年。7月3日，海航集团有限公司联合创始人、董事局董事长王健在法国南部的普罗旺斯离奇身亡。随后郭文贵先生耗资派出多批人次赴法国进行调查，最终获取了大量关于王建身亡的证据和情报，并以此证实了王健之死乃是人为故意谋杀。 2018年11月20日，郭文贵先生与川普总统前首席顾问斯蒂芬·班农先生一起主持召开了《王健之死真相新闻发布会》，郭文贵先生在发布会上展示了部分视频和文件，指出了王健所谓的自己坠崖死亡的诸多疑点，并呼吁法国和美国展开司法调查。同时，郭文贵先生在本次发布会上宣布成立法治基金，成立该基金的用意是要帮助那些被中共迫害的异议人士、官员和其家属，并捐款1亿美元。 王健之死和郭文贵先生之前对海航的爆料，使得海航集团一步步走向终结。2021年1月29日，海航集团以不能清偿到期债务为由，向法院申请破产重组，这是中共幕后操纵的结果。 2019年6月香港爆发了百万人游行，以抗议香港政府推行的《逃犯条例修订草案》。在整个运动期间，郭文贵先生依据情报不断向香港和世界发出警报，爆料中共将会派出大量军人伪装成港警进入香港对游行示威者实施镇压和抓捕，警告世界中共早在这之前就通过蓝金黄控制了香港的政界、商界、司法界、警察系统，使他们成为傀儡，并提到香港存在中共秘密的执法黑屋，这意味着中共随时可以在香港抓捕任何人。爆料特别提到的是，中共有可能会在香港使用生物武器或者化学武器杀人，借以平息反送中事态。这些预警在之后也都一一得到了验证。 在香港反送中运动期间，郭文贵先生不仅提供了大量的物资和资金支援，而且在中共军队戒严后营救了大量香港人到海外。 2020年是台湾大选之年，而郭文贵先生早在2019年就爆料中共将利用台湾大选谋取对台湾的控制，试图利用“三枪”策略，即被中共用蓝金黄控制的郭台铭、韩国瑜、柯文哲参与总统选举，只要三人中的任何一人当选，中共就可以达到彻底控制台湾的目的。然而香港的反送中运动对台湾社会的深刻影响，加上郭文贵先生的提前爆料和揭露中共的对台阴谋，使台湾各界深刻认知到了中共对台湾民主选举的威胁，最终通过手中的选票，使中共阴谋夺台的计划流产。 2019年12月，武汉爆发了新冠病毒疫情。事实上郭文贵先生不仅在当年6月份就爆料中共有可能在香港使用生化武器，还在11月的直播中再次提到中共可能会发动生化战争。当武汉病毒大爆发，美国也出现了相关病例的同时，郭文贵先生第一时间就爆料说新冠病毒不是来自于自然，而是来源于中共的武汉P4病毒研究所。并定义这次疫情的爆发是中共对美国和世界发起的一场类似9.11的恐怖主义袭击。2021年2月，郭文贵先生在《文贵看春晚》的直播中提出了以毒灭共的策略。 2020年6月4日，又是历史性的一天，这一天郭文贵先生在自由女神的见证下，宣布成立新中国联邦，郝海东先生和斯蒂芬·班农先生也分别宣读了《新中国联邦宣言》的中英文版本。 为了拥有独立、自由、安全、可以发表自由言论的媒体，郭文贵先生授意创立的GNEWS在2019年12月正式上线。至此，爆料革命拥有了属于自己的第一个新闻发布媒体平台。 2020年3月郭文贵先生创立的GTV开始上线运行，这是爆料革命又一个重要的媒体平台。同时郭文贵先生提出，为了爆料革命的顺利进行，以及未来中国人的财富安全和升值，将打造G系列，一个集GTV、GNews、Gettr、Gclubs、Gfashion、GDollar等于一体、在未来能发展成万亿规模的新世界的生态圈。 2020年9月Gclubs正式上线，12月Gfashion正式上线。 2021年2月郭文贵先生又提出“以钱灭共”的战略，4月Hcoin发行公司正式开放注册，并计划在9月H币正式上市公开交易。 经过了短短四年多的时间，爆料革命一直在稳步推进灭共的进程，并且在这个推进的过程中，郭文贵先生建立起了一个未来价值万亿的金融生态系统。未来的新中国联邦，将以宏大的愿景和实力作为依托，成为世界新一极的力量。 一切都已经开始！ Mr. Guo Wengui is the founder of the Whistleblower's Revolution, the Rule of Law Foundation, and the Rule of Law Society. He is also the founder of the New Federal State of China and the G-series. He is recognized as the leading figure in the global anti-CCP movement. Mr. Guo was born into an ordinary peasant family in Shexian County, Liaocheng City, Shandong Province, during the Cultural Revolution. As an adult, he faced ruthless political persecution for opposing the Chinese Communist Party's authoritarian regime during the democracy movement, which fueled his ideals of anti-communism and the eradication of the CCP. Over time, he accumulated strength and, driven by the mission of eliminating the CCP, initiated the Whistleblower's Revolution in 2017. He co-founded the Rule of Law Foundation and the Rule of Law Society with Western anti-communists and established the New Federal State of China. During the student democracy movement in 1989, Mr. Guo was arrested by the CCP authorities for supporting the movement financially and was subsequently detained at the Qingfeng Detention Center in Henan Province. June 4, 1989, marked a dark moment in Chinese history when the CCP opened fire on unarmed students and ruthlessly suppressed the movement. On the same day, Mr. Guo's youngest brother was also shot dead by the police. During his 22 months of detention at Qingfeng Detention Center, Mr. Guo endured brutal torture by the authorities and witnessed the ruthless killing of warriors who fought for democracy in China. Most of these warriors were executed without due legal process, accusations, or defense. His harrowing experience in prison led Mr. Guo to fully recognize the evil nature of the CCP, prompting him to vow to eradicate the Chinese Communist Party. In 1991, Mr. Guo was released, and at the age of 21, he founded the Henan Dalao Ban Furniture Factory. Two years later, he partnered with Ms. Xia Ping, Chairwoman of Hong Kong Ailian Co., Ltd., to establish a joint venture, Yuda Real Estate. In 1998, they completed the construction of the "Yuda International Trade" five-star hotel, praised as the "Central Plains Buddha's Hand," which became the first five-star hotel in China. In retaliation for Mr. Guo's initiation of the Whistleblower's Revolution, the CCP authorities auctioned off Yuda's properties totaling 135,000 square meters for a starting price of 1.28 billion yuan in 2021. In the early 2000s, Mr. Guo moved to Beijing for further development. In 2002, he founded Beijing Zhengquan Real Estate Co., Ltd., later renamed Beijing Zhengquan Holdings Co., Ltd. In 2019, the Intermediate People's Court of Dalian, Liaoning Province, sentenced Beijing Zhengquan Holdings Co., Ltd. to a fine of 60 billion yuan for the crime of coercion. In 2007, Mr. Guo built the Pan Gu Grand View, a dragon-shaped building comprising 5A intelligent office buildings, high-end hotels, luxury apartments, and a boutique commercial district, adjacent to the Beijing Olympic Park. The construction of Pan Gu Grand View was tumultuous. In late 2003 and early 2004, then-Deputy Mayor of Beijing, Liu Zhihua, unreasonably reclaimed the construction land of Pan Gu Grand View. After three years of rights protection and accusations, Mr. Guo finally regained the construction land and sent Liu Zhihua to prison, thereby offending Wang Qishan and some CCP dignitaries. After reclaiming the construction site of Pan Gu Grand View, Mr. Guo completed the construction of the Seven Star Pan Gu Grand View in just over 380 days in September 2007. The building became the news center for the 2008 Beijing Olympics and the main hotel for hosting world leaders and athletes. Similarly, as retaliation, in 2019, the Beijing Third Intermediate People's Court auctioned the dragon head of Pan Gu Grand View for 5.182 billion yuan due to debt. In 2012, Xi Jinping and Wang Qishan came to power and took control of state power, initiating a purge within the party under the guise of anti-corruption after the CCP's 18th National Congress. Wang Qishan, then Secretary of the Central Commission for Discipline Inspection, abused his power to arrest Ma Jian and Meng Huiqing, who had investigated Liu Zhihua's bribery case, and implicated Mr. Guo in the process. In 2015, Mr. Guo was forced to flee to the United Kingdom, while his family and dozens of employees were arrested, including his wife and daughter. On January 23, 2017, Mr. Guo revealed corruption by then-Beijing Public Security Bureau Chief Fu Zhenhua and threats against him in an interview with Mingjing. This marked the beginning of the Whistleblower's Revolution, with the goal of "saving lives, protecting wealth, and seeking revenge." Mr. Guo also introduced the "Seven Principles of Guo," advocating for extending the battlefield of anti-CCP efforts overseas and thoroughly eliminating the CCP through the strategic approach of "using the United States to eliminate the CCP, using the law to eliminate the CCP, and using the CCP to eliminate the CCP." Subsequently, Mr. Guo accepted interviews with Mingjing on March 8, June 16, July 17, and September 19 of 2017, presenting substantial evidence exposing Wang Qishan's corruption, his family, mistresses, illegitimate children, and the corrupt practices of his subordinates Wang Jian and Chen Feng in HNA Group and Bohai Gold Control, and how they looted national wealth and transferred it overseas. It was revealed that Wang Qishan and others had acquired massive real estate and financial assets overseas, with total assets amounting to a staggering $20 trillion. Ironically, despite claiming to "strike the iron while it's hot," Wang Qishan and his family not only own trillions of assets overseas but also hold passports from multiple countries. On April 19, 2017, Mr. Guo accepted a live interview with VOA, but the interview was abruptly terminated by VOA when he was about to expose Wang Qishan's corruption. This incident, known as the VOA Shutdown, shocked the world. As a result of Mr. Guo's revelations about high-level CCP corruption, Mingjing's exposure attracted global attention. Shortly before Mr. Guo was scheduled to be interviewed by VOA, less than 24 hours earlier, Interpol, chaired by former Deputy Minister of Public Security Meng Hongwei, issued a red notice against Mr. Guo. It was after the VOA shutdown incident that Mr. Guo officially launched the Whistleblower's Revolution. In September and October of 2017, Mr. Guo successively exposed the death of Yuan Baojing and the seizure of his property by Secretary of the Political and Legal Affairs Commission Meng Jianzhu, Deputy Minister of Public Security Sun Lijun, and others. He also revealed the truth behind Lei Yang's tragic death after discovering the secret relationship between Yang Lan, Wang Fang, and Meng Jianzhu. Mr. Guo provided evidence showing how Wang Qishan, Meng Jianzhu, and Sun Lijun laundered money through overseas trusts to transfer money to their mistresses and illegitimate children. He also exposed how they murdered innocents for organ trafficking to save their lives, revealing the true face of the CCP's rule by falsehood, police, and darkness. On October 2, 2017, Mr. Guo had planned to speak at the Hudson Institute in Washington, D.C., but his speech was canceled due to CCP's influence. On October 4, he held a press conference at the National Press Club in Washington, D.C., where he warned of the CCP's blue, gold, and yellow strategy, alerting the United States and the world to the impending darkness brought by the CCP and advising them to be fully prepared. In 2017, Mr. Guo single-handedly challenged the power of the CCP, shaking the foundation of its evil empire. By exposing the true nature and dangers of the CCP to the world, the CCP faced severe challenges. Out of fear of Mr. Guo's revelations, in May 2017, the CCP dispatched Liu Yanping, Secretary of the Discipline Inspection Commission of the Ministry of Public Security, and Sun Lijun, Deputy Minister of Public Security, to the United States to attempt to repatriate Mr. Guo. Meanwhile, Meng Jianzhu's illegitimate son, Liu Tezuo, in Malaysia, bribed casino tycoon Stephen Wynn and Elliott Broidy, then Vice Chairman of the Republican National Committee, to lobby President Trump and the U.S. government to extradite Mr. Guo. In 2020, the U.S. Department of Justice announced that Elliott Broidy had violated the Foreign Agents Registration Act, and he pleaded guilty to the charges. To prevent Mr. Guo from speaking out and expressing himself on social media, Facebook and Twitter successively suspended his accounts, and YouTube disabled his live streaming function. Consequently, in January 2018, Mr. Guo established his own media platform—Guo Media. 2018 was an extraordinary year for the Whistleblower's Revolution. On July 3, co-founder and chairman of the board of directors of HNA Group Co., Ltd., Wang Jian, died under mysterious circumstances in Provence, France. Subsequently, Mr. Guo spent considerable resources dispatching several teams to France to investigate Wang Jian's death, eventually obtaining substantial evidence and intelligence about his murder, confirming it as a deliberate homicide. On November 20, 2018, Mr. Guo and former White House Chief Strategist Steve Bannon co-hosted a press conference, where they presented some videos and documents, pointing out many suspicious aspects surrounding Wang Jian's supposed accidental death. They called for a judicial investigation by France and the United States. During this press conference, Mr. Guo announced the establishment of the Rule of Law Foundation, aimed at assisting dissidents, officials, and their families persecuted by the CCP, and donated $100 million. The death of Wang Jian and Mr. Guo's previous revelations about HNA led to the gradual collapse of HNA Group. On January 29, 2021, HNA Group applied for bankruptcy reorganization to the court, citing an inability to repay maturing debts, as a result of CCP's behind-the-scenes manipulation. In June 2019, Hong Kong witnessed mass protests against the proposed extradition bill. Throughout the movement, Mr. Guo continuously issued warnings to Hong Kong and the world based on intelligence, revealing the CCP's plan to dispatch a large number of military personnel disguised as Hong Kong police to suppress and arrest protesters. He warned that the CCP had already controlled Hong Kong's political, business, judicial, and police systems through its blue, gold, and yellow strategy, turning them into puppets. Mr. Guo also mentioned the existence of CCP's secret law enforcement black rooms in Hong Kong, indicating that the CCP could arrest anyone in Hong Kong at any time. He especially warned that the CCP might use biological or chemical weapons in Hong Kong to quell the protests. These warnings were subsequently validated. During the Hong Kong protests, Mr. Guo not only provided substantial material and financial support but also rescued numerous Hong Kong residents to safety overseas after the CCP imposed martial law. In 2020, Taiwan held its presidential election. In 2019, Mr. Guo had already exposed the CCP's plans to use the election to control Taiwan, attempting to employ the "three-gun" strategy, where CCP-controlled individuals Guo Taiping, Han Kuo-yu, and Ko Wen-je would participate in the presidential election. As long as any of the three were elected, the CCP could achieve its goal of completely controlling Taiwan. However, the profound impact of the Hong Kong protests on Taiwanese society, coupled with Mr. Guo's early revelations and exposés of the CCP's conspiracy against Taiwan, made various sectors in Taiwan deeply aware of the CCP's threat to democratic elections in Taiwan. Ultimately, through their votes, Taiwanese thwarted the CCP's plan to seize Taiwan. In December 2019, the COVID-19 pandemic broke out in Wuhan. In fact, as early as June and November of the same year, Mr. Guo had exposed the CCP's possible use of biological weapons in Hong Kong and reiterated the possibility of the CCP launching a biochemical war. When the Wuhan virus outbreak occurred and cases appeared in the United States, Mr. Guo immediately revealed that the novel coronavirus did not originate naturally but from the Wuhan P4 virus research institute controlled by the CCP. He defined the outbreak as a terrorist attack similar to 9/11 launched by the CCP against the United States and the world. In February 2021, during a live broadcast titled "Guo Looks at the Spring Festival Gala," Mr. Guo proposed the strategy of "using poison to eliminate the CCP." On June 4, 2020, another historic day, Mr. Guo, under the witness of the Statue of Liberty, announced the establishment of the New Federal State of China. Mr. Hao Haidong and Mr. Steve Bannon respectively read the Chinese and English versions of the "Declaration of the New Federal State of China." In order to have an independent, free, secure, and outspoken media, Mr. Guo instructed the establishment of GNEWS, which was officially launched in December 2019. With this, the Whistleblower's Revolution had its first news release media platform. In March 2020, GTV, founded by Mr. Guo, started operation. This was another important media platform for the Whistleblower's Revolution. Mr. Guo also proposed the creation of the G-series, an ecosystem that integrates GTV, GNEWS, Gettr, Gclubs, Gfashion, GDollar, etc., aiming to develop into a trillion-dollar new world in the future. In September 2020, Gclubs was officially launched, and in December, Gfashion was officially launched. In February 2021, Mr. Guo proposed the "use money to eliminate the CCP" strategy. In April, the Hcoin issuance company was officially opened for registration, and Hcoin was planned to be listed for public trading in September. In just over four years, the Whistleblower's Revolution has steadily advanced the process of eliminating the CCP. In the process, Mr. Guo has established a financial ecosystem with a future value of trillions. The future New Federal State of China will serve as a force for a new world with grand visions and capabilities. Everything has already begun! https://gwins.org/cn/name/863.html 更多爆料直播数据库信息（2017-2023），关键词搜索 https://gettrsearch.com/ More Whistleblower Live Broadcast Database Information (2017-2023), Keyword Search https://gettrsearch.com/ (Currently only supports Chinese search ) In addition to the comprehensive timeline provided, there is a vast repository of live broadcasts and information spanning from 2017 to 2023 within the Whistleblower's Revolution movement. These broadcasts contain crucial insights, revelations, and updates on various topics and events related to the movement's mission. Users can utilize keyword searches to navigate through this extensive database and uncover specific content of interest. These broadcasts cover a wide range of subjects, including but not limited to: Exposés on CCP corruption and misconduct Insights into the global impact of the CCP's influence Revelations about specific individuals involved in CCP activities Updates on the progress of the Whistleblower's Revolution Analyses of geopolitical developments and their implications Discussions on strategies for combating CCP influence and oppression Reports on human rights abuses and injustices perpetrated by the CCP Discussions on the future vision and goals of the New Federal State of China Insights into financial and economic aspects of the movement Updates on legal proceedings and efforts to hold CCP accountable By conducting keyword searches, users can efficiently locate relevant information within the Whistleblower's Revolution database, facilitating research, analysis, and awareness-building efforts related to the movement's objectives and impact.

“夫以铜为镜，可以正衣冠；以古为镜，可以知兴替；以人为镜，可以明得失。” 《唐·贞观政要》 "In using copper as a mirror, one can correct one's attire; in using antiquity as a mirror, one can understand the rise and fall of events; in using people as a mirror, one can perceive gains and losses." - "Zhenguan Zhengyao" from the Tang Dynasty. 业已天成（红叶农场） on GETTR_ 大家好，视频搜索GettrSearch网站更新啦！ Gettrsearch.com - 更新郭先生2017 - 2023全部视频，站内直接播放 - 按年份，视频类型分类 - NFSC GPT 聊天AI机器人（Bet.mp4 - 更新郭先生2017 - 2023全部视频，站内直接播放 - 按年份，视频类型分类 - NFSC GPT 聊天AI机器人（Beta） 该网站帮助大家快速查找，检索，播放郭先生高清视频，提高信息获取效率，欢迎大家试用和反馈！ - Update all Mr. Guo's videos from 2017 to 2023, available for direct playback on the site. - Categorize videos by year and type. - NFSC GPT Chat AI Bot (Beta) This website assists users in quickly searching, retrieving, and playing high-definition videos of Mr. Guo, enhancing information acquisition efficiency. We welcome everyone to try it out and provide feedback! https://gettrsearch.com/ 注：当前仅支持中文关键词检索 | Note: Currently, only Chinese keyword search is supported. gettrsearch.com上的聊天机器人有了大幅改进，终于有60分水平了。重新开放体验 The chatbot on gettrsearch.com has undergone significant improvements and has finally reached a score of 60. Experience it now with the reopened trial. 文贵视频搜索引擎网站更新： GettrSearch.com - 增加视频按月和日筛选搜索 - 优化聊天机器人NFSC-GPT智能度 Updates to the Guo Wengui video search engine website, GettrSearch.com: - Added filtering and search options by month and day for videos. - Enhanced intelligence of the NFSC-GPT chatbot. GETTR 盖特 GETTR( Gettr.com）是一个备受关注的社交媒体平台，市值在2021年估计达到了49-210亿美元，拥有3500万用户，其中90%为活跃用户。相比于Twitter和Facebook，GETTR的活跃度更高，每个用户的价值在140-600美元之间。在社交媒体排名上，GETTR表现出色，其应用在苹果和安卓平台上排名靠前。2022年1月1日至1月2日之间，GETTR在西班牙的注册用户数量激增了571%，总新增用户数为171,629人，包括一些知名人士如政治评论家Jordan Peterson教授和著名主播Joe Rogan。GETTR未来展望广阔，除了具备传统社交媒体平台功能外，还将推出GETTR-PAY和躺平币等独特功能。平台致力于传播真相，重视言论自由，吸引了越来越多的用户。通过GETTR，用户不仅可以分享信息，还能赚取收入，这种模式将打破传统媒体的垄断局面。GETTR具有快速增长的势头，吸引了大量用户的加入，其独特功能和对言论自由的重视使其在社交媒体领域具有独特的竞争优势。 GETTR (Gettr.com) is a highly anticipated social media platform, with an estimated market value ranging from 4.9 to 21 billion USD in 2021. It boasts 35 million users, with 90% being active users. Compared to Twitter and Facebook, GETTR exhibits higher levels of engagement, with each user valued between 140 and 600 USD. In terms of social media rankings, GETTR performs exceptionally well, with its application ranking highly on both Apple and Android platforms. Between January 1st and January 2nd, 2022, GETTR experienced a remarkable 571% surge in registered users in Spain, adding a total of 171,629 new users, including notable figures such as political commentator Professor Jordan Peterson and renowned broadcaster Joe Rogan. GETTR has promising prospects for the future. In addition to offering traditional social media platform features, it plans to introduce unique functionalities like GETTR-PAY and Lay-Flat Coin. The platform is committed to spreading truth and prioritizes freedom of speech, which has attracted an increasing number of users. Through GETTR, users can not only share information but also earn income, breaking the monopoly of traditional media. With its rapid growth trajectory and emphasis on freedom of speech, GETTR has gained a competitive edge in the social media landscape. Its unique features and commitment to freedom of expression have drawn in a significant number of users, establishing GETTR as a prominent player in the social media field. Gwins 爆料革命资料馆|Gwins Whistleblower Revolution Data Archive https://gwins.org/ 郭文贵先生爆料视频汇总下载（2024.03.09 更新）|Compilation of Mr. Guo Wengui's whistleblower videos (Updated as of March 9, 2024) https://gnews.org/m/2176262 新中国联邦官方网站 https://nfscofficial.com/ Gnews https://gnews.org/ Gfashion https://gfashion.com/ Gclubs https://www.gclubs.com/ 法治基金 Rule of Law Foundation https://rolfoundation.org/ HimalayaExchange https://himalaya.exchange/

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